体外大鼠骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究

目的研究体外大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞等不同组织细胞多向分化的潜能。方法从SD大鼠股骨骨髓中获得间充质干细胞,原代培养后1∶2传代,传至第5代后分为普通传代培养组、神经细胞诱导组、成骨细胞诱导组和脂肪细胞诱导组。倒置相差显微镜下观察各组细胞生长情况、形态变化以及矿化结节和脂肪细胞的形成;流式细胞检测第5代大鼠骨髓间充质干细胞表面抗原CD29、CD44、CD90、CD31、CD34、CD45;免疫组织化学检测普通传代培养组和神经细胞诱导组细胞巢蛋白、微管相关蛋白-2、胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶等神经细胞相关蛋白的表达情况。结果大鼠骨髓间充质干细胞呈贴壁生长,细胞扩增至第5代时形态趋于一致,呈梭形。大鼠骨髓间充质干细胞表面抗原CD29(99.83%)、CD44(99.77%)、CD90(99.86%)均呈阳性表达,CD31(0.83%)、CD34(1.78%)、CD45(2.90%)无表达。在体外,普通传代培养细胞仅巢蛋白呈阳性表达;由神经细胞诱导的细胞巢蛋白、微管相关蛋白-2、胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶均呈阳性表达,且形态类似神经细胞;由成骨细胞诱导的细胞质内可见矿化结节形成;由脂肪细胞诱导的细胞质内出现多个猩红色呈簇状的脂肪滴。结论大鼠骨髓间充质干细胞易于提取、纯化和扩增,可于体外自发表达神经干细胞标志蛋白,并可通过诱导向神经细胞、成骨细胞及脂肪细胞分化。提示骨髓间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,而且可能具有自发向神经干细胞分化的特性。     

总结成就 展望未来 不断进取 再创辉煌——访山东大学第二医院院长赵升田

<正>齐鲁大地深厚的文化底蕴赋予山东大学第二医院丰厚的人文内涵,百年名校山东大学雄厚的人才和科技实力是医院坚实的支持力量。在这片丰饶开阔的土地上,山东大学第二医院     

成熟中性粒细胞碱性磷酸酶染色的正常参考范围

血细胞碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞中,除巨噬细胞可呈阳性反应外,其他血细胞均呈阴性反应。临床上常通过碱性磷酸酶(NAP)染色帮助鉴别细菌或病毒感染;鉴别白血病类型和真性红细胞增多症     

心脏移植术后监护10例

0　引言　从 2 0 0 0年 1月至今 ,我科对 10例终末期心脏患者实施了心脏移植术 ,3例死亡 ,7例存活 ,收到了较好的效果 .1　临床资料　患者 10 (男 9,女 1)例 ,年龄 12～ 5 3岁 ,克山病1例 ,冠状动脉架桥术后 1例 ,扩张性心肌病 8例 ,心功 级 .2　观察指标和方法　术后监护包括体温、心率 /心律、呼吸、血压、中心静脉压、肺动脉压及肺嵌入压、心排指数、尿量、胸引量 ,维持心率在 90～ 110次· min- 1 ,血压 13～ 16 / 8～ 10k Pa,尿量为 1.5～ 2 .0 m L·kg- 1· h- 1 ,10例患者术后呼吸机辅助时间 5 h～ 8d,脱离呼吸机后鼓励患者咳嗽、…     

姜黄素对高糖诱导人肾小管上皮细胞线粒体自噬的影响

目的:观察姜黄素(Curcumin, Cur)对高糖环境下人肾小管上皮细胞(Human kidney 2,HK-2)线粒体自噬及氧化应激的影响,探究姜黄素对HK-2细胞的保护作用及机制。方法:体外培养HK-2细胞,随机分为4组：对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、姜黄素组(5.5 mmol/L葡萄糖+10μmol/L姜黄素)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、姜黄素高糖组(30 mmol/L葡萄糖+10μmol/L姜黄素)。各组干预刺激48 h,收集细胞的总蛋白,采用Western blot检测线粒体自噬相关蛋白Pink1、Parkin、LC3B以及beclin1的表达;JC-1检测各组线粒体膜电位水平;采用活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species, ROS)生成情况。结果:与对照组比较,姜黄素组各项指标无明显改变(P>0.05);与姜黄素组比较,高糖组Pink1、Parkin、LC3B、beclin1蛋白表达降低(P<0.01),细胞内ROS表达升高(P<0.01),线粒体膜电位活性下降(P<0.01);与高糖组比较...     

血浆miR-137表达水平对奥氮平治疗精神分裂症疗效的预测价值

目的探讨血浆miR-137表达水平对奥氮平治疗精神分裂症（SZ）疗效的预测价值。方法选取杭州市第七人民医院2021年6月至2022年12月收治的SZ患者78例,均予奥氮平单药治疗4周。采用阳性与阴性症状量表（PANSS）评估临床疗效,qRT-PCR法测定治疗前后血浆miR-137表达水平。采用Pearson相关分析治疗4周后血浆miR-137表达水平与PANSS评分的相关性,ROC曲线分析血浆miR-137表达水平对奥氮平治疗SZ疗效的预测效能。结果78例SZ患者奥氮平治疗后PANSS总分及阳性症状、阴性症状、一般精神病理症状评分均明显低于治疗前（均P＜0.05）。奥氮平治疗无效（PANSS减分率＜50%）30例,有效（PANSS减分率≥50%）48例。有效组患者治疗后血浆miR-137表达水平较治疗前明显降低（P＜0.05）,而无效组患者治疗前后血浆miR-137表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。奥氮平治疗4周后血浆miR-137表达水平下降差值与PANSS总分、阳性症状评分及一般精神病理症状评分的减分值均呈正相关（r=0.495、0.493、0.373,均P＜0.05）。血浆miR-137表达水平下降差值预测奥氮平治疗SZ疗效的AUC为0.875（95%CI：0.801~0.949）,灵敏度为0.750,特异度为0.933,截断值为0.332。结论血浆miR-137表达水平能在一定程度上预测奥氮平治疗SZ的临床疗效。     

IL-10RA基因多态性及其与系统性红斑狼疮关系的研究

目的:确定SLE模型小鼠IL-10RA基因变异及其与SLE表现型是否存在关联。方法:用微卫星遗传标记及数量性状位点(QTL)分析方法确定SLE模型小鼠B/W F1的SLE易感基因精确染色体定位并选取候选易感基因,对候选易感基因进行测序分析,选取有基因序列异常的候选易感基因进行PCR-SSCP分析,确定候选易感基因碱基序列变异位点与抗染色质抗体、抗DNA抗体,抗组蛋白抗体及蛋白尿等SLE表现型的相关关系。结果:QTL分析结果表明B/W F1×NZB小鼠抗染色质抗体易感基因与NZW型IL-10RA基因紧密连锁;测序分析发现IL-10RA基因编码区有18处碱基变异,其中7处碱基变异将导致编码氨基酸的变异;抗染色质抗体、抗DNA抗体,抗组蛋白抗体及蛋白尿等SLE表现型与NZW型IL-10RA基因密切相关。另一种SLE模型小鼠MRL的IL-10RA基因存在相同变异。结论:NZW小鼠IL-10RA基因编码区碱基序列存在变异,B/W F1×NZB小鼠SLE表现型与NZW小鼠第9染色体IL-10RA编码区碱基变异相关,提示IL-10RA可能是SLE模型小鼠的一个SLE易感基因。     

脑缺血再灌流对大鼠海马FOS蛋白的诱导及电针对其的影响

目的　探讨脑缺血再灌流后电针对大鼠海马FOS蛋白表达的影响。方法　采用夹闭大鼠双侧颈总动脉造成的脑缺血再灌流损伤模型 ,电针“百会”、“风池”、“大钟”及“足三里”穴 ,频率 2～ 2 0Hz,强度以肌肉轻微抖动为准 ,持续 30min ,4h后观察海马FOS蛋白的表达。结果　电针能明显加强脑缺血再灌流后海马各区FOS蛋白的表达。结论　缺血再灌流可诱导海马FOS蛋白的显著表达 ;电针信息对缺血后海马神经元的功能可能会有影响。     

慢病毒介导的外源基因体外投递系统的建立

目的针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系，以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒（携带EGFP基因）包装（脂质体介导的瞬时转染）、超速离心浓缩和保存等，随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT细胞，24—48h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产；将携带EGFP基因的病毒上清或浓缩后的病毒分别加入内含293FF细胞、小鼠ES细胞、小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）或小鼠睾丸生殖细胞的培养板孔内，感染6—12h后，用相应培养基替换感染液，数天后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功感染不同哺乳类细胞。结果按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒（病毒上清或浓缩后的病毒）成功高效率感染293FF细胞、MEFs或小鼠睾丸生殖细胞；用浓缩后的病毒（携带EGFP基因）感染小鼠ES细胞，亦可获得EGFP阳性的ES细胞克隆。结论熟练掌握了慢病毒包装、浓缩及鉴定等技术，同时针对不同哺乳类细胞建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外传递系统，这些为相关后续研究打下了良好的基础。     

患者知情同意权代为行使的案例分析及启示

以医疗典型纠纷案例为例,通过厘清相关法律对患者知情同意权行使及代为行使的相关规定,探讨知情同意权代为行使行为的界定。启示如下:知情同意权代为行使应设前置条件进行限制和约束;代为行使主体包括近亲属或关系人、委托代理人;患者本人意见具有首要优先性,委托代理人意见应优先于近亲属意见。