医学检验专业临床实习质量的管理与考核

对医学检验专业实习量化管理和考核进行研究与探讨,制定实习管理量化指标和临床综合能力量化考核指标,以加强毕业实习管理力度和提高临床实习质量。     

生脉注射液对缺氧缺血性脑病新生儿脑血流动力学影响

目的利用彩色多普勒超声研究缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿脑血流动力学变化,观察生脉注射液对HIE新生儿脑血流动力学的影响,探索HIE早期治疗干预措施。方法将50例HIE患儿随机分为生脉组(30例)和胞磷胆碱组(20例),分别于治疗前及治疗1周后进行脑血流动力学参数。包括大脑中动脉和大脑前动脉的收缩期峰值流速(PSFV)、舒张末期血流速度(EDFV)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI)检测,并与正常对照组进行对比研究。结果HIE患儿PSFV、PI及RI均低于正常对照组,差异均有显著性(P均<0.05);两组治疗后PSFV、EDFV、RI较治疗前明显提高(P<0.01,0.05),生脉组大脑前动脉血流速度的改善明显高于胞磷胆碱组(P<0.01,0.05)。结论HIE新生儿脑血流动力学出现明显紊乱,应用无损伤性彩色超声诊断仪监测脑血流动力学变化有助于早期评估其预后,并指导临床治疗;生脉注射液、胞磷胆碱治疗HIE均有效,但生脉注射液优于胞磷胆碱。     

辛伐他汀对新生鼠脑缺氧缺血后细胞间黏附分子1的影响

目的：观察缺血缺氧性脑损伤时皮质和海马区细胞间黏附分子1mRNA的表达，以及辛伐他汀的干预作用，并以胞二磷胆碱作标准对照。方法：实验于2003-04／2004-02在东南大学临床医学院实验室进行。选用144只7日龄SD大鼠，随机分为4组，每组又分为0，12，24，48，72h和7d6个时间点，每个时间点6只。①假手术组：手术游离左侧颈总动脉但不结扎，不干预。②生理盐水组：结扎左侧颈总动脉建立缺氧缺血性脑损伤模型后，于即刻及之后的每天同一时刻腹腔注射生理盐水10mL／kg。③胞二磷胆碱组：同前造模，于相同时间点给予胞二磷胆碱稀释液（胞二磷胆碱15mL＋生理盐水85mL）10mL／kg。④辛伐他汀组：造模同前，于相同时间点给予辛伐他汀20mg／kg。各组均于相应时间点取脑皮质和海马，观察脑外观，反转录-聚合酶链反应检测细胞间黏附分子1mRNA表达，以细胞间黏附分子1／β-actin吸光度表示。结果：144只动物进入结果分析。①左侧脑皮质细胞间黏附分子1mRNA表达：假手术组各时间点无差异（P〉0．05），其他3组于缺氧缺血后12h时始显著升高，24h达高峰，然后开始回落，但胞二磷胆碱组、辛伐他汀组于12，24，48和72h时显著低于生理盐水组，7d时，辛伐他汀组已接近假手术组水平（P〉0．05），且72h时，辛伐他汀组显著低于胞二磷胆碱组（P〈0．05）。②脑左侧海马细胞间黏附分子1mRNA表达：与脑皮质类似，生理盐水组、胞二磷胆碱组和辛伐他汀组在缺氧缺血后12h始升高，24h达高峰，然后开始下降，但胞二磷胆碱组、辛伐他汀组于12，24，48和72h时显著低于生理盐水组，7d时，辛伐他汀组已接近假手术组水平（P〉0．05），生理盐水组和胞二磷胆碱组表达量接近（P〉0．05），仍然显著高于假手术组（P〈0．01）。③脑外观：12h开始，生理盐水组结扎侧大脑半球出现水肿、苍白、液化坏死、萎缩的全过程，胞二磷胆碱组程度明显减轻，辛伐他汀组仅出现轻微水肿。结论：细胞间黏附分子1在缺氧缺血脑损伤后12h的表达显著升高，24h达高峰，然后持续下降，7d时虽明显下降，但仍高于正常水平，胞二磷胆碱和辛伐他汀均能有效地抑制其表达，对缺氧缺血脑损伤起到保护作用，但辛伐他汀的作用更强更快。     

神经生长因子对新生大鼠脑神经元细胞缺氧缺血损伤的保护作用

目的：观察神经生长因子对新生大鼠脑神经元细胞缺氧缺血性损伤的保护作用。 方法：实验于2004-01／06在东南大学临床医学院中心实验室完成。①体外培养新生脑皮质神经元细胞后，改良Goldberg方法建立神经元细胞“缺氧缺血”损伤模型。②应用光学显微镜、透射电镜观察不同组之间（正常组、缺氧缺血组、缺氧缺血后即刻给以神经生长因子-80μg／L治疗组）神经元细胞形态、超微结构改变。③应用细胞免疫化学方法检测神经生长因子治疗组细胞色素C基因在转录及翻译水平的表达，与正常组及缺氧缺血组进行比较。 结果：①光镜测量缺氧缺血组细胞突起长度明显低于正常组和治疗组[（7．591&;#177;1．354），（23．7595&;#177;0．945），（23．466&;#177;1．005）μm]，而其细胞色素C阳性率及AIF mRNA表达相对含量明显高于另两组[（69.318&;#177;6．646）％，（41．193&;#177;4．472）％，（41．817&;#177;4．364）％，P〈0．05]。上述测值正常组与治疗组差异无显著性（P〉0．05）。②透射电镜观察细胞：缺氧缺血对照组细胞核形状不规则，染色质凝聚成块，核周间隙明显增厚，线粒体肿胀空泡化；正常组神经元细胞及治疗组神经元细胞核大呈圆形或椭圆形，常染色质均匀分布，可见明显的核仁，胞浆内线粒体、粗面内质网结构清晰，核糖体丰富。 结论：①体外培养新生大鼠脑皮质神经元细胞，剥夺氧及糖6h后能够模拟缺氧缺血性神经元细胞损伤。与正常组相比，缺氧缺血模型组光镜及电镜示凋亡小体存在，线粒体结构异常；细胞色素C细胞免疫化学示阳性率明显增加。②适宜浓度（80μg／L）的外源性神经生长因子能够促进缺新生大鼠脑缺氧缺血性神经元细胞修复，保护线粒体。     

缺氧缺血致低龄大鼠脑白质损伤和神经功能障碍的实验研究

目的建立未成熟鼠脑白质损伤模型并研究脑白质损伤与少突胶质细胞间关系。方法3日龄SD大鼠随机分为实验组和假手术组。实验组结扎左侧颈总动脉,术后吸6%氮氧混合气4h,假手术组仅分离左侧颈总动脉,分别于术后24h、48h、72h、11d取脑。采用HE染色、免疫荧光双标记观察新生大鼠脑组织病理变化、少突胶质细胞凋亡;>1月龄鼠测试行为、记忆能力的改变。结果缺氧缺血导致脑白质疏松和脑室扩大等病理变化,深部白质少突胶质细胞凋亡数在损伤后24、48、72h较对照组增多(P<0.05),48、72h两组差异有统计学意义,术后11d两组差异无统计学意义(P>0.05)。模型鼠出现生长发育延迟及神经行为功能缺陷。结论采用3日龄大鼠单侧颈总动脉结扎联合低氧模型研究早产儿脑白质损伤是可行的。     

人脐带间充质干细胞对新生鼠脑白质软化灶的神经保护作用

目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUcMSCs),对新生未成熟鼠脑室周围白质软化灶受损神经细胞的保护作用.方法:建立新生大鼠PVL(periventricular leukomalacia)动物模型,造模后随机分为两组.于第5天(P5d)分别给两组大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)标记的第二代HUcMSCs[每只1×107(0.05 ml)-1]或0.05 ml PBS无菌溶液.24 h后(P6d)处死一组大鼠,行BrdU染色观察HUcMSCs在鼠脑内的迁移;另一组于移植HUcMSCs后14 d(P19d)行微型MRI(MicroMRI)扫描观察受损区域修复程度,髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)染色观察移植HUcMSCs对大鼠脑室周围脑白质损伤的保护.结果:HUcMSCs在宿主体内明显向侧脑室周围白质损伤区域迁移,且脑室周围存活少突胶质细胞数量明显多于注射PBS组,微型MRI扫描观察到HUcMSCs可缩小受损脑白质病灶,远期神经行为学观察到HUcMSCs移植组神经行为学高于PBS组(P<0.05).结论:HUcMSCs对新生大鼠PVL具有神经保护作用,可缩小病变范围.     

新生大鼠缺氧／缺血性脑损伤时皮层神经元HIF-1仪的表达与凋亡相关基因P53、Bcl-2的关系

目的：探讨新生大鼠缺氧／缺血性脑损伤时皮层神经元缺氧诱导因子-lot（HIF-1d）的表达及其与凋亡相关基因P53、Bcl-2的关系。方法：新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺氧组和缺氧／缺血组,在缺氧或缺氧／缺血后3、6、12、24、72h断头取脑,HE染色观察脑组织病理学改变,免疫组织化学方法检测皮层神经元HIF-10t、P53及Bcl-2表达情况。结果：单纯缺氧组和缺氧／缺血组大鼠脑组织HE染色显示：脑皮层神经元均有不同程度的损伤,于24h时损伤最重,细胞溶解缺失明显;皮层HIF-lot于缺氧／缺血后3h表达升高,12h达高峰,之后呈下降趋势;皮层P53表达高峰较HIF-lot推后,24h达高峰,之后呈下降趋势;Bcl-2表达规律与HIF-la一致。假手术组P53／Bcl-2值约等于1;单纯缺氧组和缺氧／缺血组3、6、12h3个时间点上P53／Bcl-2值小于1,24、72h2个时间点上P53／Bcl-2值大于1。结论：在新生大鼠缺氧／缺血性脑损伤时,HIF-lOL参与了对P53及Bcl-2的调控,在缺氧损伤早期可能具有抗凋亡作用。     

疼痛对新生儿的不良影响及干预对策

随着新生儿专业医疗、护理技术的进步,新生儿抢救成功率有了大幅度提高。在救治新生命的同时,新生儿医务工作者,尤其是新生儿重症监护室(NICU)医护人员要充分意识到患病新生儿,特别是早产儿所面临的医疗环境与胎儿期子宫内环境、健康新生儿的生存环境有着巨大差别,NICU多重干预     

新生儿行为神经测定在缺氧缺血性脑病中的应用

目的 :探讨新生儿行为神经测定在缺氧缺血性脑病 (HIE)患儿中的临床表现及预后的相关性 ;方法 :应用行为神经测定评分对 1 2 0例缺氧缺血性脑病患儿进行动态评估 ,并与临床分度及预后进行比较 ;结果 :①出生一周内评分异常者占比例较大 ,经过治疗后第2周～第 4周评分异常者逐渐减少 ,第 3次与第 1次比较P <0 .0 1 ,差异有显著性 ;②HIE病情愈严重 ,评分愈低 ,且治疗效果不显著 ,尤其重度HIE虽经 4周治疗 ,动态观察评分虽有提高 ,但无统计学意义 ;结论 :对HIE患儿进行动态行为神经测定 (NBNA)评分 ,并结合临床表现有助评估HIE患儿的病情和预后。     

黄芪对新生大鼠脑缺氧缺血损伤后海马治疗作用的研究

目的：探讨新生儿缺氧缺血脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage，HIBD)后，脑细胞损伤的机制和黄芪对海马区的神经保护作用。方法：用新生大鼠建立新生儿HIBD模型，于缺氧后不同时间点取脑，分别行组织病理学检查并计数海马CAI区神经细胞死亡率、免疫组化检测结扎倒海马区天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白的表达，三等分迷宫测试成熟大鼠学习记忆能力。分假手术组、模型组和黄芪治疗组观察并对比上述指标。结果：模型组结扎侧海马caspase-3蛋白表达于缺氧缺血(HI)后6h轻度升高，24h达高峰，48h后下降，5d和7d时渐恢复至基础水平。黄芪组HI后结扎侧海马神经细胞死亡率明显降低、caspase-3蛋白的表达峰值降低了35％～41％，成熟大鼠的学习记记忆能力明显提高。结论：黄芪对未成熟脑HIBD后海马部位有明显的神经保护功能，此功能与抑制caspase-3的表达有关。