纳米高聚合物转导Survivin反义寡核苷酸对大肠癌的体内杀伤作用

背景:近年来纳米载体已被视为突破基因转移瓶颈最有前途的技术之一.聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)是一种新型的纳米材料,体内外实验表明,PAMAM比其他阳离子载体的基因转染效率高、细胞毒性低.目的:探讨PAMAM介导Survivin反义寡核苷酸(Survivin antisense oligonucleotide,Survivin-asODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用.设计、时间及地点:肿瘤基因治疗体内实验,于2008-02/08在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成.材料:人结直肠癌细胞株SW620购自中科院上海细胞所,PAMAM树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室提供,脂质体Lipolifectmain~(TM)2000购自美国Invitrogen公司.Survivin-asODN 由上海生工公司合成.方法:将PAMAM和阳离子脂质体分别与Survivin-asODN混合得到载反义基因转染复合物.透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度.将对数生长期的人结直肠癌细胞SW620细胞接种于18只Balb/C裸鼠皮下建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机均分为脂质体组、PAMAM组和空白对照组.分别注射脂质体-survivin-asODN转染复合物、PAMAM-survivin-asODN转染复合物、血清培养液,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达.主要观察指标:阳离脂质体-survivin-asODN复合物及PAMAM-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率,种植肿瘤生长抑制率,移植瘤细胞Survivin蛋白的表达及活性.结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-asODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组差异无显著性意义.PAMAM对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-asODN复合物组(P<0.05).PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-asODN复合物组(P<0.05).结论:PAMAM能将Survivin-asODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长.     

聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸抑制人肝癌裸鼠 移植瘤生长的作用*☆

背景：采用反义寡核苷酸等治疗方法可以抑制凋亡抑制因子Survivin 的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。目前使用Survivin治疗恶性肿瘤仍存在基因载体转染效率低下、不能长期稳定表达、易被酶降解等难题。 目的：观察聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)脂质体介导Survivin-反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用。 方法：以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM脂质体和PAMAM分别与Survivin-反义寡核苷酸混合得到载反义基因转染复合物。测定复合物的zeta电位及包封率。将两种载基因复合物注射道裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小,检测移植瘤组织中survivin基因的表达。 结果与结论：PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物的zeta电位高于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物(P < 0.05),基因包封率两组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物治疗组裸鼠移植瘤质量及survivin蛋白表达低于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物组(P < 0.05)。提示PAMAM脂质体能将Survivin-反义寡核苷酸高效递送到人肝癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,诱导移植瘤细胞凋亡。 关键词：聚酰胺-胺型树枝状高聚合物;脂质体;肝癌;反义寡核苷酸;Survivin doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.020      

利用Agilent 定制基因芯片筛选相同病理类型、不同预后的早期乳腺癌的分子标记物

目的分析相同病理类型、临床分期（Ⅰ~Ⅱ期）但预后不同的乳腺癌组织的基因表达差异,筛选出有意义的基因组合,寻找
与乳腺癌预后相关的基因,探索可以早期预测乳腺癌预后的基因分型诊断标准。方法用Agilent定制人8×15 000芯片对筛选
出的实验组8例早期乳腺癌患者的组织标本,结合其预后数据,进行差异基因表达分析;采用Real-time PCR技术,在同期收集的
验证组42例乳腺癌样本中对差异表达的基因进行验证。结果基因芯片检测分析发现,实验组预后差样本比预后好样本有差
异表达基因132个,其中44条基因显著上调,88条基因显著下调（差异均在2倍以上）。结论相同病理类型、临床分期、不同预
后的早期乳腺癌组织中基因表达存在显著差异,CD44、MKI67、NTRK2、Nek2、C16orf60、TOP2A、ANCCA、RRM2等8个基因可
以作为早期乳腺癌预后预测基因标记物。
     

纳米高聚合物转导Survivin反义寡核苷酸对大肠癌的体内杀伤作用*

背景：近年来纳米载体已被视为突破基因转移瓶颈最有前途的技术之一。聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)是一种新型的纳米材料,体内外实验表明,PAMAM比其他阳离子载体的基因转染效率高、细胞毒性低。 目的：探讨PAMAM介导Survivin反义寡核苷酸(Survivin antisense oligonucleotide,Survivin-asODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。 设计、时间及地点：肿瘤基因治疗体内实验,于2008-02/08在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成。 材料：人结直肠癌细胞株SW620购自中科院上海细胞所,PAMAM树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室提供,脂质体LipolifectmainTM2000购自美国Invitrogen公司。Survivin-asODN由上海生工公司合成。 方法：将PAMAM和阳离子脂质体分别与Survivin-asODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将对数生长期的人结直肠癌细胞SW620细胞接种于18只Balb/C裸鼠皮下建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机均分为脂质体组、PAMAM组和空白对照组。分别注射脂质体-survivin-asODN转染复合物、PAMAM-survivin-asODN转染复合物、血清培养液,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。 主要观察指标：阳离脂质体-survivin-asODN复合物及PAMAM-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率,种植肿瘤生长抑制率,移植瘤细胞Survivin蛋白的表达及活性。 结果：PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P < 0.01),而zeta电位高于PAMAM- survivin-asODN复合物zeta电位(P < 0.05),基因包封率两组差异无显著性意义。PAMAM对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d。PAMAM- survivin- asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin- asODN复合物组(P < 0.05)。PAMAM- survivin-asODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-asODN复合物组(P < 0.05)。 结论：PAMAM能将Survivin-asODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长。 关键词：聚酰胺-胺型树枝状高聚合物;结直肠癌;反义寡核苷酸;Survivin doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.045     

聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长的作用

背景：采用反义寡核苷酸等治疗方法可以抑制凋亡抑制因子Survivin的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡。目前使用Survivin治疗恶性肿瘤仍存在基因载体转染效率低下、不能长期稳定表达、易被酶降解等难题。目的：观察聚酰胺-胺型树枝状高聚合物（polyamidoamine,PAMAM）脂质体介导Survivin-反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法：以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM脂质体和PAMAM分别与Survivin-反义寡核苷酸混合得到载反义基因转染复合物。测定复合物的zeta电位及包封率。将两种载基因复合物注射道裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小,检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果与结论：PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物的zeta电位高于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物（P〈0.05）,基因包封率两组比较差异无显著性意义（P〉0.05）。PAMAM脂质体-survivin-反义寡核苷酸复合物治疗组裸鼠移植瘤质量及survivin蛋白表达低于PAMAM-survivin-反义寡核苷酸复合物组（P〈0.05）。提示PAMAM脂质体能将Survivin-反义寡核苷酸高效递送到人肝癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,诱导移植瘤细胞凋亡。     

胃肠间质瘤精索转移一例

患者男性．72岁。无明显诱因反复右下腹隐痛不适1周而于2013年5月12日入院,疼痛无放射,持续十几分钟至数小时不等．自发缓解。患者曾于2011年4月22日因“左上腹腔肿物待查”而人院行“腹腔镜辅助胃壁肿物切除术加脾切除术”,术程顺利．术后恢复良好;当时病理诊断示：胃的胃肠间质瘤,高危险程度。免疫组织化学（免疫组化）检测示：     

改良减张缝合法在腹部切口的临床应用及对比研究

目的：研究改良减张缝合法对腹部切口愈合的影响。方法归纳经腹正中切口及腹直肌切口并行减张缝合的病例87例,按缝合方式分成两组：改良组（44例）采用改良减张缝合法;对照组（43例）采用传统减张缝合法。对两组患者的切口甲级愈合例数、切口裂开数、使用强阿片镇痛例数进行观察并作分析。结果改良减张缝合法与传统减张缝合法相比,前者切口甲级愈合情况优于后者,差异有统计学意义（P＜0．05）,两者术后切口裂开情况相比差异无统计学意义（P＞0．05）,改良组术后切口疼痛减轻,强阿片类镇痛药物使用率较对照组低,差异有统计学意义（P＞0．05）。结论改良减张缝合法在切口愈合上明显优于传统减张缝合法,可在临床应用中广泛推广。     

克罗恩病致背部肠瘘误诊为肠结核1例分析

对罗恩病致背部肠瘘误诊为肠结核1例分析如下.1 病历摘要男,50岁.2002年因腹胀2个月,腹痛、低热1个月入我院消化科,拟肠梗阻、肠结核经抗结核对症治疗后转我科行小肠肿物切除术,术中见回肠末端距回盲部60 cm处一肿物约12 cm×9 cm×8 cm,术后病理提示为小肠穿透性溃疡,伴多发小脓肿,可能为结核杆菌和寄生虫混合性感染,行抗结核治疗1 a.术后多次出现右下腹痛及发热,2006年再次因肠梗阻在当地医院行肠切除吻合术,术中提示肠间脓肿.2008-03出现右腰部红肿、疼痛,伴畏寒、发热,腰部切开排脓见肠内容物,诊断为右侧腰腹部脓肿并肠瘘形成,引流物经广州市疾控中心培养未发现结核杆菌;2009-03腹部原切口下方亦出现红肿、疼痛,切开引流见少许肠内容物,经治疗切口愈合.     

NERC-300高频焊接仪在大鼠肝部分切除术中的对比研究

目的 探讨NERC-300高频焊接仪与超声刀在大鼠肝部分切除术中的效果.方法 将48只大鼠分为实验组和对照组各24只.实验组应用NERC-300高频焊接仪行肝部分切除术,对照组采用超声刀,比较两组大鼠存活率、手术时间、出血量、工作温度、热损伤范围及术后第1、3、7天肝功能变化.结果 术后第3天肝功能实验组恢复优于对照组(P＜0.05),术中工作温度实验组低于对照组(P＜0.05),热损伤范围实验组低于对照组(P＜0.05);两组大鼠存活率、手术时间、出血量及术后第1、7天肝功能变化比较均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 NERC-300高频焊接仪行大鼠肝部分切除安全且有效.