胃癌组织中miR-222与TIMP3的表达及临床意义

  目的  探讨miR-222(Homo sapiens miR-222)与基质金属蛋白酶抑制因子3(Tissue inhibitor of metalloproteinases-3, TIMP3)在胃癌组织中的表达及其临床意义。  方法  分别运用原位杂交、免疫组化检测胃癌组织及癌旁组织中miR-222与TIMP3的表达水平, 分析miR-222、TIMP3之间的相关性以及与胃癌临床病理参数的关系。  结果  原位杂交检测显示, 在62例胃癌组织中miR-222阳性表达率为86.67%, 与癌旁对照组22.58%比较, 差异有统计学意义(P < 0.01)。免疫组化结果显示, 在62例胃癌组织中TIMP3阳性表达率为19.35%, 与癌旁对照组75.81%比较, 差异有统计学意义(P < 0.01)。相关性分析表明, miR-222的表达与TIMP3的表达呈负相关(P < 0.05);光密度值检测发现, miR-222的表达随着胃癌临床分期和浸润深度的演进而增加, 且胃癌中有淋巴结转移的miR-222的表达显著高于无淋巴结转移组(P < 0.01);TIMP3的表达随着胃癌临床分期和浸润深度的演进而下调, 胃癌中有淋巴结转移的TIMP3的表达均显著低于无淋巴结转移组(P < 0.01)。  结论  在胃癌组织中高表达的miR-222和TIMP3蛋白低表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志, 检测miR-222和TIMP3对预测结肠癌浸润转移有重要意义。      

TSA对人胃癌MKN-28细胞生物学行为及其RASSF1A基因表达的影响

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人胃癌MKN-28细胞生物学行为及其RASSFIA基因表达调控的影响.方法 0.1、0.3、1.0μmol/L不同浓度的TSA分别处理人胃癌MKN-28细胞,MTT比色法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR、Western blot分别检测RASSFIA mRNA和蛋白表达水平.结果 不同浓度的TSA处理MKN-28细胞后,细胞增殖受到明显抑制,细胞周期发生改变,使细胞阻滞于G1期,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05),并呈浓度及时间依赖性(P<0.05),细胞凋亡率无明显变化,差异无显著性(P>0.05).RT-PCR、Western blot显示MKN-28细胞无RASSF1A mRNA及蛋白表达,TSA处理后,KASSF1A mKNA及蛋白表达分别上调,呈浓度及时间依赖性(P<0.05).结论 TSA抑制人胃癌MKN-28细胞增殖,使细胞阻滞于G1期,可能与KASSF1A基因异常乙酰化状态恢复导致基因重新表达有关.     

miRNA与肿瘤的研究进展

微小RNA(microRNA, miRNA)是一种长度约为22 nt的非编码RNA,它们通过miRNA介导的特异性的基因沉默导致靶mRNA降解及抑制蛋白质的合成调控转录后基因表达水平。miRNA对细胞的增殖、分化和凋亡有重要的调节作用,在正常组织和肿瘤组织中的表达显著不同,参与了肿瘤的发生、发展。本文主要讨论miRNA在肿瘤方面的研究进展。     

DADS通过Rac1-ADF/cofilin1通路抑制人结肠癌SW480 细胞迁移与侵袭

  目的   研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）通过Rac1-ADF/cofilin1通路对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的作用。  方法  划痕愈合和侵袭实验分别检测DADS对SW480细胞迁移与侵袭的影响；RT-PCR与Western blot检测DADS对SW480细胞Rac1-ADF/cofilin1信号分子表达的作用。  结果  40与50 mg/L DADS处理SW480细胞24 h后，穿膜细胞分别减少57.12%与64.59%（P < 0.05）。处理48 h细胞迁移率分别为23.23%与12.87%，较对照组75.86%明显降低（P < 0.05）。RT-PCR显示，45 mg/LDADS处理SW480细胞24、48h后，与对照组比较Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1和destrin mRNA分别显著下调（P < 0.01）；而cofilin1 mRNA无显著性差异（P>0.05）。Western blot显示，45 mg/L DADS处理SW480细胞6、12、24、48 h后，与对照组比较Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1和destrin蛋白分别呈时间依赖性下调（P < 0.05），但cofilin1蛋白无显著性差异（P>0.05），而p-LIMK1和p-cofilin1表达分别呈时间依赖性下调（P < 0.05）。  结论   DADS可通过Rac1-ADF/cofilin1通路下调Rac1、Rock1、PAK1、LIMK1、p-LIMK1、destrin与p-cofilin1抑制SW480细胞迁移与侵袭。      

二烯丙基三硫诱导人胃癌细胞凋亡及对Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨二烯丙基三硫（dially trisulfide，DATS）对人胃癌MGC-803细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2和Bax的影响。方法用光学显微镜，荧光显微镜，流式细胞术检测凋亡，免疫组化研究人胃癌MGC-803细胞Bcl-2，Bax表达的变化。结果在光学显微镜及荧光显微镜下，通过DATS作用后的胃癌细胞出现了凋亡的典型形态学改变；流式细胞术检测可见亚G1峰出现。免疫组化显示，经DATS处理后，Bax的表达增强（P〈0．05），Bcl-2表达未见明显改变。结论Bcl-2基因家族可能参与了DATS诱导的MGC-803细胞凋亡。     

人胎盘型谷胱甘肽S转移酶在胃癌组织中的表达与基因甲基化关系的研究

目的：研究胃癌组织中ＧＳＴ－π的表达与其基因甲基化状态的关系。方法：应用Ｓ－Ｐ法检测１１６例胃癌和５３例胃癌前病变的ＧＳＴ－π表达和限制性内切酶及ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹方法检测１４例胃癌及其相应正常胃粘膜ＧＳＴ－πＤＮＡ５′端调控区ＣＣＧＧ特定位点的甲基化水平。结果：ＧＳＴ－π阳性率,正常胃粘膜１０％（４／３９）,胃癌７７％（８９／１１６）,肠上皮化生７６％（１９／２５）,不典型增生８９％（２５／２８）。ＧＳＴ－π在胃癌及癌前病变中的表达较正常胃粘膜增高（Ｐ＜００１）。胃癌组织中ＧＳＴ－π基因较正常胃粘膜呈现高度去甲基化（Ｐ＜００１）,胃癌ＧＳＴ－π基因５′端调控区低甲基化与其ＧＳＴ－π表达增加呈相关性（Ｐ＜００５）。结论：ＧＳＴ－π在胃癌及癌前病变中的表达与胃癌的发生发展密切相关,ＧＳＴ－π可作为胃癌的肿瘤相关抗原;ＧＳＴ－π基因５′端调控区低甲基化可能是ＧＳＴ－π高表达的分子机理。     

实验性胃癌发生过程中淋巴细胞免疫功能的变化和大蒜对其的影响

观察甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）诱发大鼠胃癌过程中淋巴细胞转化率的变化及大蒜对其的影响，发现癌前病变、粘膜内癌及浸润癌各组之间及各组与正常组之间淋巴细胞转化率差异的显著性（ｐ〈０．０１），提示在ＭＮＮＧ诱癌过程中淋巴细胞免疫的降低与胃癌的发生发展有关系。而大蒜预防组、治疗组与ＭＮＮＧ组之间淋巴细胞转化率差异有显著性（ｐ〈０．０１），同时诱癌率明显下降，认为可抑制ＭＮＮＧ诱发实验性胃癌的发生，其机理     

二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞体外抑制机制的初步研究

大蒜及其烯丙基硫化物抗肿瘤活性的研究是抗癌药物研究的一个新领域.二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS,C6H10S2)是用来研究大蒜抗癌疗效最适当的一种油溶性烯丙基硫化物[1].目前,有关DADS抑制人肿瘤细胞的报道尚少,本研究拟在探讨DADS对体外培养的人白血病HL-60细胞的抑制作用及其机制,为进一步探讨DADS的抗肿瘤作用提供理论基础.     

培养细胞的石蜡包埋切片在凋亡研究上的运用

分别采用细胞涂片和细胞切片法比较 DATS 诱导的人胃癌细胞凋亡的培养细胞形态学、免疫组化及Tunel 研究效果。结果显示：细胞切片法优于细胞涂片法。细胞切片法能清晰显示细胞的结构,便于凋亡的形态学改变的观察;能准确显示免疫组化及Tunel的阳性定位,便于判断阳性结果。     

丙型肝炎患者血清sIL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α和IFN-α2a水平变化及相关性研究

丙型肝炎患者血清ｓＩＬ２Ｒ，ＩＬ６，ＩＬ８，ＴＮＦα和ＩＦＮα２ａ水平变化及相关性研究王茸金伯泉１杨琨１李智伟２苏琦２（空军第４６３医院检验科，沈阳１１００４２１第四军医大学免疫学教研室，２中国医科大学第二临床学院）细胞因子在丙型肝炎免疫调...