针灸防治恶性肿瘤化疗毒副反应的临床研究

目的 研究艾灸,穴位注射对恶性肿瘤患者化疗毒副反应的不同作用。方法 将63例恶性肿瘤患者随机分3组,艾灸组（23例）,穴注组（22例）,对照组（18例）,在化疗过程中,分别应用艾条灸,穴位注射黄芪注射液,常规西药,观察白细胞总数及免疫球蛋白治疗前后变化。结果 艾灸组,穴注组均可提高白细胞总数及免疫球蛋白,优于对照组（P＜0．05,P＜0．01）,在提高白细胞总数方面,穴注组优于艾灸组（P＜0．05）,结论 艾灸,穴位注射可防治恶性肿瘤化疗毒副反应,在防治恶性肿瘤化疗毒副反应方面,不同针灸方法具有不同的效果,。     

左归丸对老龄大鼠海马糖皮质激素受体位点及其基因表达的影响

目的　观察左归丸 (ZGW)对老龄大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)位点及其基因表达的影响。方法　以2 4月龄大鼠为自然老化模型 ,随机分为老龄组、左归丸组 ,并以 3月龄大鼠为青龄组 ,各组处理 3个月。采用放射配基饱和分析技术及RT PCR方法检测大鼠海马GR位点及GRmRNA表达。结果　老龄组、青龄组及左归丸组海马GR位点分别为 (439.6 4± 4 8.0 9)、(85 0 .32± 34.96 )和 (1171.5 7± 5 4 .85 )fmol/mg蛋白 ,老龄组明显低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组较老龄组明显上调 (P <0 .0 1) ;3组GRmRNA表达量分别为 0 .2 74 9± 0 .0 6 5 9、0 .6 4 0 7± 0 .4 4 18、0 .96 0 3± 0 .32 4 9,表明老龄组GRmRNA表达量低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组海马GRmRNA表达量明显高于老龄组 (P <0 .0 0 1)。结论　左归丸延缓衰老作用可能与上调海马GR位点及其基因表达有关     

联合应用激光显微切割和RT-PCR分析膀胱移行细胞癌中survivin mRNA表达及意义

目的探讨存活素(survivin)表达在膀胱移行细胞癌(TCC)发生发展中的作用。方法收集69例手术切除的TCC新鲜标本(表浅性癌30例,浸润性癌39例)。联合应用激光显微切割(LCM)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析survivin mRNA在原发性癌、复发性癌、转移淋巴结癌组织中的表达水平。结果经LCM捕捉获取的目的细胞均质性超过95%。TCC中survivinmRNA平均阳性表达率为66.7%,其中表浅性癌为60%(18/30)、浸润性癌为71.8%(28/39)、复发性癌92%(23/25)、转移癌100%(9/9)。8例正常膀胱黏膜组织零表达。survivin mRNA高表达与TCC复发、转移密切相关(P均<0.01),其无瘤生存率低于低表达者(log等级检验,P<0.0005)。结论联合应用LCM和RT-PCR技术可明显提高TCC组织中分子水平研究的可靠性,survivin基因表达与TCC发生发展有关,可能成为阻断TCC侵袭转移的新靶点。     

联合应用激光显微切割和RT-PCR分析膀胱移行细胞癌中survivin mRNA表达及意义

目的探讨存活素（survivin）表达在膀胱移行细胞癌（TCC）发生发展中的作用。方法收集69例手术切除的TCC新鲜标本（表浅性癌30例，浸润性癌39例）。联合应用激光显微切割（KM）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术分析survivin mRNA在原发性癌、复发性癌、转移淋巴结癌组织中的表达水平。结果经LCM捕捉获取的目的细胞均质性超过95％。TCC中survivin mRNA平均阳性表达率为66．7％，其中表浅性癌为60％（18／30）、浸润性癌为71．8％（28／39）、复发性癌92％（23，25）、转移癌100％（9／9）。8例正常膀胱黏膜组织零表达。survivin mRNA高表达与TCC复发、转移密切相关（P均〈0．01），其无瘤生存率低于低表达者（10g等级检验，P〈0．0005）。结论联合应用LCM和RT—PCR技术可明显提高TCC组织中分子水平研究的可靠性，survivin基因表达与TCC发生发展有关，可能成为阻断TCC侵袭转移的新靶点。     

靶向cripto siRNA转染对裸鼠实验性大肠癌细胞肝转移的影响

 目的 研究cripto基因对人大肠癌细胞迁移、侵袭和肝转移的影响。方法 以cripto基因mRNA小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测cripto基因mRNA和蛋白水平,以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。以脾切除法建立裸鼠大肠癌肝转移模型,以cripto siRNA转染48 h后的癌细胞接种裸鼠,观察对大肠癌细胞体内肝转移的影响。结果 siRNA转染组cripto基因mRNA水平明显降低,且呈浓度和时间依赖性（P<0.001,P<0.001）。体外实验发现,cripto siRNA转染组癌细胞迁移距离和穿膜细胞数目明显低于对照组,且呈浓度依赖性（P<0.05）。体内实验发现,cripto基因siRNA转染组SW480细胞转移率和肿瘤结节数均明显低于对照组（P<0.05,P<0.05）。结论 cripto基因在大肠癌肝转移中起着重要的作用;以siRNA下调cripto基因表达,可抑制大肠癌细胞肝转移。     

RNAi沉默核因子-B亚单位p65表达抑制胃癌细胞侵袭

目的采用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术敲除胃癌细胞核因子-kappa B（nucle-ar factor-B,NF-B）亚单位p65后,观察其对细胞增殖和侵袭力的影响。方法采用p65小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）转染胃癌细胞后,采用Western Blot检测细胞p65蛋白,分别采用软琼脂集落培养试验和Ttanswell检测癌细胞增殖和侵袭能力。结果 siRNA转染组细胞p65蛋白明显被抑制,且呈浓度依赖性。与对照组比较,转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈时间和浓度依赖性。结论针对NF-B重要亚单位的p65siRNA可抑制胃癌细胞侵袭。研究发现,NF-B途径的激活是胃癌等肿瘤细胞生存的重要机制之一。     

局部亚高温热疗对肿瘤患者免疫功能的影响

目的探讨局部亚高温热疗对肿瘤患者免疫功能的影响。方法将60例病理证实为恶性肿瘤的患者随机分为两组：热化疗组（30例）和化疗组（30例）。在治疗前后抽取患者外周血样本,流式细胞仪检测样本中的淋巴细胞亚群的百分含量。结果CD3,CD4,CD4／CD8比值及NK的值,热化疗组治疗前分别为（67．0±10．0）％,（43．2±5．4）％,（2．1±0．4）％,（22．8±6．3）％。治疗后分别为（67．8±14．9）％,（45．4±11．9）％,（2．4±0．9）％,（22．6±13．6）％,差异无统计学意义。化疗组治疗前分别为（77．7±5．61）％,（51．0±7．4）％,（1．94±0．3）％,（19．0±4．5）％,治疗后分别为（68．2±6．7）％,（41．5±3．6）％,（1．51±O．3）％,（10．1±3．5）％。其中CD3和NK的值差异具有统计学意义。结论亚高温局部热疗对肿瘤患者的免疫功能有短期增强作用。     

cripto-1基因siRNA对乳腺癌细胞侵袭力的影响

目的观察cripto-1基因小于扰RNA（siRNA）对乳腺癌细胞侵袭力的影响。方法将人乳腺癌MDA—MIM68细胞分为4组,A组不处理,B组转染空载脂质体,C组转染错配siRNA,D组转染分别转染含3．125、6．25、12．5nmol／Lcfipto-1基因siRNA的脂质体。分别于处理24．48、72h收集各组细胞。采用实时定量RT—PCR法和Western blot法检测MDA—MB468的cripto-1 mRNA和蛋白,采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室检测MDA—MB468的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果与A、B、C组比较,D组MDA—MB468的cripto-1 mRNA、cripto-1蛋白、集落形成数量、穿膜细胞数均呈浓度依赖性减少（P均〈0．005）。结论cripto-1基因siRNA可抑制乳腺癌细胞侵袭。     

姜黄素对结肠癌SW-480细胞抗失巢凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对结肠癌细胞抗失巢凋亡的影响。方法:采用不同浓度的姜黄素处理结肠癌SW-480细胞,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)法检测结肠癌细胞抗失巢凋亡,采用软琼脂集落形成试验检测细胞的生长增殖。结果:姜黄素能有效地抑制结肠癌SW-480细胞锚着不依赖性增殖,且呈浓度依赖性。结肠癌细胞经姜黄素处理后,可促进失巢凋亡且与时间和浓度相关。结论:姜黄素可有效地抑制结肠癌细胞锚着不依赖性增殖,其机制可能与促进失巢凋亡有关。     

姜黄素对结肠癌HCT116细胞侵袭和抗失巢凋亡的影响

目的探讨姜黄素对结肠侵袭和失巢凋亡的影响。方法:应用姜黄素处理人结肠癌细胞系HCT116后,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭性,采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡。结果:姜黄素可有效抑制结肠腺癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,姜黄素可诱导结肠癌细胞失巢凋亡,且与浓度和时间相关。结论:姜黄素可抑制人结肠癌细胞侵袭,诱导失巢凋亡是其机制之一。