母婴围产期TORCH感染及其病原体检测

TORCH是一组广泛传播的病原微生物 ,孕妇易原发和复发感染 ,并可发生宫内传播 ,引起胎儿、新生儿感染 ,造成流产、早产、死胎、胎儿畸形和新生儿智力障碍等严重后遗症。因此 ,筛查TORCH意义重大。血清学方法和分子生物学技术在TORCH各病原体的检测中广泛应用 ,并发挥了巨大的作用。本文就围产期母婴TORCH感染的危害及其各病原体的检测作一综述。     

黄芪对新生鼠乏氧缺血脑损伤后海马区神经的保护及学习记忆能力的干预

背景:黄芪可通过减轻兴奋性氨基酸的释放及在细胞间的堆积、缓解Ca2 超载、抗氧化等途径抑制凋亡的发生。目的:将黄芪用于未成熟脑缺氧缺血脑损伤的治疗,一方面检测其对海马缺氧缺血后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA表达水平的影响,另一方面通过迷宫实验观察黄芪对缺氧缺血脑损伤的成熟鼠学习记忆能力的干预。设计:随机对照实验。单位:东南大学临床医学院/附属中大医院儿科,基础医学院病理科。材料:实验于2002-10/2003-06在东南大学临床医学院实验中心完成。选取出生7d的同窝SD大鼠114只,随机分成3组:假手术组18只,模型组48只,黄芪治疗组48只。黄芪注射液由成都地奥九泓制药厂生产,规格为10mL/支,含生药20g。方法:模型组与黄芪治疗组建立缺氧缺血脑损伤模型,假手术组不造模。黄芪治疗组于造模后即刻及每天同一时间腹腔注射0.08mL黄芪注射液,7d后停药,模型组于同时间腹腔注射等量生理盐水,假手术组不给药。黄芪治疗组及模型组在缺氧缺血后24h,5d断头取脑,假手术组于假手术后24h断头取脑。各组海马区脑损伤行组织病理学检测,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA的表达采用半定量反转录-聚合酶反应方法进行检查,成年90d龄的大鼠进行三等分迷宫测试其学习记忆能力,3个实验各自独立。主要观察指标:①各组海马区脑损伤组织病理学检测。②各组结扎侧海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA的表达。③三等分迷宫试验结果。结果:实验纳入大鼠114只,全部进入结果分析。①各组海马区脑损伤组织病理学检测:假手术组双侧海马区组织无水肿、坏死,神经细胞形态正常,神经细胞数为(87.7±0.6)×103/高倍视野。模型组24h时结扎侧海马区水肿,细胞周围间隙增宽,神经细胞数减少为(68.8±3.0)×103/高倍视野,与假手术组比较差异显著(P<0.01);5d时结扎侧海马体积缩小,锥状细胞层紊乱,神经细胞稀少至(48.7±2.2)×103/高倍视野,与假手术组及同侧24h时比较均有显著差异(P<0.01)。黄芪治疗组24h时结扎侧海马区组织水肿较模型组明显减轻,5d时可观察到完整的海马形态,此两时间点神经细胞死亡率均较模型组明显减低(P<0.01)。②各组结扎侧海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA的表达:假手术组以低水平表达,吸光度值为0.220±0.009。模型组于缺氧缺血后逐渐升高,6h时比假手术组升高11%,至24h时mRNA水平达高峰,较假手术组约升高260%(P<0.01),高峰持续至48h后下降,5d和7d时恢复基础水平。黄芪治疗组变化趋势与模型组相似,但在24,48h两时间点时峰值降低了44%～46%,与模型组比较差异显著(P<0.01)。③三等分迷宫试验结果:与模型组比较,黄芪治疗组达到学会标准所需训练次数明显减少犤(45.7±2.7),(16.1±2.5)次,P<0.01犦,缺氧缺血24h后记忆保持率显著提高犤(48.3±11.7),(80.0±9.0)%,P<0.01犦。结论:黄芪可以有效抑制未成熟脑缺氧缺血损伤后海马区神经细胞的凋亡,提高神经细胞存活率,此种保护作用与抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达有关。同时黄芪能够明显改善未成熟脑缺氧缺血损伤后的学习记忆能力。     

代谢性酸中毒诱导新生大鼠视网膜新生血管缺氧诱导因子-lα的表达及其意义

目的 探讨缺氧诱导因子-lα(hypoxia-inducible factor-lα,HIF-lα)在代谢性酸中毒诱导视网膜新生血管中的表达和意义.方法 将120只新生SD大鼠随机分为酸中毒模型组和正常对照组,各60只.酸中毒模型组出生后第2天开始按535 mg/(kg·d)的剂量管饲氯化铵溶液 (质量浓度为50 mg/ml),2次/d,连续6 d,停药进入恢复期.2组大鼠分别于出生后第3、5、8、10、13、20天处死.二磷酸腺苷酶组织化学染色法观察新生大鼠视网膜血管的形态改变;HE染色观察视网膜血管增生情况,判断建模成功与否;免疫组织化学方法检测视网膜HIF-1α蛋白的表达变化.结果 二磷酸腺苷酶组织化学染色法显示酸中毒模型组大鼠10日龄可见视网膜大量新生血管异常形成,周边可见大片无灌注区.HE染色可见酸中毒模型组新生大鼠10日龄视网膜突破内界膜血管内皮细胞核显著多于同龄对照组,分别为(28.78±7.53)个与(1.22±1.48)个,差异有统计学意义(t=11.169,P<0.01).免疫组织化学结果显示,酸中毒模型组新生大鼠8、10、13日龄时视网膜HIF-1α的表达强度分别为108.87±15.21、183.68±26.58和129.42±9.85,明显高于同龄对照组,分别为74.98±4.50、76.38±3.38和74.78±1.86,差异均有统计学意义(t=4.625、9.023和9.672,P均<0.05).结论 HIF-1α在酸中毒诱导视网膜新生血管的发生、发展过程中可能发挥重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the expression and significance of hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) in the retinal neovascularization by metabolic acidosis in newborn rats. Methods One hundred and twenty newborn SD rats were randomly divided into acidosis (experiment) and normoxia (control) groups. A total of 60 newborn rats in experiment group underwent tubal feeding day for 6 days and followed by a period of recovery. The rats in the two groups were sacrificed at the 3rd, 5th, 8th, 10th, 13th and 20th day after birth, respectively. The morphologic changes of retinal vessels were estimated by observing the vascular pattern in adenosine diphosphatase stained retina flat mounts. The newborn vessels were quantified by HE staining. Immunohistochemical method was used to detect HIF-1α expression. Results In experiment group, numerous neovascularization and un-perfused area at the periphery of vessels occurred on the 10th day. The result of HE staining showed that in experiment group of 10-day old,the number of neovascular nuclei extending into the vireo was 28.78±7.53, and that of the control group was 1.22±1.48 (t=11.169,P<0.01). The results of immunohistochemistry revealed that the expression of HIF-1α protein were stronger in the experiment group than in the control group on the 8th, 10th and 13th day, and there were significant differences between the two groups (108.87±15.21, 183.68±26.58 and 129.42±9.85 vs 74.98±4.50, 76.38± 3.38 and 74.78±1.86, t=4.625, 9.023 and 9.672,P<0.05). Conclusions HIF-lα might play an important role in retinal neovascularization.     

新生大鼠缺氧/缺血性脑损伤时皮层神经元HIF-1α的表达与凋亡相关基因P53、Bcl-2的关系

目的:探讨新生大鼠缺氧/缺血性脑损伤时皮层神经元缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与凋亡相关基因P53、Bcl-2的关系.方法:新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺氧组和缺氧/缺血组,在缺氧或缺氧/缺血后3、6、12、24、72 h断头取脑,HE染色观察脑组织病理学改变,免疫组织化学方法检测皮层神经元H...     

蛋白质组学在神经系统疾病中的应用

蛋白质组学的概念自提出以来 ,研究方法中双向凝胶电泳、质谱分析、计算机软件分析等技术的发展突飞猛进 ,研究范围不断扩展 ,目前已成为生物医学领域中极其活跃的学科。蛋白质组学为人类疾病的研究提供了崭新的思路和技术 ,在对中枢神经系统疾病的研究中 ,通过表达蛋白质组学和细胞图谱蛋白质组学揭示其发病机制 ,为寻找疾病特异性蛋白质协助诊断和寻找药物作用的专一靶点协助治疗等提供了一种有力的工具 ,国内外在这方面的研究已取得了一定的进步     

妊娠期胆汁淤积症对新生儿中枢神经的影响

妊娠期肝内胆汁淤积症时在各种机制作用下母儿胆汁酸淤积 ,通过胆汁酸、胆红素的细胞毒作用 ,影响胎盘血流灌注、血液携氧能力、机体抗氧化防御系统引起胎儿窘迫、窒息致中枢神经系统缺氧损伤。神经细胞中钙稳态是保证其结构完整和功能正常的重要因素 ,烯醇化酶是缺氧缺血性脑损伤早期的标志酶。通过检测新生儿脐动脉血中的游离钙 ,烯醇化酶浓度来预测脑损伤及其严重程度 ,对早期干预具有十分重要的意义     

孕妇TORCH感染4种病原体的检测

TORCH是对优生危害最大的病原微生物 ,尤其是孕妇的原发性和活动性感染会导致胎儿的先天性感染 ,并引起严重后果 ,因此TORCH的检测尤为重要 ,该文论述了目前TORCH检测的主要方法以及各种方法的特点。TORCH检测的方法主要有病原学、核酸、血清学检查 ,其中PCR、ELISA是目前最常用的两种方法 ,近年发展了一些改良方式。蛋白质芯片检测技术作为一门新型技术因其特有的优势 ,在TORCH感染病原体的检测方面将发挥重要作用     

血管内皮生长因子mRNA在高氧诱导新生鼠视网膜异常新生血管化模型中的表达

目的：分析血管内皮生长因子（VEGF）在高氧诱导视网膜异常新生血管化大鼠模型中的表达变化，探讨VEGF在高氧诱导视网膜新生血管化进程中所起的作用。方法：150只SD新生大鼠随机分为氧诱导模型组和正常对照组，各75只。氧诱导模型组大鼠吸入浓度（80±2）% 7 d，随后在正常空气环境。视网膜铺片ADP酶染色了解视网膜血管形态改变；常规苏木精-伊红染色定量反映视网膜血管增生情况，判断建模成功。半定量逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR)定量反映视网膜VEGF mRNA转录水平的变化。结果：氧诱导模型组7日龄时视网膜血管明显收缩、阻塞，出现大片无灌注区；14日龄见新生血管形成；苏木精-伊红染色见模型组14日龄大鼠视网膜出现较多新生血管内皮细胞核；RT-PCR结果显示，氧诱导模型组7 d时VEGF mRNA转录水平明显低于对照组，停氧后逐渐增强。VEGF mRNA的表达在新生血管发生前升高，随新生血管退行逐渐下降。结论：未成熟视网膜VEGF mRNA的转录水平与组织氧状态呈密切负性相关关系；停氧后视网膜的相对缺氧导致VEGF mRNA转录上调，促使视网膜血管病理性增生。VEGF的异常表达在ROP的新生血管化进程中起重要作用。［中国当代儿科杂志，2007，9（4）：371-374］     

妊娠肝内胆汁淤积症对围生儿不良影响的可能机制研究

目的：探讨妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）对围生儿的不良影响及其可能机制。方法：临床收集ICP和正常妊娠孕妇各30例。采集孕妇外用静脉血,分离血清;比较新生儿体重、身长,胎盘重量,羊水粪染和Apgar评分情况。随机选取正常妊娠脐带,行脐静脉内皮细胞分离培养,用两种血清刺激培养的内皮细胞,MTT法检测内皮细胞活力,ELISA法检测内皮细胞分泌血管内皮生长因子的变化。结果：ICP患者娩出的新生儿体重、胎盘重量和Apgar1rain评分明显低于正常孕妇组,羊水粪染率明显高于正常孕妇组,有统计学差异。MTT法发现随着血清浓度的增加,内皮细胞的OD值逐渐降低,两两比较有统计学差异;ICP组各浓度点OD值均低于相应正常孕妇组,P〈0．05。ELISA法发现：同正常孕妇组血清相比,ICP组血清HUVECs表达分泌型VEGF蛋白减少;随着血清浓度的升高,VEGF蛋白表达逐渐降低,有统计学差异。结论：ICP对围生儿产生不良影响。ICP围生儿预后不良可能与血管内皮细胞VEGF的分泌减少有关。     

综合性大学医学影像学专业教学计划的改革与探索

利用综合性大学的办学优势,坚持遵循医学教育教学的基本规律,坚持知识、能力、素质协调发展和提高的原则,以教学内容和课程体系为改革核心,进行医学影像学专业(本科)教学计划的改革与探索。新的教学计划,建立了体现通识教育基础上的宽口径人才培养模式;拓宽了学科基础课程,增加了基础学科选修课程;凝炼了专业主干课程,加强了医学影像学课程群建设;减少了必修课学分和课内学时,增加了选修课程;加强了实践教学环节,突出了临床实践能力的培养。