D-半乳糖诱导的心肌细胞自噬下降与microRNA的表达变化有关

目的探讨microRNA(miRNA)和衰老心肌细胞自噬之间的关系。方法使用0、4、8、16、20 g/L D-半乳糖刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老,刺激3、6、9天后,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平;电镜观察D-半乳糖刺激衰老大鼠心肌细胞自噬体形成;分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测衰老大鼠心肌细胞与正常H9c2细胞中miRNA-30a、miRNA-126、miRNA-204及自噬蛋白LC3B II/LC3B I表达水平。结果与对照组比较,随着药物浓度的升高及刺激天数的增加,细胞染色逐渐加深,在D-半乳糖浓度为8 g/L刺激9天时,细胞染色最明显;电镜结果显示,D-半乳糖诱导衰老心肌细胞自噬体减少;Western blot结果显示,衰老心肌细胞LC3B II/LC3B I水平降低;实时荧光定量PCR结果显示,诱导衰老组心肌细胞中,miRNA-30a、miRNA-126表达水平明显下降,miRNA-204表达水平明显上升。结论 D-半乳糖诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低的过程中,存在miRNA-30a、miRNA-126表达水平的降低以及miRNA-204表达水平的增加,miRNA的差异表达可能是衰老心肌细胞自噬水平变化的重要机制。     

鹅绒藤对小鼠抗惊厥作用的观察

目的：观察鹅绒藤全草水提物和氯仿提取物的抗惊厥作用。方法：采用小鼠超强电休克惊厥（MES）和戊四氮惊厥（MET）法研究提取物对实验性惊厥的影响;自主活动仪法观察提取物对小鼠自主活动的影响;转轮法测定提取物对小鼠的最小中枢神经系统毒性;采用协同阈下剂量戊巴比妥钠催眠实验,观察提取物对镇静催眠药物的协同作用。结果：鹅绒藤水提物可以对抗戊四氮惊厥（ED50=2.34g／kg）,鹅绒藤氯仿提取物在试验剂量范围内无作用。鹅绒藤氯仿提取物可以对抗最大电休克（ED50=1.34g／kg）,而水提物无对抗最大电休克的作用。两种提取物对阈下剂量戊巴比妥钠（30ms／ks,ip）的催眠效应有协同作用,水提物作用的ED50为2.36g／kg,氯仿提取物作用的ED50为0.75g/kg。两种提取物对实验小鼠自主活动有剂量依赖性抑制作用。在本实验条件下,两种提取物未呈现出中枢神经系统毒性。结论：鹅绒藤全草水提物和氯仿提取物可以对抗不同的小鼠实验性癫痫模型,鹅绒藤抗癫痫作用广泛,同时具有中枢抑制作用。     

氧化槐定碱镇痛作用及其对小鼠中枢PKCγ表达的影响

目的研究氧化槐定碱(oxysophoridine,OSR)的镇痛作用及对小鼠脊髓背角、大脑皮层和丘脑蛋白激酶Cγ(Protein kinase C-γ,PKCγ)免疫阳性细胞的影响。方法用热板法观察并分析iv、icv途径给药后OSR镇痛作用强度及作用部位,免疫组织化学方法(SABC法)检测OSR对小鼠脊髓背角、大脑皮层和丘脑PKCγ免疫阳性细胞的影响。结果iv OSR 500、250、125mg·kg-1及icv OSR 100、50、25mg·kg-1均可延长小鼠热板反应舔足潜伏期(P<0.05、P<0.01),痛阈提高率分别为42.51%(iv)和60.70%(icv)。ip OSR 1000mg·kg-1可使小鼠脊髓背角、大脑皮层和丘脑PKCγ免疫阳性细胞明显减少(P<0.01)。结论OSR外周和中枢给药均有镇痛作用,PKCγ参与了OSR的镇痛作用。     

尾加压素Ⅱ对大鼠血管外膜阳离子氨基酸转运体的影响

目的观察尾加压素Ⅱ(UII)对大鼠主动脉血管外膜阳离子氨基酸转运体(CAT-1、CAT-2B)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达影响。方法 SD大鼠24只,250~300g,随机分为空白对照组、UII组(10-9和10-8mol.L-1)和脂多糖(LPS)阳性对照组,每组6只。分离雄性SD大鼠胸主动脉外膜,分别加入单纯孵育液、不同浓度UII和LPS孵育6h。测定孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量;RT-PCR方法测定CAT-1、CAT-2B和iNOS mRNA基因表达。结果与对照组比较UII(10-9~10-8.L-1)刺激血管外膜NO2-生成增加(27%,P<0.05,和49%,P<0.01);UII组血管外膜阳离子氨基酸转运体(CAT-1和CAT-2B)mRNA水平增加(均P<0.01),iNOS mRNA表达增加(P<0.01)。结论 UII可激活血管外膜CAT-1和CAT-2B基因表达,其变化可能参与了NO释放从而引起血管的扩张。     

尾加压素Ⅱ对大鼠血管外膜阳离子氨基酸转运体的影响

目的观察尾加压素Ⅱ（UII）对大鼠主动脉血管外膜阳离子氨基酸转运体（CAT-1、CAT-2B）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因表达影响。方法 SD大鼠24只,250~300g,随机分为空白对照组、UII组（10-9和10-8mol.L-1）和脂多糖（LPS）阳性对照组,每组6只。分离雄性SD大鼠胸主动脉外膜,分别加入单纯孵育液、不同浓度UII和LPS孵育6h。测定孵育液中亚硝酸盐（NO2-）含量;RT-PCR方法测定CAT-1、CAT-2B和iNOS mRNA基因表达。结果与对照组比较UII（10-9~10-8.L-1）刺激血管外膜NO2-生成增加（27%,P〈0.05,和49%,P〈0.01）;UII组血管外膜阳离子氨基酸转运体（CAT-1和CAT-2B）mRNA水平增加（均P〈0.01）,iNOS mRNA表达增加（P〈0.01）。结论 UII可激活血管外膜CAT-1和CAT-2B基因表达,其变化可能参与了NO释放从而引起血管的扩张。     

氧化槐定碱镇痛作用的实验研究

氧化槐定碱是从豆科槐属植物苦豆子Sophoraa lop ecuroid es L.中提取的生物碱,以往的研究显示其在抗心律失常、抗炎、镇静、免疫调节等方面均具有药理活性[1,2],但关于其镇痛作用尚未见文献报道。本实验用经典的药理实验方法研究其镇痛作用。1材料1.1动物:昆明种小鼠,雌雄兼用,体重18~22 g,兰州生物制品研究所提供。1.2药品与试剂:氧化槐定碱由宁厦药物研究所提供,质量分数>99%,批号960368。吗啡购自东北制药厂,粉剂,批号590004。甲醛为分析纯,批号010818,北京化学试剂公司生产。1.3仪器:YLS—6A智能热板仪(山东医疗设备站供应)。2方法2…     

氧化槐定碱镇痛作用的实验研究

氧化槐定碱是从豆科槐属植物苦豆子Sophoraa lop ecuroid es L.中提取的生物碱,以往的研究显示其在抗心律失常、抗炎、镇静、免疫调节等方面均具有药理活性[1,2],但关于其镇痛作用尚未见文献报道。本实验用经典的药理实验方法研究其镇痛作用。1材料1.1动物:昆明种小鼠,雌雄兼用,体重18~22 g,兰州生物制品研究所提供。1.2药品与试剂:氧化槐定碱由宁厦药物研究所提供,质量分数>99%,批号960368。吗啡购自东北制药厂,粉剂,批号590004。甲醛为分析纯,批号010818,北京化学试剂公司生产。1.3仪器:YLS—6A智能热板仪(山东医疗设备站供应)。2方法2…