血管活性肠肽对人胰腺癌细胞生长的自分泌调节作用及其机制的研究

采用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入研究了血管活性肠肽（ＶＩＰ）对我院所建一株人胰腺癌细胞生长的影响，并对该细胞株进行ＶＩＰ受体、受体后细胞内介质ｃＡＭＰ和多胺产生的研究。发现ＶＩＰ在１０－８Ｍ和１０－７Ｍ对具有ＶＩＰ受体的人胰腺癌细胞有明显促生长作用，且成浓度依赖关系，这种作用可被其受体拮抗剂（４－Ｃｌ－Ｄ－ｐｈｅ６，Ｌｅｕ１７）ＶＩＰ所阻断；ＶＩＰ能显著促进本株人胰腺癌细胞细胞内ｃＡＭＰ及多胺的产生，表明ＶＩＰ的促生长作用可能与细胞内ｃＡＭＰ和多胺的生物合成增加有关；本株细胞在培养过程中可向培养基中分泌一定量的ＶＩＰ，ＶＩＰ抗体能抑制其在无血清培养基中生长，提示ＶＩＰ对本株人胰腺癌细胞的生长有自分泌调节作用。     

胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ在早期胃癌普查中的意义

幽门螺杆菌 (ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,ＨＰ)感染和萎缩性胃炎是与胃癌密切相关的两种病变 ,ＨＰ感染是萎缩性胃炎的主要病因之一 ,而萎缩性胃炎已被普遍认为是胃癌的癌前病变。在由ＨＰ感染→萎缩性胃炎→胃癌的发展过程中 ,均伴随着胃蛋白酶原 (ＰＧ)的变化 ,而且后者已成为前面 3种病变的良好诊断指标及其治疗和预防干预过程中的监测指标。利用血清ＰＧ的测定 ,进行胃癌早期诊断的普查以及胃癌的预防干预计划已在日本、芬兰、挪威等国家实行。日本在老年保健法的指导下开展了日本胃癌检测计划 ,利用ＰＧⅠ、ＰＧⅡ进行大面…     

糖类抗原CA_(242)的免疫放射分析

CA_(242)免疫放射分析(IRMA,Immunoradiometric assay)是应用~(125)I标记CA_(242)的单克隆抗体制成标记抗体,用另一种单抗包被聚苯乙烯塑料小珠制成固相抗体,在标准抗原或被测物存在时形成“三明治”夹心模式的固相抗原抗体复合物。本试验采取二步反应法进行,固相抗体先与标准抗原或被     

THE AUTOCRINE REGULATORY EFFECT OF VASOACTIVE INTESTINAL PEPTIDE ON THE GROWTH OF HUMAN PANCREATIC CARCINOMA CELLS

In the present study, the effets of VIP on the growth of two human pancreatic carcinoma cell lines PU-PAH-1 and PANC-1 were determined using tritiated thymidine incorporation, VIP receptors, intracellular cAMP and polyamings were investlsa.ted, The results indicated that VIP at a concentcation of 10^-8mol/L to 10^-7 mol/L can significantly Stimulate the growth of PU-PAN-1 cells but not PANC-1 cells, This effect is dose-dependent and abolished by VIP receptor antagonist, [4-CI-Phe^6 , Leu^7] VIP, suggesting VIP receptors in PU-PAN-1 cells maymediate this effect. VIP can markedly elevate the levels of intracellular cAMP and polyammes in PU-PAN-1 cells,indicating that the growth-promoting effect stimulated by VIP may be via a rapid increase in the biosynth~es of cAMP and polyamines. In addition, the VIP-antibody ir2Libited the growth of PU-PAN-1 cells in serum-free culture medium. The results above suggested that VIP has an autoctine regulatory effect on this pancreatic carcinoma cell line(PU-PAN-1).     

肿瘤单克隆抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立

时间分辨荧光免疫分析法(Tr-FIA)或称解离放大镧系荧光免疫分析(DELFIA)是免疫分析技术的新发展,比放射免疫分析有更高的灵敏度和更高的精确度。本法继承了原放射免疫分析法之优点,而避免了使用放射性同位素,能更广泛地应用于各类型的实验室。本研究成功地建立了一种超灵敏度、高精度的卵巢癌单克隆抗体的DELFIA。其标准曲线梯度,高浓度管计数率比零管计数率高622倍,每管计数时间只需1s,标准曲线各点的C.V.值0.48～3.71％,显示出较好的精确度。曲线在1～10000u的区域内计数率与浓度有良好的线性关系和较宽的工作范围。本实验取由卵巢浆液性囊腺癌细胞株8611制得的单克     

sTn抗原和CA242、CA19-9及CEA联合检测对胃肠道肿瘤的诊断价值

探讨血清肿瘤标志物糖链抗原sTn、糖链抗原242(CA242)、糖链抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)对胃肠道肿瘤的诊断价值.采用RIA对30例健康成人和60例不同的胃肠道肿瘤患者血清进行测定.结果表明,胃癌和大肠癌患者血清sTn、CA242、CA19-9和CEA值均明显高于对照组(P＜0.01),大肠癌组CEA、CA19-9和CA242浓度显著高于胃癌组(P＜0.01),而sTn浓度显著低于胃癌组(P＜0.01).血清sTn、CA242、CA19-9和CEA的阳性率随临床分期的增加而增加,Ⅳ期阳性率显著高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.01).四种肿瘤标志物联合检测,对胃癌的敏感性较单项显著提高(P＜0.05);对大肠癌敏感性较单项CA19-9或sTn显著提高(P＜0.05).四种肿瘤标志物对于胃肠道肿瘤的诊断有一定意义,不同肿瘤标志物组合后可以提高胃癌的检出率.     

肿瘤相关糖抗原sTn的提纯及其单克隆抗体的制备

提纯肿瘤相关糖抗原sTn并研制针对它的单克隆抗体(mAb).取羊颌下腺经溴棕三甲铵沉淀,经Sepharose CL-4B等获取羊颌下腺粘蛋白(OSM),将OSM采用脾内注射、完全佐剂2种方法免疫Balb/C小鼠.常规方法细胞融合,用ELISA间接法筛选阳性细胞并测定效价,双抗体竞争抑制试验识别sTn表位,采用免疫组化检测sTn在胃癌组织中的表达.最终获得2株可分泌sTn mAb细胞株(2F6,7E4),均为小鼠IgG1亚类,2株mAb抗相同抗原表位.免疫组化染色显示胃癌组织中sTn表达阳性率较高,可达71.4%,且与胃癌进程相关.本文成功提纯了sTn抗原并制备了2株杂交瘤细胞株,在胃癌的诊断和治疗中有潜在的应用价值.     

人血清OSM-IRMA的建立及初步应用

本文利用富含肿瘤相关糖抗原sTn的羊颌下腺粘蛋白(OSM)作为抗原,建立了两株sTn表位的mAb(7F4,2F6)和双位点夹心OSM-IRMA,以探讨其对肿瘤早期诊断的可能性.结果表明,该方法的灵敏度为0.1U/mL;批内和批问CV分别为4.13%和9.7%;平均回收率为106.9%;含高浓度sTn的血清样品系列倍比稀释后测定,实测值和计算值呈线性相关,相关系数大于0.99,30名健康成人空腹血清OSM均值为4.9士1.16U/mL,以7.2U/mL为正常值上限,在胃癌、结肠癌和肺癌的阳性率分别为46.7%、40%和20%,表明该OSM-IRMA在胃癌诊断中具有较好的应用价值.     

精脒的放射免疫分析监测食道的癌前病变

在河南省林县食管癌高发区人们中用放射免疫分析检测食管癌发生不同时期血清精脒的含量。血清精脒的评价是:正常个体(36例) 76.94±74.38ng/ml;食道上皮显著增生(35例)115.71±113.45ng/ml;早期食道癌(31例)294.48±135.36ng/ml。有显著食道上皮增生的病人用氨基-维生素A酯或抗癌B治疗,用安慰剂作对照治疗。治疗一年后开始取人们的血样作血清精脒测定,结果:正常(27例)95.8±68.2ng/ml;抗癌B治疗(62例)125.1±72.9ng/ml;氨基维生素A酯治疗(64例)125.6±117.2ng/ml;对照组(62例)     

肿瘤标记物CA-50，CA-242和唾液精脒在头颈部肿瘤病人中的测定

采用三明治式固相免疫放射测定法，对头颈部恶性肿瘤病人９９人，良性疾病４２人血清中肿瘤相关抗原ＣＡ－５０和ＣＡ－２４２进行测定，此外，对上述病人还采用￣［１２５］Ｉ标记的固相放免法测定唾液精眯。发现ＣＡ－５０，ＣＡ－２４２和精脒水平在恶性肿瘤病人中增高百分比分别为２７％（２６／９８），４９％（４２／８６）和６２％（４９／７９）。在良性疾病中增高比率分别为１０％（４／４２），２８％（１１／３９）和４０％（１１／２７）。联合使用三个标记物，可以相对提高恶性组的阳性率，降低良性组的假阳性率。１４名恶性肿瘤病人的标记物作了连续测定，结果术后１０～１５天时的ＣＡ－５０值明显低于术前和术后３～４个月时的ＣＡ－５０值，而ＣＡ－２４２和唾液精脒却没有明显变化。