微量元素硒对c-myc及v-fos癌基因表达的影响及分化诱导作用

我们用 ~(32)标记的癌基因探针,通过 RNA-DNA 斑点杂交技术发现亚硒酸钠能抑制人肝癌细胞株 BEL-7402的 c-myc 表达,同时增强 v-fos 同源序列的表达,硒还能有效地抑制由致癌剂 MNU 和 BP 诱发大鼠成纤维细胞(Rat-1)癌基因 c-myc 的过度表达。NBT实验表明硒具有较强的促使人早幼粒白血病细胞分化的作用。以上结果提示硒的抑增殖促分化作用可能与调节癌基因的表达(myc 和 fos)有关。     

癌基因c-myc、Ha-ras在人肺鳞状细胞癌中的增强表达

本文初步研究了人肺鳞癌中c-myc及Ha-ras癌基因的表达。斑点杂交自显影密度分析的结果表明,人肺鳞癌总RNA中Ha-ras及c-myc基因的mRNA分别是正常人肺组织的32倍及10倍。这两种基因表达的增加在人肺恶性变中的作用,尚有待深入研究。     

胃癌与端粒酶及幽门螺杆菌感染的相关关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对胃黏膜端粒酶活性的影响及与胃癌的相关性.方法用端粒酶重复序列扩增法(TRAP)检测66例胃癌、30例萎缩性胃炎及20例正常胃黏膜标本端粒酶活性,以尿素酶法及病理组织学方法检测Hp感染.结果端粒酶活性检出率及Hp感染率分别为:正常胃黏膜10%(2/20)、35%(7/20);萎缩性胃炎36.6%(11/30)、43.3%(13/30);胃癌89.5%(59/66)、66.6%(44/66).被检标本的二者检出率随病变加重而增高.Hp感染标本的端粒酶活性检出率比无Hp感染者高.三组资料χ2检验优势比,胃癌组OR值=6,提示Hp阳性者的危险性是Hp阴性者的6倍,有显著性差异.但不论有无Hp感染,其端粒酶检出率均随病变程度加重而增加.正常胃黏膜标本中有端粒酶活性检出的标本均有Hp感染,而从胃炎及胃癌标本中检出的端粒酶阳性标本有60%以上有Hp感染.结论端粒酶活性检测可作为胃癌诊断的参考指标;Hp感染可激活端粒酶,加速胃黏膜损伤,引起一系列的病理改变可能与胃癌发生有关.     

抗人肺癌单克隆抗体ALT-04的反应性及其肿瘤定位应用的研究

采用免疫功能重建方法制备并纯化了抗人肺癌单克隆抗体 ALT—04。该单抗能识别人肺癌细胞的表面抗原,但不与正常细胞反应。免疫组化实验证明,ALT—04与人肺癌组织呈阳性反应,阳性率为83.7%,且与肺腺癌反应最强,而与正常组织无反应。~(125)I—ALT—04在荷人肺癌裸鼠体内分布实验表明其在肿瘤组织中的放射活性与各正常组织中的放射活性比例分别为2.2～25.2。其中肿瘤与正常肺组织放射活性比为6。γ—扫描得到清晰的肿瘤图象,该抗体有可能用于肺癌临床诊断及靶向治疗。     

ODC反义寡核苷酸对K562细胞的抑瘤作用

鸟氨酸脱羧酶(ODC)是催化多胺生物合成的限速酶.多胺在维持肿瘤恶性表型中起着重要作用,本室多年的研究表明,控制多胺生物合成可以抑制肿瘤细胞生长,诱导分化,增强对化疗药物的敏感性.近年,我们以ODC为靶基因构建了ODC反义RNA表达载体,以此转染人肺鳞癌细胞,成功地使其恶性表型得到了逆转.进一步说明抑制多胺生物合成     

ODC反义RNA表达质粒的构建及其对人肺鳞癌细胞生长特性的影响

应用RT—PCR方法,体外扩增获得人IL—6、IL—10、IL—13和SCF膜外区蛋白质编码序列.又运用基因重组手段,将这些基因序列分别插入到表达性载体PBV220中,转化大肠肝菌DH5α,经过筛选和鉴定,获得了上述细胞因子膜外区cDNA克隆.SDS—PAGE和生物学活性测定证实:IL—6、IL—10和IL—13已在大肠肝菌中得到表达,尤其是IL—6获得了高效表达,其表达量约占菌体总蛋白质含量的30%左右.     

IFNγ调控人肺癌A549细胞Fas／FasL表达对T淋巴细胞生长的影响

为探讨IFNγ调控有肺癌细胞Fas/FasL表达对T细胞生长的影响,分别采用FACScan,RT-PCR方法检测Fas/FasL蛋白质及mRNA表达;以荧光染色及FACScan法观察细胞凋亡;用苔酚兰排除实验分析细胞生长。结果表明,人肺癌细胞A549及T－细胞系（Jurkat)均有Fas及FasL表达;IFNγ可引起A549Fas表达上调,且与剂量相关,并增加了A549细胞凋亡诱导的敏感性;A549细胞与Jurkat细胞共培养实验证明：人A549细胞通过Fas/FasL介导导致Jurkat细胞生长抑制及凋亡诱导;IFNγ处理A549细胞后,减少了其对Jurkat细胞的生长抑制。上述结果提示：Fas/FasL途径介导了A549细胞与Jurkat细胞之间的凋亡,IFNγ通过对人肺癌细胞Fas/FasL系统表达调控,使A549细胞自身对凋亡诱导的敏感性增加,并对T细胞生长的抑制作用减弱,提示IFNγ在防止肿瘤细胞逃避免疫监控有一定作用。     

抗多胺代谢与HL-60细胞c-myc、c-fos、c-Ha-ras及ODC基因的表达

用核酸分子杂交技术研究多胺生物合成限速酶L-鸟氨酸脱羧酶(ODC)的不可逆抑制剂—二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对HL-60细胞c-myc、c-fos、c-Ha-ras癌基因及ODC基因表达的影响。结果表明DFMO处理的HL-60细胞中,c-myc癌基因表达减少,c-fos基因表达水平上升,而DFMO对ODC基因表达无明显影响。此外,本文证实了加入外源性腐胺能阻止DFMO引起的上述变化,表明DFMO对HL-60细胞基因表达的影响是其抑制细胞内多胺生物合成所致。     

白血病骨髓细胞ras癌基因产物P21蛋白的免疫组化检测

用LSAB（Labelled streptavidin biotin method）免疫组化法对30例白血病骨髓细胞进行了P_（21）蛋白免疫组化检测。其中急性粒细胞性白血病（AML）14例,9例阳性,阳性率57.14%。急性淋巴细胞性白血病（ALL）11例,1例阳性,阳性率9.09%。1例慢性粒细胞性白血病（CML）为阴性。2例CML急变期（CML BP）,1例为阳性。2例慢性淋巴细胞性白血病急变期（CLL BP）均为阳性。结果显示AML的P_（21）蛋白表达率较高。将AML与ALL进行统计学分析,P=0.03,提示表达率与白血病类型有明显相关性。     

REVERSION OF MALIGNANT PHENOTYPES OF HUMAN LUNG SQUAMOUS CARCINOMA CELLS BY ORNITHINE DECARBOXYLASE ANTISENSE RNA

ＲＥＶＥＲＳＩＯＮＯＦＭＡＬＩＧＮＡＮＴＰＨＥＮＯＴＹＰＥＳＯＦＨＵＭＡＮＬＵＮＧＳＱＵＡＭＯＵＳＣＡＲＣＩＮＯＭＡＣＥＬＬＳＢＹＯＲＮＩＴＨＩＮＥＤＥＣＡＲＢＯＸＹＬＡＳＥＡＮＴＩＳＥＮＳＥＲＮＡＧｕａｎＪｕｎ关钧，ＦａｎＭｕｚｈｅｎ范慕贞，Ｃａｏ...