非缺失性RB1基因突变的研究

使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ联合序列分析法，对视网膜母细胞瘤ＲＢ１基因的存在状态进行检测。分析发现ＲＢ１基因第６外显子Ｔ至Ｇ杂合突变，第１０外显子上游１ｂｐ处Ｇ至Ｃ杂合突变，第１６外显子中ＡＴ插入改变，第２３外是业子中Ｇ至Ｔ杂合突变。这些非缺失性ＲＢ１基因的突变似乎是随机分布基因组内，改变了ＲＢ１基因的遗传信息，致使异常的ＲＢ１的蛋白产生，弱导致视网膜母细胞瘤的发生。     

人羊膜载体培养骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化的研究

目的 探索人羊膜(human amniotic membrane,HAM)基质负载大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)、乳鼠视网膜细胞诱导条件下分化为神经元样细胞及体外构建三维培养体系的可行性.方法 中性蛋白酶消化去除HAM上皮细胞,保留基底膜作为载体,种植大鼠BMSCs,以乳鼠视网膜细胞作为诱导剂,采用Transwell双层共培养的方法 诱导种植在HAM基质上的BMSCs,并进行形态学、组织学、超微结构观察.结果 倒置显微镜下观察BMSCs接种到HAM基质上后能很快贴附生长,且细胞活力好、折光性强.乳鼠视网膜细胞诱导条件下,电镜观察诱导后的第3天细胞形态开始变化,可见小的突起.第5天细胞形态进一步变化,出现神经元样细胞的形态,突起末端相互间连接呈网状.经免疫组织化学法鉴定nestin、神经丝蛋白表达呈阳性,证明其具有神经元细胞的特征.结论 HAM基质负载的大鼠BMSCs可被定向诱导分化为神经元样细胞,体外构建三维培养体系是可行的.通过上述研究证实应用HAM基质负载并诱导BMSCs向目的 细胞分化是可能的.     

老年白内障晶状体上皮细胞凋亡及凋亡基因的表达

目的探讨老年白内障与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法TUNEL法检测凋亡细胞百分率；免疫组化法检测P53、bax在老年白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达；RT-PCR检测p53、bcl-2在老年白内障晶状体上皮细胞中的mRNA的表达水平。结果凋亡细胞百分率为5%～47.4%，P53蛋白在老年白内障晶状体上皮细胞中的表达率为15%～28%，bax蛋白的表达率为5%～16%，p53mRNA的表达率为0.48～0.78，baxmRNA的表达率为0.34～0.67。结论老年白内障的发生与晶状体上皮细胞凋亡存在一定的相关性。     

开放性眼外伤预后相关因素的研究进展

目前报道的与开放性眼外伤预后相关的因素有年龄,就诊时视力,外伤类型,创口位置,是否存在相对性瞳孔传入阻滞、眼内容脱出、前房积血、玻璃体积血、眼内异物、视网膜脱离、多次手术治疗及二期行玻璃体手术等.本文就可能与开放性眼外伤预后相关的因素做一综述.     

Coats病的诊断与治疗进展

Coats病又称为外层渗出性视网膜病变,它是一种以视网膜毛细血管和微血管异常扩张为特征,并常伴有视网膜内或视网膜下脂质渗出及渗出性视网膜脱离的疾病,晚期可并发新生血管性青光眼甚至眼球萎缩.Coats病在临床表现与形态学上具有显著的多样性,近一个世纪以来,随着对该病认识地不断深入,国内外玻璃体视网膜专家对Coats病的诊断与治疗也产生了新的看法,本文将着重对Coats病的诊断与治疗进展作一综述.     

颏部位置对面部侧貌唇突度的影响

目的:探讨颏部位置对侧貌唇突度的影响.方法:选取具有标准中国人面型的成年男性1名,描绘其头颅侧位片的侧貌轮廓,制作成剪影图作为标准侧貌,利用图像处理技术对标准侧貌的面突角进行变动,获得5张具有不同颏部位置(颏部位置正常、后缩5°、后缩10°、前突5°、前突10°)的剪影图.在此基础上,以E线为参考线,将各剪影图的上、下唇分别后移1mm和前移1mm各4次,每张剪影图分别得到9幅具有不同唇突度的侧貌图.选择180名大学生对侧貌图进行审美评价,从9种面型中选出最喜爱的3种.应用SPSS13.0软件包对评价结果进行统计学分析.结果:颏部位置正常时相对后缩的唇突度最受欢迎,最受欢迎的3种面型与其他面型的得分相比,差异有统计学意义(P<0.05);随着颏部位置的后缩,人群倾向于喜爱略微前突的唇部位置;而随着颏部位置的前突,人们则倾向于喜爱更加后缩的唇部突度.结论:颏部位置对美观侧貌的唇突度有显著影响,颏部位置不同,唇突度的审美标准亦不同.对不同错<牙合>类型的临界拔牙患者进行矫治设计时,应考虑颏部位置对唇突度的影响.     

成人单侧后牙反(牙合)患者髁突的对称性及矫治后髁突位置的变化

目的：探讨成人单侧后牙反[牙合]患者髁突的对称性及矫治后髁突位置（R）的变化。方法：21例成功矫治的单侧后牙反[牙合]成年患者作为实验组,男10例,女11例,年龄18～23岁,平均21.8岁。21例安氏Ⅰ类错[牙合]患者作为对照组,男10例,女11例,年龄19～23岁,平均22.1岁。实验组矫治前后与对照组均拍摄全颌曲面断层片和双侧矫正薛氏位片,测量髁突的不对称指数和髁突在关节窝中的相对位置。结果：实验组两侧髁突高度（CH）不对称,与对照组相比,CH的不对称指数明显增大（P〈0.05）。实验组矫治前后两侧髁突在关节窝中的位置均无显著性差异,但与矫治前相比,矫治后非反[牙合]侧髁突相对位置由前位趋于正中位（R由13.52减小为9.48）。结论：成人单侧后牙反[牙合]患者的髁突形态存在不对称性,而髁突位置相对对称,颞下颌关节可随咬合关系和下颌骨位置的变化发生改建;正畸治疗后髁突位置更加协调。     

振荡法分离小鼠视网膜色素上皮细胞提取总RNA的效果

目的探讨应用振荡法分离小鼠视网膜色素上皮（RPE）细胞并进行总RNA提取的效果。方法实验研究。应用机械法对4只小鼠眼制作眼杯,去除视网膜后应用RNA保护试剂及振荡的方法对小鼠RPE进行分离,将应用振荡法分离后的眼杯铺片,采用免疫细胞化学方法检测分离后RPE细胞残留情况;收集分离的细胞,提取总RNA。同时分别应用自发分离法、酶法、眼杯法各对4只小鼠眼RPE进行分离,提取总RNA,比较不同方法提取的RPE细胞总RNA量,并应用实时定量PCR方法对RPE细胞中RPE65、vWF及COL6A1 mRNA表达水平进行比较。数据采用单因素方差分析、独立样本t检验进行比较。结果采用4种方法进行RPE分离得到的总RNA量差异有统计学意义（F=8.538,P<0.01）,免疫细胞化学方法证实应用振荡法可以使RPE细胞与脉络膜完全分离,得到的总RNA量为（234.47±49.13）ng,与自发分离法及酶法比较差异无统计学意义（P>0.05）,但低于眼杯法（P<0.05）。4种方法得到的RPE65的mRNA表达量差异有统计学意义（F=38.453,P<0.01）,通过实时定量PCR法检测振荡法RPE65的mRNA表达量与自发分离法相当（P>0.05）,低于酶法（P<0.01）,但要高于眼杯法（P<0.01）。体现脉络膜细胞污染程度的标志物vWF及COL6A1 mRNA相对表达量,4种方法差异有统计学意义（F=45.432、90.498,P<0.01）。振荡法vWF mRNA表达水平低于自发分离法（P<0.05）,与酶法相似（P>0.05）,远低于眼杯法（P<0.01）;COL6A1mRNA表达水平与自发分离法及酶法相似（P>0.05）,远低于眼杯法（P<0.01）。结论应用振荡法可有效分离小鼠RPE细胞,并最大限度地降低来自脉络膜的污染,经总RNA提取后可得到较多的总RNA量及较好的质量,此方法方便快捷、稳定性较好,适合小样本量的RPE细胞的基因转录水平分析。     

眼科领域中干细胞研究进展

最近几年干细胞研究受到越来越多的关注,通过它不仅可以了解多细胞动物的发育,也为目前许多尚不能治疗的眼科疾病带来了希望.干细胞的基本定义是既可以自我更新又可以产生多种成熟细胞型的细胞.如果一个研究者想确切鉴定一个干细胞,就必须证明在同一细胞的克隆有上述两种特性.然而,除了胚胎干细胞以外,有些学者更喜欢使用＂祖细胞＂这个词.     

乳腺癌干细胞的研究现况

乳腺癌是当今严重危害女性健康及生命的头号杀手,目前有多项研究认为乳腺癌起源于乳腺癌干细胞。乳腺癌干细胞理论的提出较为合理地解释了乳腺癌的根源、复发及转移等生物学行为,为根治乳腺癌提供了一个新的方向。