敲低肝癌细胞STAT3抑制IFN1诱导的HepG2肝癌细胞增殖和迁移

目的筛选并制备信号转导子与转录激活子3短发夹RNA(STAT3 shRNA)慢病毒,感染Hep G2肝癌细胞抑制其STAT3表达,观察对1型干扰素(IFN1)诱导的肝癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法设计并合成4段人STAT3基因的干扰序列(STAT3 shRNA 1~STAT3 shRNA 4)以及对照序列(Ctrl shRNA),与p LKO.1-sp6-pgk-GFP连接构建慢病毒表达载体,随后与骨架质粒ps PAX2、p MD2.G共转染HEK293T细胞制备慢病毒并感染Hep G2细胞。Western blot法检测STAT3的蛋白水平,筛选有效序列。敲低STAT3水平后,CCK-8法检测Hep G2细胞的增殖,TranswellTM迁移和划痕实验检测Hep G2细胞的迁移。同时观察2000 U/m L重组人IFNα2b诱导的肝癌细胞增殖、迁移能力的变化,Western blot法检测IFN相关STAT1信号的磷酸化水平。结果筛选对STAT3敲低效果最显著的STAT3 shRNA1和STAT3 shRNA2,敲低STAT3水平后,肝癌细胞增殖和迁移降低。2000 U/m L IFNα2b对细胞的增殖抑制作用更显著,迁移细胞的数量显著下降。敲低STAT3水平后,肝癌细胞STAT1的磷酸化水平升高,在IFNα2b处理后STAT1磷酸化水平进一步升高。结论敲低肝癌细胞STAT3通过上调STAT1信号通路活化,抑制细胞的迁移、增殖,恢复IFN在肝癌细胞中的应答。     

从一个教学医院分析血管疾病的现状

20世纪50年代以来,医学界对血管疾病的基础研究、诊断方法、外科技术、麻醉学、手术器械以及人工血管研制等方面取得了重大进展,由此血管外科逐渐形成了一个专门学科。     

主髂动脉闭塞症的手术治疗

主髂动脉闭塞症的手术指征为严重的间歇性跛行、足部静息痛、坏疽及溃疡。间歇性跛行时,进行动脉重建的手术指征是相对的,跛行距离100 m以内可考虑行动脉重建术;对轻度的间歇性跛行,以控制危险因素和药物治疗为主。足部静息痛、坏疽和溃疡预示着患者将丧失肢体,所以动脉重建术的指征是绝对的,手术以挽救肢体为目的。     

内皮化小口径人工血管的研究

目的 探讨成人大隐静脉内皮细胞(HSVECs)种植到人工血管内表面的可行性.方法 酶消化法获取成人大隐静脉内皮细胞,在体外扩增培养13～15 d,将扩增培养的内皮细胞种植于纤维蛋白胶预衬的聚四氟乙烯(ePTFE)人工血管内表面,继续体外培养9～12 d.在不同的时间点,分别剪取部分内皮化的人工血管,行荧光显微镜和扫描电镜检查.结果 内皮细胞种植于人工血管后,扫描电镜下可见细胞在血管表面黏附、生长、增殖.平均孵育12 d后,人工血管腔面见一层均匀的基质,其表面有内皮细胞单层,内皮细胞排列紧密,呈梭形.结论 成人大隐静脉内皮细胞可以种植到人工血管,在体外增殖形成内皮细胞单层,达到内皮化的效果.     

基质细胞衍化因子-1对人内皮祖细胞迁移的影响

目的 探讨基质细胞衍化因子-1对内皮祖细胞迁移的影响.方法 用流式细胞仪、RT-PCR、内皮功能实验鉴定内皮祖细胞,检测其CXCR4受体表达和迁移功能.结果 培养单个核细胞7 d,CD34阳性率为36.3%±23.8%,CD133为19.7%±10.3%,双阳性率为18.6%±10.7%,表达KDR基因,>90%的细胞吸收DiI-ac LDL和FITC-UEA-1.CXCR4表达率为74.8%,对照组、基质细胞衍化因子-1浓度为10、20和50μg/L时,细胞迁移数分别为3.5、7.4、24.9和28.0个.各组浓度的细胞迁移数均显著高于对照组(P<0.01),20μg/L组显著高于10μg/L组、50μg/L组显著高于10μg/L组(P<0.01),50μg/L组显著高于20μg/L组(P<0.05).结论 (1)从外周血途径分离、培养和扩增获得内皮祖细胞,表达CXCR4受体;(2)内皮祖细胞可在基质细胞衍化因子-1的趋化作用下迁移,且与其浓度呈正相关.     

纳米荧光染料C—dots标记细胞的应用

目的探讨一种新型纳米荧光染料C-dots作为细胞标记物的应用。方法不同直径的C-dots和B16小鼠黑色素瘤细胞共同培养,用激光共聚焦荧光显微镜观察C-dots被摄取及在细胞内分布情况。利用MTT比色法测定C-dots标记的细胞及未标记细胞的增殖情况;用台盼蓝染色法检查标记细胞活性。结果直径10 nm和5 nm C-dots可用于标记细胞。在共聚焦显微镜下,可见C-dots标记细胞的细胞膜带有近红外荧光。利用MTT比色法测定标记及未标记细胞的A值无显著差异,C-dots标记细胞的活性与对照组相比也无显著差异。结论C-dots可作为细胞内的标记物,用于细胞示踪、增殖试验等研究。     

人大隐静脉器官培养内膜增生形态学研究

目的 观察人大隐静脉在器官培条件下是否发生内膜增生。方法 取３０条人大隐静脉段进行器官培养１４ｄ，冰冻切片，苏木素－伊红（ＨＥ）、弹性纤维染色以及抗α－肌动蛋白（α－ａｃｔｉｎ）、增殖细胞核搞原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学染色，与不增养的对照组进行组织形态学比较。结果 增养１４ｄ后内膜显著增厚，增厚内膜层中细胞为平滑肌细胞，增殖率为４５％。结论 体外培养的人体大隐静脉将出现内膜增生。内膜增生是由于中层     

试论医院如何实施以病人为中心及其应处理好的几个关系

医院要真正做到以病人为中心，一是培训职工，使大家认同以病人为中心的理念；二是科学有地开展以病人为中心，为病人解决实际问题；三是尊重病人要从小事做起，处处为病人着想。实践证明，在以病为中心时，要处理好以病人为中心与医学科学和尊重知识尊重人才、医疗循序和规章制度、医疗质量、精神文明建设、医院不能完全商业化市场化等的关系。     

血管内超声消融术治疗急性动脉血栓的实验研究

目的　评价血管内超声消融治疗急性动脉血栓的有效性和安全性。方法　 12条实验犬制作双侧股动脉急性血栓模型 ,血栓长度 >5cm。每条犬一侧股动脉血栓予超声消融治疗 2min ,另一侧仅用消融导管作机械性穿插。观察超声组和对照组操作前后血栓处的血流变化 ,比较两组血栓段动脉经实验操作后的损伤系数及远端栓塞情况。结果　股动脉血栓超声消融后远端血流量为 (2 8.9± 4 .2 )ml/min ,显著高于对照组的 (9.6± 5 .0 )ml/min(P <0 .0 1) ;超声消融后TIMI分级指数为 2 .6 7± 0 .4 9,而对照组为 1.0 8± 0 .90 (P <0 .0 1) ;血栓处动脉损伤系数分别为 1.83± 0 .39和 1.6 7± 0 .4 9(P >0 .0 5 )。超声消融后无远端动脉栓塞现象。结论　血管内超声消融术治疗急性动脉血栓有效、安全     

白塞病并发腹主动脉瘤腔内治疗失败一例

患者男,40岁。因“突发上腹剧痛1周,伴一过性高热”入院。入院前10个月于外院行肠系膜上动脉瘤切除,腹主动脉修补术。体检:上腹轻度压痛,未及腹部肿块。CT示可疑肠系膜上动脉瘤破裂。初步诊断为肠系膜上动脉瘤破裂。入院后患者仍诉上腹疼痛,予哌替啶方可缓解。为明确瘤体周围解剖关系,于2004年3月22日行主动脉造影,发现直径约4 cm假性腹主动脉瘤,瘤体位于腹腔于与肾动脉之间,