表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、袭和FoxM1基因表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋（表没食子儿茶素没食子酸醋,EGCG）对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度的EGCG处理人胃癌BGC823细胞后,以划痕试验方法检测癌细胞迁移能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹方法检测FoxM1基因蛋白水平变化。结果人胃癌BGC823细胞经EGCG处理后,迁移和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性（P〈0.01）。EGCG处理组FoxM1基因蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性。结论 EGCG可降低人胃癌细胞侵袭能力,下调FoxM1基因表达,是其重要机制之一。     

幽门螺杆菌对胃癌细胞BGC-823形态及凋亡相关基因表达的影响

目的:探讨H.pylori 刺激人胃癌细胞BGC-823 后,对细胞形态以及凋亡抑制基因Survivin和凋亡基因caspase-3 mRNA表达的影响.方法:分别用东亚型H.pylor i 菌株和西方型H.pylor i 菌株超声提取物,刺激胃癌细胞BGC-823,显微镜下直接观察细胞形态的变化.同时利用荧光定量聚合...     

RNA干扰下调midkine基因表达对人乳腺癌细胞粘附和侵袭力的影响

目的 探讨中期因子(midkine,MK)基因siRNA对乳腺癌细胞生物学行为的影响.方法 培养人乳腺癌Bcap-37、LCCI、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468及ZR75-1细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测MK基因mRNA表达;筛选出MK表达最高者.采用MK siRNA...     

促肝细胞再生磷酸酶-3基因对大肠癌细胞侵袭和失巢凋亡的调控

目的 探讨促肝细胞再生磷酸酶(phosphatase of regenerating liver cell-3,PRL-3)基因对大肠癌细胞侵袭的影响及可能机制.方法 应用PRL-3基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理人大肠癌HCT116细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测PRL-3 mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡情况.结果 转染组癌细胞PRL-3 mRNA和蛋白水平明显被抑制,且与时间和浓度相关.与对照组比较,转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈时间和浓度依赖性.琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,转染组细胞出现明显的凋亡现象:凋亡指数增加,出现明显的DNA条带.结论 PRL-3基因siRNA转染可明显抑制大肠癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关.     

特异性小干扰RNA沉默Polo样激酶1基因表达对恶性胶质瘤细胞增殖的影响

目的 探讨Polo样激酶1(PLK1)基因对胶质瘤细胞增殖的影响和可能机制. 方法 根据PLK1基因特点,设计并用化学方法合成了5个小干扰核糖核酸分子(siRNA)(P1、P2、P3、P4和P5).以这5个siRNA转染人胶质瘤TJ905细胞后.分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测PLK1 mRNA和蛋白表达水平.分别采用MTT法和Western blot方法检测癌细胞增殖和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白水平,用TRA-.ELISA方法检测胶质瘤细胞端粒酶活性. 结果 所设计的5个siRNA均能明显抑制胶质瘤TJ905细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好.以P4转染处理胶质瘤细胞后与脂质体对照组比较,PLK1基因mRNA水平和蛋白水平明显下调,差异有统计学意义(P均=0.000).MTT结果显示.与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制,且呈浓度依赖性(r=0.868,P=0.000).Western blot结果显示,与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组PCNA蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(F=181.36,P=0.000).TRAP-ELISA结果显示,与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组胶质瘤细胞端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P=0.000). 结论 PLK1基因对胶质瘤细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 siRNA转染处理胶质瘤细胞,可明显抑制胶质瘤细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关.     

奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌31例分析

目的:评价奥沙利铂(OXA)联合亚叶酸钙(CF)和5-氟尿嘧啶(5-Fu)治疗晚期胃癌的疗效和毒性反应。方法:31例晚期胃癌患者应用联合方案化疗,OXA 70 mg/m2,静脉滴注,第1、8天;CF 100 mg静脉滴注,第1～5天;5-Fu375 mg/m2,静脉滴注,第1～5天。结果:31例晚期胃癌患者中,完全缓解1例,部分缓解14例,总有效率为48.4%。主要不良反应为恶心呕吐,外周神经感觉异常,骨髓抑制。结论:奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶方案治疗晚期胃癌安全有效,不良反应可以耐受。     

肝硬化患者低动脉血氧分压和低动脉血二氧化碳分压的临床意义

背景：肝硬化患者可合并多种脏器功能异常,其中肺功能异常临床并不少见,应引起重视。目的：探讨肝硬化患者低动脉血氧分压(PaO_2)和低动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)与肝功能Child-Pugh分级的关系及其临床意义。方法：77例诊断明确的肝硬化患者纳入研究,其中Child-Pugh A级24例,B级29例,C级24例。行动脉血气分析以比较各级患者的PaO_2和PaCO_2。对低PaO_2血症者,予吸氧4h后复查动脉血气。结果：Child-Pugh A、B、C级肝硬化患者的低PaO_2血症和低PaCO_2血症发生率依次增高．PaO_2和PaCO_2检测值依次降低。三组低PaO_2血症的发生率分别为20．8％、48．3％和79．2％(P＜0．05)。PaO_2均值分别为10．72kPa±1．27kPa、9．85kPa±1．38kPa和9．13kPa±1．09kPa (P＜0．05)：低PaCO_2血症的发生率分别为29．2％、65．5％和91．7％(P＜0．05),PaCO_2均值分别为4．74kPa±0．64kPa、4．27kPa±0．54kPa和3．78 kPa±0．83kPa(P＜0．05)。低PaO_2血症者吸氧后低PaO_2血症显著改善(9．42kPa±0．84kPa对11．74kPa±0．86kPa,P＜0．01)．而低PaCO_2血症则未见改善(4．27kPa±0．34kPa对4．35kPa±0．46kPa,P＞0．05)。结论：低PaO_2和低PaCO_2是肝硬化患者存在肺功能异常的一项参考指标,并可能与肝损害程度有关。低PaCO_2并不是低PaO_2的继发结果,而可能是反映肝硬化患者肺功能异常的独立因素。     

白介素-1O对大鼠肝星状细胞核因子-κB、细胞因子及细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:探讨白介素-10对大鼠肝星状细胞的干预作用和作用机制.方法:分离大鼠肝星状细胞(HSC),采用不同浓度的白介素-10处理后,分别应用ELISA法和Northern blot检测大鼠HSC中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β蛋白和mRNA的表达,采用凝胶迁移率法检测核因子κB(NF-κB)活性.结果:白介素-10可明显下调大鼠HSCICAM-1、TNF-α及IL-1β表达,并且抑制NF-κB活性,其效应呈浓度依赖性.结论:白介素-10可能通过下调HSCICAM-1、TNF-α及IL-1β表达和抑制NF-κB活性来发挥其抗炎和抗纤维化作用的.     

TROP-2基因小干扰RNA转染对前列腺癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响

目的观察肿瘤相关钙信号转导蛋白-2(TROP-2)基因小干扰RNA(siRNA)转染对前列腺癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响。方法以TROP-2基因siRNA转染人前列腺癌PC-3细胞后,分别用实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞TROP-2 mRNA和蛋白,用MTT法检测PC-3细胞吸光度值(以此判断细胞黏附力),以Tr-answell小室实验观察细胞的迁移、侵袭情况。结果与空载对照组相比,TROP-2 siRNA组TROP-2 mRNA的表达明显下降(P均<0.01)并呈浓度和时间依赖性(P均<0.01);与空白对照组及空载对照组相比,TROP-2 siRNA组TROP-2蛋白的表达明显下降(P均<0.01)并呈浓度和时间依赖性(P均<0.01);与空白对照组相比,TROP-2 siR-NA组细胞黏附力下降(P<0.01)并呈浓度、时间依赖性(P均<0.05);与空白对照组及空载对照组相比,TROP-2siRNA组细胞迁移、侵袭数明显减少(P均<0.01)并呈浓度依赖性(P均<0.01)。结论 TROP-2基因siRNA转染可抑制前列腺癌PC-3细胞黏附、迁移和侵袭。     

特异性siRNA下调Cr-1基因表达对人结直肠癌细胞侵袭的影响

目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Cr-1(Cr-1)基因对人结直肠癌细胞侵袭的影响。方法应用Cr-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理结直肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测Cr-1基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果 siRNA转染组Cr-1mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。体外试验发现,Cr-1siRNA可有效抑制结直肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关(P<0.05)。结论 Cr-1在结直肠癌细胞侵袭中起着重要的作用,采用Cr-1siRNA转染可抑制结直肠癌细胞侵袭。