铬污染环境中的人群外周血淋巴细胞微核的观察

本文对从事铬作业的电镀厂工人、含铬废水污灌区菜农及净灌区菜农进行了人体外周血淋巴细胞微核分析,结果表明:前两组微核阳性率与对照组相比,有极显著性差异(P<0.01)和显著性差异(P<0.05);前两组微核率及微核细胞率与对照组相比,皆有极显著性差异(P <0.01),说明低浓度铬长期经消化道摄入可诱发人体的体细胞遗传物质结构的改变。     

郑州市某生活饮用水水源水体富营养化状况分析

目的:了解郑州市某生活饮用水备用水源春夏两季水体富营养化状态,及其与环境理化因子的关系.方法:2004年3月到8月期间,在该水源水面设2个采样点,采用标准方法监测总氮(TN)、总磷(TP)、高锰酸盐指数(CODMn)、透明度、水温、水深、pH值、光照和叶绿素a(Chla)等指标.采用综合营养状态指数法评价其营养状态;应用直线相关分析和多元回归方法探讨Chla与各理化因子之间的关系,并初步建立Chla预测模型.结果:随着夏季的到来,该水源水质逐步由中营养状态演变为富营养状态.水温、透明度、CODMn、水深和TP与Chla有相关关系(P＜0.05).多元逐步回归分析结果显示,水温、、CODMn和TN对该水源水质状况影响较大,回归方程为:Chla=3.205×水温-3.58×CODMn-4.153×TN-15.208(R2=0.979,P＜0.001);应用该方程计算出来的预测值能够较好地与实测值吻合.结论:郑州市某备用水源富营养状态严重,并且呈现持续恶化的趋势;建立的多元回归方程能够较好的预测Chla含量的变化趋势.控制该水源中的总氮含量和CODMn对于控制其中Chla的增长有重要意义.     

幽门螺杆菌中国株cagA全长基因克隆及其分子特征分析

目的克隆幽门螺杆菌中国株MEL-Hp 27cagA全长基因,并进行分子特征分析。方法参考Hp26695基因组序列,分别针对cagA基因编码区保守序列和位于cagA基因上、下游的基因序列设计两对PCR引物,交叉分段扩增包括cagA基因编码区、5′、3′非编码区在内的全长基因序列,并对cagA基因调控序列、编码序列及源自中国的CagA分子EPIYA基序分布特点进行分析。结果Hp27cagA基因编码区长3510bp,编码1169个氨基酸。5′端非编码区长649bp,-10区、-35区分别位于起始密码子ATG上游89bp和154bp处,3′端非编码区长476bp。Hp27cagA基因编码区核苷酸序列与东亚菌株同源性为96%,与西方菌株的同源性仅为86%左右。Hp27CagA分子存在典型的EPIYA基序,属于ABD型,与国际参考株NCTC11637的AB-CCC型不同。比较源自中国的HpCagA序列的EPIYA基序分布特点,未发现中国Hp分离株之间存在CagAEPIYA基序与疾病结局(胃癌、慢性胃炎和十二指肠溃疡)的聚类关系。结论成功克隆幽门螺杆菌全长ca-gA基因;cagA基因编码区及非编码区序列存在东西方差异;未发现中国Hp分离株之间存在CagA EPIYA基序与疾病结局的聚类关系。     

B72和hTERT的真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建同时表达B72和hTERT的真核表达载体.方法:根据GenBank中的序列,对B72、hTERT各设计一对两端带特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将2扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,然后双酶切各pGEM-T载体,回收目的片段,将2目的片段再克隆至真核表达质粒pEGFP-C3中,并对重组体进行PCR鉴定和测序分析.结果:PCR扩增片段与预期结果相符,B72/hTERT真核表达载体构建成功,插入片段测序结果与GenBank公布的基因一致.结论:成功构建B72/hTERT真核表达载体.     

肺癌相关蛋白的筛选与鉴定

目的:应用蛋白质组学方法筛选肺癌相关蛋白,为阐明肺癌发生的分子机制和预后研究提供理论依据. 方法: 收集8例手术切除的新鲜肺癌组织及同一患者手术切缘的癌旁组织,提取可溶性总蛋白. 应用等电聚焦(IEF)电泳和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰凝胶电泳(SDS-PAGE)技术将可溶性总蛋白分离,得到肺癌的蛋白质组分析型双向电泳图谱,经PDQuest凝胶图像分析软件分析后找出差异蛋白点. 胶内酶解差异表达的蛋白点,基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得肽质量指纹图谱(PMF),搜寻蛋白质数据库,并运用生物信息学鉴定蛋白质,分析蛋白的生物学意义和生物学功能,作为肺癌标志物的候选蛋白. 结果: 分别将8例肺癌组织及配对的癌旁组织可溶性总蛋白经过重复3次双向电泳,建立了肺癌组织蛋白质表达谱. 经PDQuest凝胶图像分析软件进行分析后, 12个蛋白质斑点只在肺癌组织有表达;6个蛋白质斑点只在癌旁表达. 对高丰度的肺癌特异表达的蛋白点进行鉴定,结果表明这些特异蛋白分别为钙粒蛋白B,Calgizzarin,载脂蛋白A-I,载脂蛋白E,Ras相关蛋白Rab-14,亲环素. 结论: 建立了人肺癌组织和癌旁组织的双向电泳图谱,为建立相应的蛋白质数据库提供了基础数据;鉴定了钙粒蛋白B等肺癌相关蛋白质,为进一步寻找肺癌蛋白标志物奠定了基础,对阐明肺癌发生的分子机制和预后研究有重要理论意义.     

幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定

目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础.     

幽门螺杆中国株cagA全长基因克隆

世界范围内不同Hp菌株CagA分子变异较大,该变异可能导致不同菌株的CagA生物学作用乃至病性不同.     

水中钙镁离子对人群血氟、尿氟及氟斑牙流行程度的影响

水中钙镁离子对人群血氟、尿氟及氟斑牙流行程度的影响巴月，崔留欣，程学敏，范清堂，吕风臣，刘华莲（河南医科大学环境卫生学教研室郑州４５００５２）关键词水氟；水钙；水镁；血氟；尿氟；氟斑牙率；斑釉齿指数自８０年代Ｊｏｌｌｙ发现水中钙离子浓度影响氟中毒流行...     

RAPD法对50株幽门螺杆菌的分子流行病学

目的：从基因水平研究幽门螺杆菌与疾病的关系。方法：用随机扩增的多态性DNA（RAPD）法对50株来自不同病人的幽门螺杆菌进行基因分型，并在此基础上探讨不同基因型别的幽门螺杆菌与疾病之间的关系。结果：50株幽门螺杆菌均呈现不同的基因图谱，经聚类分析可分为3个基因型别，此3个基因型别在不同疾病中的发生率不同，经统计学分析，差异有显性（P＝0．03）。结论：不同基因型 别的幽门螺杆菌与不同的疾病结局有关。     

用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测幽门螺杆菌的分子流行病学研究

本研究应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性(PCR RFLP)法对来自不同临床标本的幽门螺杆菌 (Hp)进行分析 ,通过聚类分析进行基因分型 ,并在此基础上探讨不同基因型别的Hp与不同疾病的关系。1.材料与方法 :(1)菌株来源与培养 :5 0株Hp菌株分离自消化道疾病行胃镜检查的患者标本 (男 30例 ,女 2 0例 ) ;2 5株来自消化道溃疡患者 ,2 5株来自其他胃病患者 ,Hp菌株用布氏肉汤培养基、在 37℃恒温、微需氧条件下培养 3～ 4天 ,观察细菌形态 ,进行菌株鉴定 ,然后传代 ,- 80℃保存。(2 )DNA制备 :收集纯培养 3～ 4天的Hp于 5 0 0 μlTE(pH…