慢病毒载体介导人非小细胞肺癌A549细胞Akt2基因靶向抑制

目的通过构建慢病毒shRNA表达载体,靶向抑制Akt2基因的表达,获得稳定干扰Akt2基因的细胞克隆,为进一步探讨Akt2的功能奠定基础。方法设计并合成针对Akt2靶基因的双链寡核苷酸序列,经退火、酶切、连接反应,将干扰序列插入pGCsil-GFP质粒,经感受态细胞转化、阳性克隆测序鉴定所插入的片段,经转染及慢病毒包装,收集浓缩病毒进行滴度测定,感染至人肺腺癌细胞A549,通过无菌流式细胞分选GFP强阳性细胞,并应用荧光定量PCR及Western-blot验证干扰效果。结果重组pGCsil-shAkt2-GFP质粒载体经阳性克隆测序鉴定显示插入序列与shAkt2干扰序列完全符合,测定重组慢病毒vshAkt2滴度为3E＋9TU/ml。重组慢病毒shAkt2感染A549细胞,经流式细胞术分选90.1%GFP为强阳性细胞群。通过qRT-PCR与western blot检测Akt2mRNA及蛋白表达水平,提示与正常对照组比较,shAkt2组细胞中Akt2mRNA水平下降63.39%,蛋白水平减少91.56%。结论本研究所构建的慢病毒shAkt2表达载体,能够在A549细胞内稳定、有效的抑制靶基因Akt2的表达,为深入研究Akt2在非小细胞肺癌（NSCLC）中的作用奠定了基础。     

消导“伏痰”对慢性阻塞性肺疾病急性发作通畅气道的影响

目的观察中药消导伏痰法与西药盐酸氨溴索静脉滴注对慢性阻塞性肺疾病急性发作（AECOPD）气道通畅的影响。方法将79例患者随机分为治疗组（40例）和对照组（39例）,在西医常规治疗基础上,治疗组内服中药,1剂/d,对照组静脉滴注盐酸氨溴索30 mg,2次/d。两组均治疗10 d为1个疗程。结果治疗后治疗组中医症候积分明显减少,PaCO2降低明显优于对照组,治疗组总有效率为95.0%,对照组总有效率为84.6%,异有统计学意义（P〈0.05）。结论中药消导伏痰法在AECOPD治疗中,能有效减少和清除痰液,通畅气道,从而改善通气,缓解临床症状,疗效确切。     

葛根素对肺心病高粘血症血液流变学影响的研究

观察葛根素注射液治疗肺心病高粘血症 2 3例 ,并与常规疗法 2 0例进行对比结果治疗组高切、低切全血比粘度、血浆比粘度、红细胞压积、纤维蛋白原、血沉较治疗前均有显著差异 (P<0 .0 1) ,而对照组除血沉、红细胞压积外无明显差异 (P >0 .0 5) ,说明该药对改善血流态、血粘度及微循环等有一定作用。     

健康人群隐球菌肺病临床特征探讨

目的探讨健康人群隐球茵肺病临床特征。方法回顾性分析四川大学华西医院2003年4月～2009年4月确诊的9例隐球菌肺病患者的临床资料。结果9例患者中男性7例,女性2例,年龄26~72岁,平均49岁。其中56％无基础疾病,HIV抗体均阴性,44％无明显临床症状,56％有下例临床表现：干咳3例,低熟1例,盗汗1例,胸痛2例,头痛1例。影像学表现：表现为结节或块影有7例;表现为纤维结节影有2例。病理学表现：9例均为肉芽肿性病变,7例查见多核巨细胞中有隐球茵芽生酵母细胞,余2例表现为慢性肉芽肿性炎伴片状坏死及纤维化,痰涂片检查均为阴性。结论隐球茵肺病多发生在健康状况较好的中青年男性,临床症状与影像学表现不相称,需要早期通过经皮肺活检或支气管镜检查取得肺部活组织进行病理学检查确诊,采用抗真菌药物治疗预后好。     

葛根素配伍酚妥拉明治疗肺心病并发心衰60例临床观察

应用葛根素配伍酚妥拉明治疗肺心病并发右心衰竭 6 0例 ,并与常规疗法 56例进行对比观察。结果 :治疗组总有效率为 93 .3 % ,对照组为 75.0 % ,两组对比有显著性差异 ( P<0 .0 1 )。治疗组血液流变学及血气指标有显著改善 ,对照组改善不明显。提示 :葛根素配伍酚妥拉明治疗肺心病右心衰 ,能疏通微循环 ,减少血管阻力 ,减轻心脏负荷 ,改善心肺功能     

无水酒精注射治疗上消化道息肉

上消化道息肉的治疗，现时均采用内镜直视下高频电凝摘除术，在笔者１０多年来的治疗工作中发现，当息肉表现为无蒂或亚蒂和短粗蒂时以及某些良性隆起性病灶时，高频电凝摘除这样的息肉往往感到十分不便，并有可能引起消化道出血及穿孔。近年来笔者采用了无水酒精注射治疗上消化道息肉的方法，共治疗不适宜作高频电凝切除的息肉２３例，并获得成功。现介绍如下。１临床资料１．１一般资料：２３例中男１４例，女９例。年龄１９～５５岁，息肉均是单发。息肉部位：食管４例，贲门６例，胃底 ６例，胃体４例，胃窦 ３例。息肉的大小： 〈Ｉｃ…     

浅谈静脉留置针穿刺技巧

通过对562例患者采用静脉留置针穿刺,提高了静脉穿刺成功率,减轻了病人反复穿刺的痛苦.     

流星针法刺新奇穴治疗脑血管病举隅

笔者在临床上发展运用著名针灸老专家李仲愚教授传授的奇穴疗法 ,并独创“流星针法” ,治疗脑血管系统疑难病症取得满意疗效 ,兹举隅报道如下。1　流星针法持针者以快速捻转毫针针柄时 ,利用毫针在瞬间快速旋转而针尖在接触腧穴部位时脱离持针者指腹 ,如流星瞬间直刺入腧穴 ,再行捻转或提插手法 ,得气后留针 2 0～ 30分钟。此针法进针快 ,针刺入后不良刺激副反应少 ,得气迅速。适宜于头、面、胸、背、四肢远端较浅刺的腧穴 ,对血管神经性头痛、中风后遗症、痹证、失眠、心悸、眩晕及内脏疼痛等病症 ,在辨证选穴基础上用此针法疗效较佳。2　…     

房性早搏致房内差异性传导1例

患者男,85岁。因反复咳嗽、气紧30余年,加重伴下肢水肿15d入院。临床诊断：肺源性心脏病。图1为同次Ⅱ导联心电图,中、下行为连续记录。P1、8-14、20、21、28-30为正常形态的窦性P波,P-R间期0．16s,P-P间期0．66～0．68s(89次／min)。P2、15、22为提前出现的房性早搏,P′波重叠于前一次窦性搏动的T波上,致T波增高,下传的QRS形态、时间及初始向量与窦性下传的一致,