人表皮生长因子真核细胞缓释型滴眼剂的基因治疗研究

目的:构建人表皮生长因子的真核表达载体,探讨用人表皮生长因子对角膜损伤治疗的可行性。方法:采用基因重组技术将人表皮生长因子基因插入pcDNA.3.1真核表达穿梭质粒,用脂质体包裹制成人表皮生长因子基因缓释型滴眼剂,滴眼治疗家兔角膜碱烧伤。结果:将hEGF-pcDNA3.1重组体进行限制性酶切及PCR扩增可见目的片段;基因治疗组在模型治疗后第7 d,角膜荧光着色变浅,溃疡面变小;第18～21 d溃疡面消失;在基因治疗后第1至28 d,从角膜组织中均可检测出hEGF mRNA,基因治疗组蛋白质表达水平明显升高,第7d达高峰,为224.286 ng/g角膜湿重,持续可表达3周以上;基因治疗眼角膜免疫组织化学染色可在角膜细胞内见hEGF蛋白质表达,第7 d达高峰,细胞转染率高达95%以上,并可持续表达3周以上。结论:用pcDNA.3.1真核表达穿梭质粒作为载体,携带人表皮生长因子基因,用脂质体包裹后制成缓释型滴眼液,以滴眼的方式给药转染角膜,可达到极高的转染率,具有良好的应用前景。     

99mTc-MIBI显像甲状旁腺素在原发性甲状旁腺功能亢进中的应用

目的 了解99mTc-MIBI显像在原发性甲状旁腺功能亢进症患者的诊断价值及与甲状旁腺紊(PTH)放射免疫分析的关系.方法 31例怀疑原发性甲状旁腺功能亢进症患者根据其后手术病理结果分为腺瘤组7例、增生组3例、正常组(经检查排除甲旁亢)21例,静脉注射370 MBq(10mCi),99mTc-MIB行双时相采集,观察甲状旁腺病灶,显像前均进行了血清PTH放射免疫分析检测.结果 腺瘤组7例中6例99mTc-MIBI显像阳性,增生组3例中2例辨99mTc-MIBI显像阳性,正常组无1例发现甲状旁腺病灶,根据病理结果显像发现腺瘤敏感性为85.7%,显像发现增生敏感性为66.7%,特异性为100?mTc-MIBI显像阳性患者的PTH:(251.91±113.56)ng/dl,99mTc-MIBI显像阴性患者的PTH:(35.37±29.78)ng/dl,两组P＜0.05,有显著性差别;血清PTH水平≥100mg/dl(≥正常上限5倍)患者,MIBI敏感性88.9%,血清PTH水平≥200 ng/dl,MIBI显像敏感性100%.结论 99mTc-MIBI显像对原发性甲状旁腺功能亢进症的诊断敏感性高,尤其是腺瘤,其检测敏感性与高血清PTH水平相一致,类似于剂量依赖方式.     

克氏针内固定治疗末节指骨撕脱性骨折

2015 年3 月 ～2018 年10 月,我科采用改良切开复位克氏针内固定治疗25 例新鲜闭合末节指骨撕脱性骨折患者,疗效满意,报道如下. 1 材料与方法 1.1 病例资料 本组25 例,男17 例,女8例,年龄21 ～58 岁.损伤指别:环指10例,小指10 例,中指3 例,示指2例.均为新鲜闭合骨性锤状指,表现为...     

半乳糖凝集素-3在心肌纤维化相关心血管疾病中的研究进展

心肌纤维化是多种心血管疾病发展到一定阶段的共同病理改变。心肌细胞的细胞再生能力有限,其损伤后的主要修复机制即心肌纤维化。心肌纤维化过程中形成瘢痕组织,在维持心脏结构完整性的同时会导致心脏舒张、收缩功能受损,并在损伤修复中持续加重。半乳糖凝集素-3作为心肌纤维化重要调节分子,是延缓或阻断心肌纤维化的新靶标。现总结最近半乳糖凝集素-3在心肌纤维化相关心血管疾病中的研究进展,以期探寻心肌纤维化过程中的治疗靶点。     

胃印戒细胞癌合并急性早幼粒细胞白血病1例

<正>1病例介绍患者,女,52岁,因上腹痛1个月、黑便半天入院。患者1个月前出现上腹痛,阵性,饥饿时加剧,进食无缓解,无反酸,无发热,无关节疼痛,于2018-07-05至我院查肿瘤标志物:癌胚抗原12.95ng/ml,糖类抗原CA199 547.2U/ml,甲胎蛋白及肝功能正常,预约胃镜。予雷贝拉唑、替普瑞酮治疗腹痛无改善。07-12患者解黑便1次,量约500g,伴头     

红细胞分布宽度与冠心病的相关性研究

目的探讨红细胞分布宽度(RDW)与冠心病的相关性。方法连续收集因胸痛疑诊冠心病或已明确冠心病为进一步介入治疗的患者677例,根据冠状动脉造影结果确诊为冠心病499例为冠心病组,除外冠心病178例为对照组。记录2组的临床资料,分析冠心病的危险因素,探讨RDW与冠心病的相关性,采用改良Gensini法评价冠状动脉病变的严重程度,并分析其与RDW的关系。结果与对照组比较,冠心病组RDW明显升高[(13.0±0.8)%vs(12.7±0.8)%,P=0.001],且RDW与冠状动脉病变严重程度呈正相关(r=0.37,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,RDW是冠心病和冠状动脉病变严重程度的独立预测因素(OR=1.34,95%CI:1.02～1.77,P<0.05;OR=2.23,95%CI:1.62～3.08,P<0.01)。RDW界值为12.9%,RDW的ROC曲线下面积=0.61,95%CI:0.56～0.66,诊断的敏感性为50.0%,特异性为65.2%。结论 RDW与冠心病及冠状动脉病变严重程度独立相关,是冠心病及冠状动脉病变严重程度的独立预测因素。     

非布鲁杆菌病流行区7例布鲁杆菌病患者临床分析

目的 研究非布鲁杆菌病流行区布鲁杆菌病患者的流行病学、临床特征,提高非流行区医务工作者对布鲁杆菌病的认识.方法 回顾性分析南京医科大学第一附属医院2011年收治的7例布鲁杆菌病患者的流行病学资料、临床表现、辅助检查、治疗情况.结果 7例患者均有与来自布鲁杆菌病流行地区羊的密切接触史;临床上以非波状热型的中高热、乏力、纳差、体质量下降、关节痛等症状为主,同时呼吸系统症状亦较为突出,多汗、肝脾肿大等多不明显,同时有较为少见的帕金森样震颤等神经系统损害表现;T淋巴细胞及B淋巴细胞比例异常,血培养耗时较长;药敏试验结果显示,布鲁杆菌对甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑、左氧氟沙星、四环素、阿米卡星敏感,而对头孢类抗生素则多有耐药;经左氧氟沙星联合甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲恶唑治疗后均痊愈.结论 布鲁杆菌病有从传统流行区向外扩散的趋势;发热待查患者如有羊密切接触史,应考虑布鲁杆菌病的可能,且临床上需注意呼吸系统损伤、帕金森样震颤等非常见的表现;治疗上可选用左氧氟沙星联合甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑.     

肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究

目的构建以大鼠CTGF和TIMP-1基因为靶点的双重RNA干扰表达载体质粒,以检测其转染肝星状细胞的效率.方法筛选出对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计1对含有短发夹结构的RNA 干扰靶点序列,分别克隆到质粒载体psiRNA-DUO-GFPzeo,构建含目的靶基因片段的重组质粒载体psiRNA-GFP-CT-GF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com（含有CTGF和TIMP-1）,进行酶切和测序鉴定.将构建成功的重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染大鼠肝星状细胞,在荧光显微镜下观察质粒转染情况,用流式细胞仪检测转染效率.结果酶切与测序结果提示重组质粒 psiRNA-GFP-CTGF、psiR-NA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com成功构建;成功将重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染肝星状细胞,在24小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF ＋TIMP-1组转染效率分别为15±2%、13±1%、15±1%和14±2%,均低于质粒psiRNA-GFP-Com转染组（Com组,20±2%,P〈0.05）;在48小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF＋TIMP-1组转染效率分别为10±2%、9±1%、8±2%和10±1%,均低于Com组的15±2%（P〈0.05）.结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNA干扰靶位的双重RNA干扰表达质粒,能转染至肝星状细胞,并且psiRNA-GFP-Com转染效率最高.     

胰腺癌干细胞差异microRNAs的表达及生物信息学

目的:筛选与胰腺癌干细胞相关的差异表达miRNAs,并进行生物信息学分析.方法:以MIA-PaCa2(TIChigh)与BxPc-3(TIClow)为研究胰腺癌干细胞的工具细胞制备总RNA,经质量鉴定后进行荧光标记;采用Agilent人类miRNA芯片进行杂交实验,获得miRNA表达谱;以Gene Spring Software 11.0软件和Quantile算法分析芯片实验数据,筛选与胰腺癌干细胞相关的差异miRNAs;荧光定量PCR验证部分差异表达miRNAs;基于Sanger数据库预测差异miRNA靶基因,基于Gene Ontology数据库进行GO注释,基于KEGG数据库进行Pathway注释.结果:获得符合基因芯片实验质量标准的RNA样品,基因芯片杂交及数据分析共鉴定到940个miRNAs,得到91个差异表达miRNAs(P<0.05,fold change≥2),其中MIAPaCa2(TIChigh)中下调表达45个,上调表达46个.荧光定量PCR验证21条差异miRNAs,其中19条均与芯片结果相符.TargetScan6.0数据库靶基因预测共得到2895条靶基因,GO注释显示他们主要涉及轴突导向、血管生成、转录后蛋白修饰等功能.Pathway注释显示主要涉及癌症途径、细胞-基质黏附途径、Hedgehog信号途径、MAPK信号途径等信号通路.结论:筛选出的胰腺癌干细胞相关差异表达miRNAs调控多种具有不同细胞功能和参与不同信号通路的基因,有可能成为胰腺癌新的治疗靶点.     

电针改善血管性痴呆大鼠学习记忆及其与海马神经细胞蛋白激酶C表达的关系

目的观察电针对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能和海马神经细胞蛋白激酶C(PKC)表达的影响,探讨电针的治疗作用机制。方法 SD大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、电针组。在建立VD大鼠模型后,电针"百会"、"大椎"穴,水迷宫观察大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色技术观察脑组织海马神经细胞PKC染色结果。结果与模型组比较,经电针治疗后水迷宫潜伏期明显缩短(P<0.01),相同时间内在原平台象限跨越相应平台次数明显增多(P<0.01);PKC免疫阳性细胞积分光密度显著增加(P<0.01)。结论电针大鼠"百会"、"大椎"穴能改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与提高海马PKC表达有关。