幽门螺杆菌flaB基因克隆及序列分析

目的：将幽门螺杆菌（Helicobacter，pylort，Hp）鞭毛蛋白B亚单位基因（月2B）克隆到质粒载体pNEB193上，并进行序列分析，为Hp疫苗的构建奠定基础。方法：用PCR方法扩增Hp月2B基因，并将其定向克隆入质粒pNEB193上，然后进行序列分析。结果：PCR扩增获得长度为1545bp的月2B基因片段，并成功克隆入pNEB193，序列分析结果显示扩增的月2B基因序列与Genebank公布的月2B基因序列基本一致。结论：本研究获得了月2B阳性克隆子，为Hp重组疫苗的研究奠定了基础。     

郑州地区(ⅡA)农村住宅微小气侯卫生标准的研究

1984年2月和6月对郑州市白庄新居民点分别进行了30户的住宅卫生调查,同时,在每户选一名成年健康女性测其生理指标与询问温热感觉。根据调查及测定结果,我们对该地区居室微小气候标准提出初步建议: 冬季:室中央温度为8～12℃,垂直,水平温差不超过3℃,昼夜温差不超过4～6℃,气流0.1～0.15m/s,气湿30～50%。夏季:室中央温度为24～28℃,气流0.5～2m/s,气湿30～60%。     

幽门螺杆菌hpaA基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及其活性鉴定

目的:优化幽门螺杆菌hpaA基因工程菌(pMAL-c2X-hpaA-TB1)的表达条件,并对其表达产物进行纯化和免疫活性鉴定.方法:通过诱导表达实验了解不同诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间对蛋白表达量的影响, 并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性HpaA蛋白进行分离、纯化;对纯化后蛋白做Western blot实验鉴定免疫活性.结果:该工程菌培养2 h时加入异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.3 mmol/L进行诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以上;经纯化得到了较高纯度(＞90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫活性.结论:建立了从TB1(pMAL-c2X-hpaA)可溶性表达产物中纯化高纯度rHpaA融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌发酵、高效表达生产工艺的研究打下了基础.     

多重耐药志贺菌整合子的序列分析

志贺菌属(Shigella)频繁出现耐药菌株,严重影响临床治疗的疗效.近年研究发现整合子-耐药基因盒与志贺菌属的耐药性有关[1],为探索志贺菌属多重耐药株携带整合子的序列结构特点,本研究对多重耐药志贺菌株的1类和2类整合子-耐药基因盒进行PCR扩增和序列分析.