条件化转染MT基因小鼠模型的建立

目的建立四环素诱导调控的MT转基因小鼠模型。为血管瘤试验研究及MT致瘤机理研究奠定基础。方法通过PCR方法从鸡的基因组序列中克隆绝缘子元件；构建四环素诱导调控的条件化转基因质粒，并将其调控元件和受控元件串联成一个载体，在两元件之间插入绝缘子，以减轻两者之间的相互干扰。为提高转基因的表达效率，在转基因盒的上游亦插入绝缘子元件；将MT基因亚克隆至此载体；转基因载体功能行细胞瞬转试验及半定量逆转录-PCR验证后，将其在体外扩增、酶切、回收，行小鼠受精卵原核注射，获得转染MT基因阳性小鼠；强力霉素体外诱导部分阳性鼠MT基因表达，使其具有血管瘤表型。结果绝缘子元件成功克隆；成功构建条件化转基因载体；体外试验证实目的基因的表达受强力霉素的严格调控；通过原核注射，获得5只转基因阳性鼠；2只行体外诱导2月后。1只出现血管瘤表型，逆转录．PCR检测证实MT表达。其余3只阳性小鼠在传代建系中。结论条件化MT转基因小鼠模型成功构建，此小鼠模型能够为血管瘤的试验研究及MT致瘤机理的体内研究提供一定的基础。     

单侧唇腭裂伴发鼻畸形个体化治疗重建鼻软骨支架结构31例

目的:唇裂术后鼻畸形的整复相对更为复杂,由于鼻畸形与唇畸形多同时存在,而且相互影响,因此制定行之有效、个体化的手术治疗方案已成为当前研究的重点,引入构建组织工程化骨修复单侧唇腭裂继发鼻畸形,并探讨手术设计方式的可行性和合理性.方法:①对象:选择2001-03/2005-09本院收治的单侧完全性唇腭裂并均已行唇腭裂修补术患者31例,年龄15～41岁,平均24岁.患者对所进行的治疗均知情同意.②方法:采用改良Millard联合经鼻小柱开放术式、个体化矫正畸形鼻软骨支架结构.③评估:患者手术效果、材料不良反应.结果:31例患者全部进入结果分析.①31例患者切口全部一期愈合.②术后鼻基底抬高,鼻尖耸立,鼻孔及鼻翼外形两侧基本对称,偏斜的鼻小柱、鼻底畸形亦得以纠正.③随访2至3年,未见畸形复发,无宿主与材料不良反应.结论:采用联合式、个体化的手术方式,能有效地矫正单侧唇腭裂继发的鼻畸形,并能够有效的重建鼻软骨支架结构.     

bFGF复合NNB无机骨修复兔下颌骨缺损的实验研究

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与天然型无机骨(NNB)复合人工骨修复兔下颌骨缺损的效果,以期为临床提供一种较为理想的骨替代材料.方法在30只成年新西兰兔双侧下颌骨下缘形成15mm×6mm全层骨膜骨质缺损,每一缺损作为一个实验单位,术后3周、6周、12周取材行大体标本、X片观察,并对HE染色切片行计算机定量分析.结果复合骨与NNB相比,同期成骨量大;6周时复合骨成骨面积尚不如自体骨,而12周时已接近自体骨水平,空白缺损则始终未能修复.结论复合骨生物相容性好,效果明显优于NNB,远期与自体骨相似,是一种较为理想的骨替代材料.     

基于间充质干细胞膜的药物投递系统研究进展

传统药物载体在体内投递过程中,常出现全身用药靶向性弱、载体的稳定性差和生物相容性低等问题.细胞膜作为细胞信息传递与行为调控的重要组成部分,可作为药物的包覆材料.间充质干细胞膜载体作为新兴的载体,具有主动靶向性、免疫调节性、膜表面修饰性等特点,在肿瘤治疗和组织再生等领域具备广泛的应用潜力.本文总结了间充质干细胞膜载体的特性以及应用现状,为未来的膜载体设计和临床应用提供指导.     

釉基质蛋白对猪骨髓基质细胞黏附、伸展及增殖的影响

目的：研究釉基质蛋白（enamel matrix proteins,EMPs）对体外培养的猪骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）黏附、伸展和增殖活性的影响。方法：抽取猪髂骨骨髓．全血培养法获得骨髓基质细胞。培养液中EMPs的浓度分别为25、50、100、200μg／ml,以不加EMPs为对照。用比色法检测不同浓度EMPs对BMSCs黏附的影响。通过计数预定视野中伸展的细胞数,计算BMSCs在培养1h、3．5h、6、5h后的伸展率。MTT法测定各组细胞的增殖活性。对实验数据行单因素方差分析和SNK法组间比较。结果：猪BMSCs在含有EMPs的培养液中生长良好。对照组以及不同浓度EMPs实验组对细胞黏附的影响无统计学差异。在1h、3．5h、6．5h．各组细胞的伸展率无显著不同。EMPs对BMSCs的促增殖作用呈浓度和时间依赖性．200μg／ml浓度的EMPs从实验的第3天开始．显著促进猪BMSCs的增殖。结论：EMPs对体外培养的猪BMSCs的黏附和伸展无显著影响．200μg／ml浓度的EMPs可显著促进猪BMSCs增殖,为联合应用EMPs和BMSCs修复牙周组织缺损提供了理论依据。