肝硬化患者低动脉血氧分压和低动脉血二氧化碳分压的临床意义

背景：肝硬化患者可合并多种脏器功能异常,其中肺功能异常临床并不少见,应引起重视。目的：探讨肝硬化患者低动脉血氧分压(PaO_2)和低动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)与肝功能Child-Pugh分级的关系及其临床意义。方法：77例诊断明确的肝硬化患者纳入研究,其中Child-Pugh A级24例,B级29例,C级24例。行动脉血气分析以比较各级患者的PaO_2和PaCO_2。对低PaO_2血症者,予吸氧4h后复查动脉血气。结果：Child-Pugh A、B、C级肝硬化患者的低PaO_2血症和低PaCO_2血症发生率依次增高．PaO_2和PaCO_2检测值依次降低。三组低PaO_2血症的发生率分别为20．8％、48．3％和79．2％(P＜0．05)。PaO_2均值分别为10．72kPa±1．27kPa、9．85kPa±1．38kPa和9．13kPa±1．09kPa (P＜0．05)：低PaCO_2血症的发生率分别为29．2％、65．5％和91．7％(P＜0．05),PaCO_2均值分别为4．74kPa±0．64kPa、4．27kPa±0．54kPa和3．78 kPa±0．83kPa(P＜0．05)。低PaO_2血症者吸氧后低PaO_2血症显著改善(9．42kPa±0．84kPa对11．74kPa±0．86kPa,P＜0．01)．而低PaCO_2血症则未见改善(4．27kPa±0．34kPa对4．35kPa±0．46kPa,P＞0．05)。结论：低PaO_2和低PaCO_2是肝硬化患者存在肺功能异常的一项参考指标,并可能与肝损害程度有关。低PaCO_2并不是低PaO_2的继发结果,而可能是反映肝硬化患者肺功能异常的独立因素。     

白介素-1O对大鼠肝星状细胞核因子-κB、细胞因子及细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:探讨白介素-10对大鼠肝星状细胞的干预作用和作用机制.方法:分离大鼠肝星状细胞(HSC),采用不同浓度的白介素-10处理后,分别应用ELISA法和Northern blot检测大鼠HSC中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β蛋白和mRNA的表达,采用凝胶迁移率法检测核因子κB(NF-κB)活性.结果:白介素-10可明显下调大鼠HSCICAM-1、TNF-α及IL-1β表达,并且抑制NF-κB活性,其效应呈浓度依赖性.结论:白介素-10可能通过下调HSCICAM-1、TNF-α及IL-1β表达和抑制NF-κB活性来发挥其抗炎和抗纤维化作用的.     

TROP-2基因小干扰RNA转染对前列腺癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响

目的观察肿瘤相关钙信号转导蛋白-2(TROP-2)基因小干扰RNA(siRNA)转染对前列腺癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响。方法以TROP-2基因siRNA转染人前列腺癌PC-3细胞后,分别用实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞TROP-2 mRNA和蛋白,用MTT法检测PC-3细胞吸光度值(以此判断细胞黏附力),以Tr-answell小室实验观察细胞的迁移、侵袭情况。结果与空载对照组相比,TROP-2 siRNA组TROP-2 mRNA的表达明显下降(P均<0.01)并呈浓度和时间依赖性(P均<0.01);与空白对照组及空载对照组相比,TROP-2 siRNA组TROP-2蛋白的表达明显下降(P均<0.01)并呈浓度和时间依赖性(P均<0.01);与空白对照组相比,TROP-2 siR-NA组细胞黏附力下降(P<0.01)并呈浓度、时间依赖性(P均<0.05);与空白对照组及空载对照组相比,TROP-2siRNA组细胞迁移、侵袭数明显减少(P均<0.01)并呈浓度依赖性(P均<0.01)。结论 TROP-2基因siRNA转染可抑制前列腺癌PC-3细胞黏附、迁移和侵袭。     

特异性siRNA下调Cr-1基因表达对人结直肠癌细胞侵袭的影响

目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Cr-1(Cr-1)基因对人结直肠癌细胞侵袭的影响。方法应用Cr-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理结直肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测Cr-1基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果 siRNA转染组Cr-1mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。体外试验发现,Cr-1siRNA可有效抑制结直肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关(P<0.05)。结论 Cr-1在结直肠癌细胞侵袭中起着重要的作用,采用Cr-1siRNA转染可抑制结直肠癌细胞侵袭。     

中药对糖尿病肾病肾保护作用的实验研究

目的：观察中药、苯那普利对实验性糖尿病肾病Alb、GLu、GHb，以及肾组织内皮素及其受体基因表达的影响，揭示中药对糖尿病肾病肾保护作用的机制。方法：建立链脲霉素糖尿病肾病模型，以中药、苯那普利干预。比较Alb、GLu、GHb变化，并检测（RT－PCR）肾皮质ET－1、ET－3、ETA－R、ETB－R的mRNA表达水平。结果：对Alb、GLu、GHb改善作用，中药、苯那普利与生理盐水差异有显著性；对Glu、GHb改善作用，中药与苯那普利差异有显著性；糖尿病肾病模型肾皮质ET－1、ETA－R的mRNA表达水平增加，经中药、苯那普利干预，其表达过高水平下调，但仍高于正常对照。肾皮质ET－3、ETB－R的mRNA表达水平与正常对照差异无显著性。结论：ET参与糖尿病肾病肾小球硬化过程；中药、苯那普利都能从ET及其受体基因转录水平上影响其表达量；中药不仅能缓解糖尿病肾病蛋白质蛋白漏出，而且还能改善血糖、糖化血红蛋白，抑制蛋白非酶糖化，从多途径进行肾保护。     

槲皮素对食管癌细胞侵袭和中期生长因子基因表达的影响

目的:观察中药提取物槲皮素对食管癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:采用不同浓度的槲皮素处理食管癌EC109细胞后,以软琼脂集落培养试验检测癌细胞锚着不依赖性增殖,以Boyden小室模型方法检测癌细胞侵袭能力,采用荧光实时定量RT-PCR检测癌细胞中期因子(midkine,MK)基因mRNA水平,以Western blot方法检测癌细胞MK基因蛋白水平变化.结果:食管癌EC109细胞经槲皮素处理后,恶性增殖和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性(均P<0.05).槲皮素处理组MK基因mRNA和蛋白水平均明显下调,且呈时间和浓度依赖性(均P<0.05).结论:槲皮素可明显抑制食管癌EC109细胞侵袭能力,其机制可能与下调MK基因表达有关.     

β-榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及Survivin表达和Caspase酶活性的影响

目的 观察伊榄香烯对人胃癌细胞系SGC-7901凋亡抑制蛋白survivin及caspase酶活性的影响，探讨β-榄香烯诱导SGC-7901凋亡的作用机制。方法 用不同浓度β-榄香烯作用胃癌SGC-7901细胞后，分别采用Northern blot、Western blot检测Survivin mRNA和蛋白水平，用酶标仪比色法检测Caspase酶活性，分别采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果 β-榄香烯能下调Survivin mRNA和蛋白水平，增强Caspase酶活性，并诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡，效果呈浓度和作用时间依赖性。结论 β-榄香烯能诱导人胃癌细胞系SGC-7901凋亡，可能与下调Survivin表达与增强Caspase酶活性有关。     

RNA干扰下调FoxM1基因表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的探讨RNA干扰下调叉头转录因子M1（Forkheadboxprotein M1,FoxMl）基因小干扰RNA（smallinterferingRNA,siRNA）对胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及分子机制。方法设计合成3个FoxM1siRNA,转染人胰腺癌Panc-1细胞后采用定量PCR方法筛选下调FoxM1mRNA效果最好的siRNA;然后以该siRNA转染Panc-1细胞后,分别以实时定量PCR检测各组细胞FoxM1mRNA表达情况;以不同浓度siRNA转染胰腺癌细胞后,分别以MTT法检测吉西他滨（20nM,Gemcitabine）对各组细胞生长和化疗敏感性的影响;以蛋白质印迹方法检测Akt磷酸化情况。结果3个siRNA均明显下调FoxM1mRNA水平,以S3效果最好。MTT结果显示,Con-A＋Gem组、Con—B＋Gem组、siRNA（3．125nM）＋GemsiRNA、siRNA（6．25nM）＋Gem、siRNA（12．5nM）＋Gem组抑制率分别为17．78％、17．56％、35．39％、52．81％及70．98％。蛋白质印迹检测发现,siRNA转染组Akt磷酸化水平明显下调。结论FoxM1基因siRNA可促进胰腺癌细胞化疗敏感性,通过下调Akt磷酸化水平可能是其重要机制之一,但其内在的分子机制尚需进一步探讨。     

RNA干扰沉默survivin基因对人肺癌细胞侵袭和Akt信号通路的影响

目的 探讨survivin基因小干扰RNA(siRNA)对肺癌细胞A549侵袭和Akt信号通路的影响.方法 应用survivin siRNA转染处理人肺癌细胞系A549后,采用实时定量PCR和Western印迹检测survivin基因mRNA和蛋白水平,采用软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭能力,采用Western印迹检测Akt磷酸化水平.结果 与对照组比较,转染组survivin基因mRNA和蛋白水平下调.Western印迹检测结果显示,转染组Akt磷酸化水平受到明显抑制.结论 survivin siRNA可抑制人肺癌细胞侵袭,抑制Akt磷酸化水平是其机制之一.     

miR-155反义寡核苷酸转染对甲状腺癌细胞迁移、侵袭和MMP-13表达的影响

目的: 探讨miR-155表达对人甲状腺癌细胞增殖及侵袭力的影响。方法：构建针对miR-155的反义寡核苷酸（antisense miR-155,AS-miR-155),同时设立空白对照组和无义寡核苷酸(oligodeoxyribonucleotides,ODN)组。人甲状腺癌BCPAP细胞经转染处理后,采用荧光实时定量PCR检测3组细胞中miR-155 mRNA表达水平,划痕试验检测癌细胞迁移能力,Transwell方法检测细胞的侵袭能力。采用ELISA方法检测各组癌细胞上清液基质金属蛋白质酶（matrix metalloproteinase 13,MMP-13）含量。结果： 与对照组和无义ODN组比较,转染AS-miR-155组BCPAP细胞miR-155表达水平降低,细胞迁移速度变慢,穿膜细胞数较少,细胞中MMP-13蛋白水平亦明显减低（P<0.05）。结论： 采用寡核苷酸下调miR-155高表达可抑制甲状腺癌细胞增殖及侵袭力,下调MMP-13表达是其重要机制。［关键词］