系列肿瘤标志物免疫放射分析试剂盒的建立及临床应用

我们建立了AFP、CEA、CA-503种肿瘤标志物的免疫放射分析试剂盒(IRMAkit,Immunoradiometric assay kit),并报告初步临床应用结果。 这3种肿瘤标志物的IRMA kit均采用固相单克隆抗体技术、“三明治”夹心模     

CA242免疫放射分析的稳定性研究

本文报道了以单克隆抗体C241作为捕捉抗体, 以C242为标记抗体的碘标固相双位点夹心式CA242免疫放射分析(IRMA)的稳定性研究. 实验结果表明, 包被珠、标记抗体、加入稳定剂后的标准及缓冲液在4℃存放8周仍可获得理想的实验结果.而未加入稳定剂的标准, 当存放条件为4℃、室温和37℃时, 分别在第7周、第2周第第1周失活.37℃存放包被珠时, 各标准点的结合率降低, 并且非特异性吸附升高. 37℃存放标记抗体到第3周时仍很稳定, 到第4周时略有下降.     

抗精脒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

本文用鼠×鼠细胞杂交瘤技术首次建立了抗多胺（精脒）单克隆抗体的杂交瘤细胞系。以此杂交瘤经体外组织培养扩大，并注入同系小鼠腹腔，产生的腹水中抗体滴度达１：１０６。单抗的类别是ＩｇＧ１。单价抗体是由分子量５２ｋＤ和２７ｋＤ组成的复合体。这个单克隆抗体可用于癌症的快速诊断和预后随访。     

肿瘤标志物CA－125免疫放射分析

从瑞典引进有关卵巢癌肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，以ＯＶ１８５作为标记抗体，建立了碘标固相双位点夹心模式的ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）。该方法的标准曲线斜率自０点至５００Ｕ／ｍｌ为９９．７倍，灵敏度在５Ｕ／ｍｌ以下，批内ＣＶ６．３６％，批间ＣＶ９．８％。初步临床应用检测血清ＣＡ－１２５水平的结果为：正常妇女（３３名）为５．８±３．７８Ｕ／ｍｌ，１９例术前或复发的卵巢癌患者为１７６．４±１７７．２Ｕ／ｍｌ，卵巢癌术后（７例）为８．１±６．３Ｕ／ｍｌ；以３５Ｕ／ｍｌ为阳性界值，卵巢癌诊断阳性率为７３．７％，３３名正常人中无假阳性。７例术后卵巢癌患者ＣＡ－１２５水平降至正常范围。说明此ＩＲＭＡ在卵巢癌的诊断和监测中有较大应用价值。该方法是我国第一个国产ＣＡ－１２５ＩＲＭＡ试剂盒，已开始在全国推广应用。     

放射免疫分析的最新进展

放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA)是一种通过比活度(specific activity)高的示踪物,观察抗原与抗体结合反应产物来定量微量物质的一种分析方法.它产生于50-60年代交界,是医学生物学界微量分析中有划时代意义的创新,Yalow,Berson因此获得诺贝尔奖.     

肺癌肿瘤标记研究中多胺免疫组织化学方法的创建及应用

中国医科大学病理教研室贾心善教授和中国医学科学院肿瘤研究所核医学室范振符教授等科研人员，经过多年研究，完成了《肺癌肿瘤标记研究中，多胺免疫组织化学方法的创建及应用》一题，在国际上首次建立了多胺免疫组织化学检查技术，并制成试盒。     

主编致词

标记免疫分析起始于放射免疫分析,是一种诞生于二十世纪六十年代初的超微量分析的先进技术,创始人Yalow和Berson获得了诺贝尔奖。如今该项技术已经广泛应用于医学生物界,形成了一个强大的学科。14年前在国家主管部门核工业部、同位素公司的主持下,聚集了我国放射免疫分析奠基、     

CA－125免疫放射分析的动力学研究

以抗卵巢癌肿瘤抗原的单克隆抗体ＯＶ１９７作为捕捉抗体，ＯＶ１８５作为标记抗体，建立了特异性和灵敏度高的碘标固相双位点夹心式的ＣＡ－１２５免疫放射分析（ＩＲＭＡ）。本文报导了ＣＡ－１２５ＩＲＭＡ的动力学研究。ＣＡ－１２５抗原与捕捉抗体ＯＶ１９７室温３～４小时达到平衡；而固相ＯＶ１９７抗体结合的的ＣＡ－１２５抗原与标记抗体ＯＶ１８５室温孵育２～３小时达到平衡。反应时振荡与否、振荡频率大小以及捕捉抗体和标记抗体的量等都对ＩＲＭＡ有一定影响。这就为ＩＲＭＡ的理论研究提供了基础，并对ＩＲＭＡ的实际操作起到了指导作用。     

肿瘤相关抗原CA 19－9免疫放射分析（IRMA）与免疫酶标分析（IEMA）

以抗ＣＡ１９－９单克隆抗体Ｃ２４１为捕捉抗体，以Ｃ１９２为标记抗体建立了ＣＡ１９－９免疫放射分析（ＩＲＭＡ）和ＣＡ１９－９免疫酶标分析（ＩＥＭＡ），ＣＡ１９－９ＩＲＭＡ的标准曲线斜率Ｂ３００ｕ／Ｂ０为３７．１倍，可测定下限在４Ｕ／ｍｌ以下，批内ＣＶ５．１％，批间ＣＶ９．４％，平均回收率９８．６％。ＣＡ１９－９ＩＥＭＡ的标准曲线斜率Ｂ１５０ｕ／Ｂ０为８８．２倍，批内ＣＶ为２．４７％，批间ＣＶ为５．４％，回收率９９．５％。以ＩＲＭＡ方法检测正常血清９９例，ＣＡ１９．９为１２．９±８．５Ｕ／ｍｌ；胰腺癌患者３０例，血清ＣＡ１９－９为１６５．３±１１７．２Ｕ／ｍｌ。以３０Ｕ／ｍｌ为正常上限，则对胰腺癌检测的灵敏度为８６．６％，特异性９６．９７％，说明该方法在胰腺癌诊断中有重要应用价值。本文中的ＣＡ１９－９ＩＲＭＡ已成为第一个国产ＣＡ１９－９试剂盒，开始在全国推广应用。     

肿瘤相关糖抗原sTn的提纯及其单克隆抗体的制备

目的提纯肿瘤相关糖抗原sTn并研制针对它的单克隆抗体（mAb）。方法取羊颌下腺经溴棕三甲铵沉淀,Sepharose CL-4B凝胶过滤等获取羊颌下腺黏蛋白（OSM）,将其作为抗原采用脾内注射、完全佐剂2种方法免疫Balb／C小鼠。常规方法细胞融合,用ELISA间接法筛选阳性细胞并测定效价,双抗体竞争抑制试验识别sTn表位,采用免疫组化检测sTn在胃癌组织中的表达。结果获得2株可分泌sTnmAb的杂交瘤细胞株2F6、7E4,免疫球蛋白亚类测定均为小鼠IgG1亚类,2株mAb抗相同抗原表位。免疫组织化学染色显示,胃癌组织中sTn表达阳性率较高,可达71．4％,且与胃癌进程相关。结论成功提纯了sTn抗原并制备了2株针对它的杂交瘤细胞株,在胃癌的诊断和治疗中有潜在的应用价值。