肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化及其临床特征分析

目的：探讨上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化与肝细胞癌（HCC）及其临床病理特征的关系。方法：用甲基化特异性PCR技术检测53例HCC肿瘤组织及其癌旁非肿瘤组织和15例肝海绵状血管瘤周围正常肝组织中，上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化状况。结果：上皮型钙粘素基因在HCC肿瘤组织中的甲基化率显著高于癌旁非肿瘤组织（P=10．007，P〈0．01），显著高于正常肝组织（P=0．006，P〈0．01）。在Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中的甲基化率显著高于Ⅰ～Ⅱ期肿瘤（P=0．037，P〈0．05），在包膜完整的肿瘤中甲基化率显著高于包膜不完整的肿瘤（P=0．043，P〈0．05），在HBV阳性的肿瘤组织中甲基化率显著高于HBV阴性的肿瘤组织（P=-0．024，P〈0．05），在不同大小的肿瘤之间、单个结节与多个结节的肿瘤之间甲基化率的差异均无显著性。结论：上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化可能参与肝细胞的癌性转变。     

转化生长因子βⅠ型受体基因的靶向小干扰RNA抑制肝星状细胞合成胶原的体外研究

目的 观察大鼠转化生长因子βⅠ型受体(TβR Ⅰ)基因的靶向小干扰RNA(siRNA)表达质粒对肝星状细胞(HSC)合成胶原的影响.方法 根据大鼠Tβ R Ⅰ的基因序列,设计并构建3个大鼠TβR Ⅰ基因的靶向siRNA表达质粒,以脂质体作转染试剂,将siRNA表达质粒分别转染至HSC-T6细胞中,RT-PCR和Western印迹技术分析TβRⅠ mRNA及蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,放射免疫法测HA、PCⅢ含量.采用LSD法进行统计学处理.结果 酶切证实siRNA的目的 基因片段已成功克隆入载体中.与空白对照组比较,转染siRNA表达质粒后,3组HSC-T6细胞TβR Ⅰ mRNA表达水平均抑制,其中以psiRNA2组抑制作用最强(psiRNA1组:t=7.354,P＜0.01;psiRNA2组:t=9.214,P＜0.01;psiRNA3组:t=5.967,P＜0.01).3组TβRⅠ蛋白表达水平均降低,以psiRNA2组降低最明显(psiRNA1组:t=6.324,P＜0.01;psiRNA2组:t=8.741,P＜0.01;psiRNA3组:t=4.128,P＜0.01).3组HSC-T6细胞增殖活性均下降,合成胶原均减少,以psiRNA2组最明显;而转染无关siRNA组无明显变化.结论 构建的TβR Ⅰ siRNA表达质粒可抑制HSC-T6细胞合成胶原,为肝纤维化基因治疗提供新的靶点.     

伤寒并发中毒性肝炎的肝功能分析

目的：了解伤寒杆菌感染对肝脏的损害及肝功能的影响。方法：对350例伤寒患者肝功能及乙型肝炎病毒标记物的检测结果进行分析。结果：230例（65．7％）出现ALT和AST升高,其中83例（36．1％）伴有血清总胆红素（STB）升高;320例进行HBV标记物检测,发现HBV感染45例,伤寒重叠HBV感染率为14．1％,单纯伤寒组与重叠HBV感染组的肝损害情况比较,重叠感染组的ALT、AST及STB均值比单纯感染组显著升高（P＜0．05）,而两组间肝损害发生率和血清白蛋白（ALB）均值无显著性差异（P＞0．05）。结论：伤寒患者中肝损害较常见,病情重者肝功能损害程度也严重,其中重叠HBV感染者肝损害程度更重,但重叠HBV感染中肝损害的发生率并无明显升高。     

肝细胞肝癌谷胱甘肽硫转移酶P1基因型和表型及其活性研究

目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶（GST）P1活性及基因多态、启动子甲基化与肝细胞肝癌（HCC）的关系.方法 紫外分光光度法检测HCC肿瘤细胞和癌旁肝细胞胞质中GSTP1活性,用甲基化特异性PCR技术检测GSTP1甲基化,PCR-RFLP技术检测53例HCC患者和74例健康人外周血基因组GSTP1基因多态性.结果 GSTP1三种基因型频率在病例组与对照组间差异无统计学意义（χ^2=0.84,v=2,P=0.656）.GSTP1甲基化率在肿瘤组织与癌旁组织间差异有统计学意义（χ^2=19.08,P＜0.01）,在Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中的频率显著高于Ⅰ～Ⅱ期肿瘤（χ^2=4.84,P=0.028）.HCC肿瘤细胞胞质中GSTP1活性显著低于癌旁肝细胞（t=2.49,P=0.014）,Ⅰ～Ⅱ期肿瘤胞质中GSTP1活性显著高于Ⅲ～Ⅳ期肿瘤（t=2.31,P=0.025）,GSTP1甲基化的肿瘤细胞胞质中GSTP1活性显著低于未甲基化的肿瘤细胞（t=3.50,P=0.001）.结论 由GSTP1基因甲基化引起的GSTP1活性下降可能与肝细胞的癌性转变有关.     

快速输血的4种方法

临床上在抢救因失血过多而需立即补充血容量的病人时，常用的输血方法已显得力不从心，现将我院近年来摸索的4种快速输血方法介绍如下。     

川芎嗪对内毒素刺激肝星状细胞增殖和胶原表达的影响

目的 观察川芎嗪对内毒素刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和胶原表达的影响,探讨川芎嗪抗肝纤维化的作用机制.方法 于内毒素中刺激大鼠HSC的基础上加川芎嗪分组培养;并采用MTT法检测川芎嗪对HSC生长增殖的抑制作用,免疫细胞化学染色法观察HSC α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,同时采用ELISA法检测其上清液Ⅰ、Ⅲ型胶原水平.结果 川芎嗪对内毒素刺激的HSC增殖有抑制作用,能下调活化HSC α-SMA的表达,对HSC Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌也有明显抑制作用,并呈剂量依赖性.结论 川芎嗪能抑制内毒素刺激的HSC活化增殖和分泌胶原,为探索川芎嗪抗肝纤维化的分子机制提供了实验依据.     

CBS在传染病学临床教学中的应用

目的:探讨CBS在传染病学临床教学中的应用效果。方法:选择案例,设置问题,并提出讨论内容,让学生围绕案例回答一系列问题。结果:实施CBS教学法班级的学生成绩与未实施CBS教学法班级成绩比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在传染病学临床教学中应用CBS,可提高学生理论联系实际能力、临床技能水平及综合分析能力。     

97例败血症致病菌及耐药性分析

败血症是由各种病原微生物侵入血流所引起的临床综合征，是一种全身性感染。常发生于有严重基础疾病的患者，可危及生命。及时准确地选用敏感的抗菌药物治疗，对败血症预后有决定性作用。但随着大量广谱抗生素的广泛应用，败血症致病菌的分布和耐药性已发生了很大的变化，使得临床经验性用药变得很困难。为监测败血症菌种及其耐药性变化，指导临床合理用药，我们对我院1999年3月～2004年6月经血培养证实的败血症患者的临床资料进行了回顾性分析，报道如下。     

脂联素抑制大鼠肝星状细胞株HSC-T6的Ⅲ型前胶原和透明质酸的表达

目的 观察脂联素对肝星状细胞（HSCs）分泌结缔组织生长因子（CTGF）的影响,并观察Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）含量的变化.方法 把大鼠HSCs分成5组,其中4组分别加入不同浓度的脂联素,另外1组作对照.通过RT-PCR和Western Blot技术分析CTGF mRNA和蛋白表达水平,ELISA法检测上清液PCⅢ、HA含量.结果 与对照组比较,A、B、C、D组脂联素HSCs内CTGF mRNA表达均下降,吸光度比值分别为1.54±0.18、1.21±0.14、0.96±0.10、0.79±0.08,其中以D组下降最明显（t=2.42,P＜0.05;t=2.73,P＜0.05;t=3.28,P＜0.01;t=4.67,P＜0.01）;CTGF蛋白表达也抑制,积分吸光度比值分别为1.54±0.18、1.21±0.14、0.96±0.10、0.79±0.08,其中以D组抑制最明显（t=2.84,P＜0.01;t=4.05,P＜0.01;t=6.25,P＜0.01;t=9.72,P＜0.01）;上清液PCⅢ、HA含量也下降,随脂联素浓度增加,下降越明显.结论 脂联素能够抑制HSCs分泌PCⅢ、HA;脂联素可通过抑制HSCs内CTGF表达而发挥抗纤维化作用.     

自制套扎线在腹腔镜脾切除术中的应用及术中护理配合

目的 探讨自制套扎线在腹腔镜脾切除术中的应用效果及手术护理配合技巧.方法 通过自制结实的套扎线,应用于38例腹腔镜脾切除术的脾蒂处理中,圈套扎脾蒂后处理脾门,切除脾脏.结果 在医护精准密切的配合下,对38例进行了完全腹腔镜脾切除术,手术时间( 120±30) min,36例手术顺利,在完全腹腔镜下完成手术,2例因出现术中大出血难于腹腔镜下控制,中转开腹.围手术期无其他手术并发症.结论 自制套扎线应用于腹腔镜脾切除术脾蒂处理过程中能控制术中出血,辅以周密的护理配合,增加了术者的术中信心和手术安全感.