长、短链探针以链延伸反应提高基因传感器检测MRSA灵敏度的实验研究

目的：利用链延伸反应的原理延长引物链以提高石英谐振式基因传感器表面的质量负载，从而提高传感器检测MRSA的灵敏度。方法：以不对称PCR的反应产物做为长链探针，人工合成的寡核苷酸片段为短链探针，在基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA和femA的长链及短链探针共4种探针片段，与相应的靶序列杂交后，加入Klenow酶，37℃进行链延伸反应1h。结果：长、短链探针均有效地固定了传感器表面。mecA,femA短链探针在链延伸反应前的检测灵敏度为0.5nmol/L，但经链延伸反应后检测灵敏提高到了0.05nmol/L；而长链探针却无法与相应的基因组靶序列发生杂交。结论：短链探针链延伸反应有效地提高了石英谐振式基因传感器的灵敏度，但该法不适用于链探针。     

肠道门诊监测工作体会

肠道传染病是由各种病原体引起，以消化道症状为主的急性传染病，多数病种的临床表现以腹泻为主，粪—口传播，对人群健康危害主要表现在传播快、波及范围广、发病率高、严重者可致死亡。我院是一所二级甲等综合性医院，是区疾控指定监测点，开展肠道监测工作15余年。现将体会报告如下：     

Novel multi-probe RNase protection assay set for detection of endotoxin associated receptors gene expression

Objective: To construct the multi-probe ribonuclease protection assay (RPA) template set to be used for detecting expression patterns of MD-2, TLR4, CD14 mRNAs in human peripheral blood mononuclear cells. Methods : The designed cDNA fragments of the three genes were generated by polymerase chain reaction (PCR)using specific primers and directionally cloned into EcoR I and Hind III sites of expression plasmid pSP72 containing the T7/ promoter, the linearized plasmids was used as template to synthesize anti-sense RNA probes. Then we extracted total RNA from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and detected the dynamic expression patterns of the three genes with RPA method. Results: The proper sequence and orientation of the template set were confirmed by sequencing and the template set was successfully used to assay TLR4, MD-2 and CD14 mRNAs in human PBMC. The results showed that the three detected genes decreased transiently 1-3 hours after 100 ng/ml LPS stimulation. Conclusions: These new RPA multi-probe set provided valuable tool for the simultaneous quantitative determination of expression of TLR4, CD14 and MD-2 mRNAs in both constitutive and inducible types.     

反相高效液相色谱法定量分析二甲胺四环素

利用反相高效液相色谱法测定二甲胺四环素含量，该法使用２００×５ｍｍ内径的色谱柱，内装ＹＷＧ－Ｃ１８Ｈ３７。，柱温２５±０．５℃，流动相为０．００２ｍｏｌ／Ｌ　ＥＤＴＡ－Ｎａ２溶液（用草酸调节ｐＨ３．０±０．１）：甲醇：乙腈（３：１：１Ｖ／Ｖ／Ｖ），流速为１ｍｌ／ｍｉｎ，紫外检测波长为２８０ｕｍ，测定了１５批国内外厂家生产的二甲胺四环素联囊的含量，结果与用美国药典（２２版）法所测结果一致。     

脑室引流加尿激酶灌注治疗内囊出血破入脑室50例临床观察

内囊出血破入脑室是脑出血最凶险的类型,病死率高达55%~70%[1]。内科保守治疗效果不理想,开颅血肿清除损伤较大,死亡率高。我科采用脑室引流及尿激酶灌注术治疗50例内囊出血破入脑室的患者,疗效满意,报道如下。1临床资料1.1一般资料本组男29例,女21例;平均年龄64(38~74)岁。均有高血压病史,平均12(4~20)年。入院时间平均12(1~36)h。均有明显意识障碍:嗜睡13例,浅昏迷17例,中度昏迷11例,深度昏迷9例。临床表现均有头痛、呕吐、脑膜刺激征及肢体偏瘫。合并血糖升高(>8.4mmol/L)28例,ECG明显异常5例,合并消化道出血16例,肾功能明显受损9例。…     

病原性酵母的血清学

本文概述了念珠菌病与隐球菌病的致病菌种的血清学分类鉴定法及血清学诊断法。     

胃肠外营养支持时发生低硒血症一例报告

人体硒缺乏国内已有报告,特别在克山病研究方面更为突出,但在完全胃肠外营养(total paren-teral nurtrition,TPN)支持时发生的硒缺乏症未见报道。本文报告一例外科病人在TPN支持二周后出现硒缺乏症的临床表现、血清硒检查结果及补硒治疗后的反应。     

锐意进取 勇于创新 以改革的优异成绩迎接党的十三大胜利召开——甘肃中医学院庆祝第三个教师节表彰优秀教师暨八七级新生开学典礼大会记实

在深化教育改革,认真贯彻落实中共中央《关于改进和加强高等院校思想政治工作的决定》精神鼓舞下,甘肃中医学院庆祝第三个教师节、表彰优秀教师暨八七级新生开学典礼大会于九日下午在飞天影剧院隆重召开。全院一千四百名师生员工怀着喜悦的心情参加了大会。中共甘肃省顾问委员会主任黄罗斌、省卫生厅副厅长石国璧等领导同志到会祝贺。在雄壮的《国歌》声中, 大会主持人、学院副院长贾斌同志宣布大会开始。党委书记尹万杰同志代表学院党委宣布奖励获得优秀教学质量奖的教师及优秀年级主任的决定和名单。优秀教师代表黄正良教授和新同学代表作了热情的发言。     

组合靶基因自动检测仪应用软件的设计

目的：研制与开发组合靶基因自动检测仪应用软件。方法：应用VB6．0编程语言及Access 97数据库实现压电石英谐振频率的实时检测与分析。结果：实现了组合靶基因自动检测仪压电石英谐振频率的实时检测。数据分析，结果保存与数据转换等。结论：组合靶基因自动检测仪应用软件是一类可实时检测与分析压电石英谐振频率的新型实用性软件，可广泛应用于压电石英谐振频率的检测。     

体外循环下单肺移植术后心脏压塞1例

肺移植术后主要以感染 ,排斥反应和气道方面的并发症为主。术后心脏压塞则较少见 ,本文报告1例。1　病例报告患者　男 ,2 8岁。患双肺弥漫性纤维化 ,肺功能严重受损。 1997年 9月 30日在全麻体外循环下接受同种异体左肺移植手术 ,术中因胸内粘连甚重渗血较多 ,移植后供肺膨胀良好 ,原有的肺动脉高压即降至正常 ,氧合功能明显改善。经严重止血后回ＩＣＵ ,通过Ｓｗａｎ -Ｇａｎｚ导管及桡动脉测压管连接压力监测仪和心电监护仪 (ＳｐａｃｅＬａｂ 90 30 3Ｂ)连续监测血压 ,心率 ,中心静脉压 (ＣＶＰ) ,每小时尿量和胸管引流量 ,定时床旁胸片…