糖尿病早期大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡的研究

目的研究早期糖尿病视网膜病变大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡及其特征. 方法腹腔内注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型.应用过碘酸雪夫试剂染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP缺口标记 (TUNEL)法标记和透镜观察进行研究. 结果在糖尿病 3月和 6月组,可见周细胞和内皮细胞鬼影;周细胞和内皮细胞核异染色质聚集靠边并随病程进展而加重;被 TUNEL法标记的细胞核染色质分布不均,表现为环形核、新月形核等. 结论早期糖尿病视网膜病变大鼠视网膜毛细血管周细胞丧失的性质为细胞凋亡,内皮细胞亦存在凋亡.     

糖尿病早期大鼠视网膜毛细血管及视细胞超微结构变化规律

目的：探讨大糖尿病视网膜病变（糖网病）早期的视网膜毛细血管及视细胞的病变规律。材料与方法：选择健康成年Wistar大鼠,随机分成正常对照组,糖尿病1月,3月和6月组,一次性腹腔内注射链脲佐菌素STZ）诱导大鼠糖尿病,制备视网膜超薄切片,透镜观察并计算机图像分析。结果：病程1月,周细胞和内皮细胞核异染色质聚集靠边;视杆膜盘间隙略扩大。3月,毛细血管细胞异染色质聚集严重,基底膜增厚;膜盘间隙扩大明显,局灶性断裂,溶解。视杆细胞膜固缩,异染色质浓集,视杆内节线粒体肿胀,甚至空泡变性,病程6月,以上改变更加严重,毛细血管狭窄,变形,甚至闭塞。结论：糖网病早期大鼠视 膜毛细血管病变的同时,变出现视感受器超微结构的改变,随病程的进展病变逐渐加重。     

血管生成素1对高糖环境中猴脉络膜-视网膜内皮细胞的保护作用

目的 探讨高浓度葡萄糖对内皮细胞（endothelial cell,EC）单层通透性模型通透性的影响以及血管生成素1（angiopoietin-1,Ang-1）对此的保护作用。方法 将猴脉络膜-视网膜内皮细胞（RF/6A）接种于孔径0.8 μm聚碳酸酯微孔滤膜中,形成致密单层后分三组培养。正常对照组：DMEM高糖培养基,含葡萄糖25 mmol/L;高糖组：DMEM培养基,含葡萄糖40 mmol/L;Ang-高糖组：DMEM培养基,含葡萄糖40 mmol/L＋Ang-1 250 ng/ml。于第1天、第3天、第5天、第7天4个时间点建立EC单层通透性模型,检测蛋白质渗透压反射系数（δ）及滤过系数（Kf）,以监测EC单层通透性的变化;利用Western blot（NBT/BCIP显色法）检测第5天时survivin的表达。结果 第3天、第5天及第7天时,高糖组EC单层通透性增高（P〈0.01）,Ang-高糖组在第5天及第7天时,EC单层通透性升高（P〈0.01）,但仍低于高糖组;Western blot结果显示,Ang-高糖组survivin表达明显高于其他各组（P〈0.01）。结论 高糖能够增加EC单层通透性,Ang-1能对抗高糖的这种生物学作用。它可能是通过上调凋亡抑制基因survivin的表达,抑制RF/6A的凋亡而发挥生物学作用。     

Ang-1对高糖环境中猴脉络膜-视网膜内皮细胞单层通透性的影响

目的：利用猴脉络膜-视网膜内皮细胞建立内皮细胞（EC）单层模型,观察高浓度葡萄糖及血管生成素-1（Ang-1）对该模型通透性的影响．方法：待EC于孔径0．8μm的聚碳酸酯微孔滤膜上形成致密单层后分3组进行培养：对照组（DMEM培养基含25mmol／L葡萄糖）、高糖组（DMEM培养基含30mmol／L葡萄糖）、Ang-高糖组（DMEM培养基含30mmol／L葡萄糖＋0．25mg／L Ang-1）．于1,3,5,7d4个时间点,以含白蛋白1g／L的D—Hanks液灌注滤膜,检测蛋白质渗透压反射系数（8）及滤过系数（K1）;并于5d和7d利用琼脂糖凝胶电泳检测DNAladder．结果：3,5,7d时,高糖组EC单层的通透性高于对照组（P〈0．01）;Ang-高糖组与对照组之间EC单层的通透性无差异（P〉0．05）．高糖组EC的琼脂糖凝胶电泳在5d及7d均出现DNA ladder,对照组及Ang-高糖组未见DNA ladder．结论：高糖能够促进细胞凋亡,增加EC单层通透性;Ang-1能抑制EC的凋亡,对抗高糖所致的EC单层通透性增高．     

早期糖尿病大鼠光感受器超微结构变化

目的探讨早期糖尿病视网膜病变光感受器超微结构变化。方法选择健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠３２只，随机分成正常对照组、糖尿病１，３月和６月组。 ５５ ｍｇ／ｋｇ体重一次性腹腔内注射链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病。取大鼠视网膜制备超薄切片，透射电镜观察并计算机图像分析。结果病程１月只见视杆细胞膜盘模糊不清，膜盘间隙略有扩大；病程３月时，膜盘间隙扩大明显，并发生局部断裂溶解。视杆细胞核固缩、异染色质浓集。视杆内节线粒体肿胀、甚至空泡变性。病程６月时，以上改变更加严重。结论糖尿病视网膜病变早期大鼠出现光感受器的形态变化，随病程进展，呈现逐渐加重的趋势。     

凋亡相关基因Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠早期视网膜病变细胞凋亡中的作用

目的研究凋亡相关基因 Bcl- 2,Bax在早期糖尿病大鼠视网膜的表达,探讨其在糖尿病视网膜病变细胞凋亡中的作用. 方法选择健康成年 Wistar 大鼠 40只,随机分成正常对照( CON)、糖尿病 1个月( DM1)、 3个月( DM3)及 6个月( DM6)组.腹腔内注射链脲佐菌素( STZ)诱发大鼠糖尿病.制备大鼠视网膜石蜡切片行免疫组化 ABC法染色,并对染色结果进行计算机图像分析. 结果于 CON及 DM各组, Bax和 Bcl- 2二基因的蛋白均在视网膜血管表达,且随病程进展,其阳性反应强度逐渐增加.此外, Bcl- 2阳性反应在 DM3组于色素上皮细胞出现,在 DM6组,再进一步扩大到视杆内节和节细胞.而 Bax在 DM6亦出现于节细胞. 结论凋亡相关基因 Bcl- 2和 Bax在早期糖尿病大鼠视网膜血管和神经细胞的表达随病程的进展逐渐增强,二者在糖尿病视网膜细胞凋亡中起重要作用.     

地塞米松对光损伤大鼠视细胞凋亡的防治作用

目的 :研究地塞米松对光损伤及视细胞凋亡的防治作用 ,以探讨光损伤视细胞凋亡的发生机制。方法 :所有SD大鼠经循环光环境适应 7d ,实验前暗适应 36h。实验A组的大鼠只光照 ,实验B组的大鼠光照 6h后在暗箱中喂养 ,实验a组的大鼠在暗适应后腹腔注射地塞米松再光照 ,实验b组的大鼠光照 6h后在暗箱中喂养 ,且每天应用地塞米松。对经以上处理过的大鼠行灌流固定 ,摘除眼球。光镜标本在常规脱水、透明、石蜡包埋切片后 ,行HE、TUNEL法染色 ,光镜观察。应用CIAS 10 0 0图像分析系统定量检测外核层面积和视细胞凋亡指数 ,所得数据做统计学分析。结果 :在实验A组中 ,随着光照时间的增加 ,视网膜光损伤逐渐加重 ,视细胞凋亡逐渐增多 ,外核层面积逐渐减少。而在实验a组中 ,也出现如实验A组的规律性变化 ,但应用地塞米松后 ,视网膜光损伤程度减轻 ,发生视细胞凋亡的时间延迟 3h。两实验组定量检测结果经统计学分析表明 ,地塞米松对视网膜光损伤及视细胞凋亡有明显的预防作用。实验B组和实验b组的定量检测结果经统计学分析表明 ,地塞米松对视网膜光损伤及视细胞凋亡有明显的治疗作用。结论 :地塞米松在实验性大鼠视网膜光损伤及视细胞凋亡过程中发挥较好的防治作用     

早期糖尿病大鼠视感受器超微结构变化

目的 :探讨早期糖尿病视网膜病变 (糖网病 )视感受器的超微结构变化。方法 :选择健康成年 Wistar大鼠 ,随机分成正常对照组 (CON)、糖尿病 1月 (DM1 )、 3月 (DM3 )和 6月 (DM6)组。按 55mg/ kg体重一次性腹腔内注射链脲佐菌素 (STZ)诱导大鼠糖尿病。取大鼠视网膜制备超薄切片 ,透射电镜观察并计算机图像分析。结果 :病程 1月只见视杆细胞膜盘模糊不清 ,膜盘间隙略有扩大 ;病程 3月 ,膜盘间隙扩大明显 ,并发生局部断裂溶解。视杆细胞核固缩、异染色质浓集。视杆内节线粒体肿胀、甚至空泡变性。病程 6月 ,以上改变更加严重。结论 :糖网病早期大鼠即出现视感受器的形态学改变 ,随病程进展 ,呈现逐渐加重的趋势。     

临床医学教学中的考试管理初探

考试管理是一门科学 ,需要教师及教学管理人员认真研究和探讨。采取适当手段和方法加强考试管理 ,以使考试真正发挥应有的作用 ,对于提高教学质量、实施素质教育、培养跨世纪医务人才具有重大意义。总结多年来从事临床医学教学管理工作的经验 ,以下几个方面值得与同道商榷。1　考试命题类型的优化不同类型的试题可能会给学生的学习方法带来各异的影响。各种命题类型具有其优点及缺点。目前尚未有一种全面考核学生学业的命题类型 ,因此应对目前常出现的试题类型进行优化组合 ,以达到最佳效果。如何优化组合 ,由于课程性质不同 ,不一定有统一…     

实验性糖尿病大鼠视网膜毛细血管变化规律Ⅱ.超微结构观察

应用透射电镜观察ＳＴＺ糖尿病大鼠视网膜毛细血管病变规律,发现病程１个月只见周细胞和内皮细胞核异染色质聚集靠边;病程３个月,周细胞和内皮细胞异染色质聚集靠边严重,毛细血管扩张,基底膜增厚;病程６个月,以上变化呈现加重趋势,毛细血管由扩张转为狭窄,变形,甚至闭塞。