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71.
幽门螺杆菌lpp20基因的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
幽门螺杆菌 (Hp)lpp2 0基因编码Hp外膜上的一种相对分子质量约为 18× 10 3的脂蛋白 (Lpp2 0 )。有研究表明 ,Lpp2 0具有良好的免疫原性和免疫保护性 ,是一种理想的疫苗候选抗原。本研究对Hp郑州分离株MEL HP2 7lpp2 0基因进行克隆和测序 ;通过对 7株Hplpp2 0基因的核苷酸序列及相应的氨基酸序列进行同源性分析 ,确定Hplpp2 0基因的变异性。采用由本研究室从郑州当地慢性萎缩性胃炎患者体内分离的HpMEL HP2 7菌株 ,应用自行设计的PCR引物 :上游 5′ GCCGAATTCATGAAAAATCAAGTTA 3′(EcoRⅠ ) ,下游 5′ GCCGTCGACCTA… 相似文献
72.
目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori)flaA基因在大肠杆菌中的表达。方法:用PCR方法扩增flaA基因,然后插入原核表达载体pMAL-c2x进行融合表达。采用蛋白印迹法对表达产物进行鉴定。结果:特异PCR和酶切鉴定证实flaA基因克隆入表达载体,并以融合蛋门形式MBP-FLA高效表达,约占细胞总蛋白的28%。该融合蛋白可与H.pylori阳性病人血清和小鼠H.pylori全菌抗体发生特异反应。结论:成功构建了能高效表达H.pylori FlaA蛋白的重组质粒,为H.pylori多价基因工程疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
73.
目的表达和纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素HpaA蛋白,研究其免疫活性和对小鼠的免疫保护作用。方法诱导TB1(pMAL-c2X-hpaA)表达H.pylori黏附素HpaA蛋白,Amyloss树脂预装柱进行分离、纯化,Western blot鉴定其免疫学活性;纯化蛋白免疫小鼠后,H.pylori国际标准菌株NCTC11637攻击感染,观察H.pylori定植情况及免疫保护效果。结果获得了高纯度且免疫活性良好的目的蛋白;HpaA蛋白免疫小鼠的保护率为53.33%(8/15),与对照组统计学差异显著(P=0.002)。结论纯化HpaA蛋白对小鼠有免疫保护作用,可作为H.pylori基因工程疫苗的候选组分。 相似文献
74.
肺癌组织中蛋白质组双向电泳图谱分析方法的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:建立一套双向凝胶电泳图像的分析方法,为进一步分析和鉴定差异蛋白奠定基础。方法:提取肺癌组织和癌旁组织中的可溶性总蛋白,进行双向凝胶电泳,电泳图片由专用扫描仪获取后,应用图像分析软件(PDQuest 7.1)进行蛋白差异点的表达情况分析。结果:二维电泳图片经过背景消减、点检测、点匹配等一系列分析后,得出了差异点。结论:PDQuest 7.1软件可以用来快速有效地对生物样品之间蛋白质的差异进行分析。 相似文献
75.
目的:构建表达幽门螺杆菌(Hp)的外膜蛋白omp22和黏附素hpaA融合基因的重组蛋白质候选菌株,为Hp疫苗研究提供依据. 方法:用PCR方法扩增出带3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因omp22-hpaA, 将其克隆到表达载体pMAL-c2X中转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western Blot鉴定其免疫原性. 结果:测序结果显示, omp22-hpaA融合基因片段由1326 bp组成,为编码440个氨基酸残基的多肽,接头序列GGTGGAGGC已成功地插入omp22-hpaA融合基因中;SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量约为53 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的20%. 结论:成功克隆并构建了omp22-hpaA融合基因原核表达系统. 相似文献
76.
氟对大鼠睾丸生殖细胞增殖细胞核抗原表达的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
目的了解氟对大鼠睾丸生殖细胞增殖功能的影响。方法对雄性大鼠腹腔注射NaF溶液建立氟中毒模型,观察睾丸的病理学、生殖细胞数量及生精功能的改变,免疫组化法测定睾丸生殖细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果高剂量染毒组(20mg/kg)与低剂量染毒组(10mg/kg)大鼠的睾丸生殖细胞数分别为(161.00±16.16)和(268.00±12.13),低于对照组(P<0.05),其生殖细胞PCNA表达率分别为(0.60±0.81)%和(0.71±0.05)%,亦低于对照组(P<0.05);其精子数目、精子活动度比对照组显著降低(P<0.05),精子畸形率比对照组显著升高(P<0.05)。结论氟可能通过抑制PCNA的表达,从而减少生殖细胞的数量,对雄性生殖系统造成损害。 相似文献
77.
抗凋亡基因livin在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)原代细胞livin基因表达及临床意义,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测46例急性非淋巴细胞白血病患者livin基因mRNA表达水平,以10名健康人为正常对照,以HL-60细胞株为阳性对照。结果表明,livin mRNA在初治ANLL患者中的表达较正常对照组明显升高(p〈0.05);治疗缓解后表达明显下降(p〈0.05);复发后其表达又升高。在初治ANLL患者中,livin mRNA表达阳性的患者完全缓解率(CR)低于表达阴性的患者(p〈0.05)。结论:livin基因过度表达和ANLL的发病呈正相关;livin基因高表达的患者完全缓解率低,预后不良;livin可作为急性非淋巴细胞白血病的发病、复发及预后判断的指标之一。 相似文献
78.
志贺菌属(Shigella)频繁出现耐药菌株,严重影响临床治疗的疗效.近年研究发现整合子-耐药基因盒与志贺菌属的耐药性有关[1],为探索志贺菌属多重耐药株携带整合子的序列结构特点,本研究对多重耐药志贺菌株的1类和2类整合子-耐药基因盒进行PCR扩增和序列分析. 相似文献
79.
80.
目的:以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)为宿主菌构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)尿素酶B(UreB)的食品级表达系统.方法:从重组质粒pMD19-T-ureB上酶切得到ureB基因片段,与含有筛选标记lacF基因的L.lactis表达载体pN... 相似文献