功能化多壁碳纳米管对血管内皮细胞毒性的初步研究

目的:由于碳纳米管的广泛应用,其对人类及环境造成的影响日益受到人们的关注.血管是碳纳米管进入人体的首要通道之一,因此探讨功能化与原始状态的多壁碳纳米管对血管内皮细胞的细胞毒性作用具有重要意义.方法:自人脐静脉分离血管内皮细胞,免疫组化进行细胞鉴定.选择0.5～1 μm经羧基修饰的功能化多壁碳纳米管(f-CNTs)与同等长度未经修饰的多壁碳纳米管(p-CNTs)制备颗粒悬液,与血管内皮细胞共育后,利用噻唑蓝实验(MTT比色法)检测细胞活力,透射电镜进行细胞形态学观察;制备碳纳米管透析液,通过MTT实验检测其对细胞的毒性作用.结果:①2种纳米管均对原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生一定的毒性作用,而且其细胞毒性随剂量递增呈上升趋势.与细胞共育24 h后,p-CNTs的毒性大于f-CNTs;而共育48 h及72 h后,f-CNTs毒性大于p-CNTs.②透射电镜实验表明,f-CNTs共育细胞内空腔明显多于p-CNTs,而空腔内f-CNTs聚集体紧密程度明显小于p-CNTs.③对2种多壁碳纳米管透析后的细胞培养基对细胞活力无明显影响.结论:根据上述结果笔者推测.p-CNTs细胞毒性的主导因素是聚集程度,f-CNTs对细胞毒性的主导因素为表面效应.进入细胞的碳纳米管数目增多,造成细胞损伤或阻断细胞内代谢通路,可能是共育后期f-CNTs细胞毒性大于p-CNTs的原因.     

老年房颤人群的卒中／出血风险与年龄的关系

目的：研究老年心房颤动人群中卒中／出血相关临床事件与年龄增长的相关性及临床特点。方法收集高龄老年房颤患者的临床资料并进行随访,采用 CHADS2评分和CHA2DS2‐VASc评分评估患者的卒中风险,采用 HAS‐BLED评分评估其出血风险。随访中记录患者卒中／出血相关临床事件发生情况。结果卒中风险CHADS2、CHA2DS2‐VAS2评分及出血风险 HAS‐BLED评分均随年龄增加,在65～79岁组、80～89岁组及≥90岁组,CHA2 DS2‐VASc和 HAS‐BLED评分分别为：（2．9±0．2）、（5．2±0．2）、（5．6±0．2）（P＜0．001）和（2．1±0．1）、（3．2±0．1）、（3．6±0．1）（P＜0．001）。与65～79岁房颤患者相比,≥90岁老年患者大出血风险增加,接近卒中风险。此外,与CHADS2相比,CHA2DS2‐VASc结合 HAS‐BLED评分更好地识别双重风险患者。结论高龄老年房颤患者出现出血风险随年龄增加,接近卒中风险;高龄老年房颤患者易发生“双向事件”（血栓及出血）,预后差,需优化抗栓管理。     

小宽针刺血拔罐治疗颈椎病

两年来,我们用小宽针刺血,拔罐治疗颈椎病182例。一、一般资料:男104例,女78例。年龄18～75岁。病程1年内12例,2～5年145例,6～10年25例。182例均有不同程度颈部不适或疼痛,36%头顶部钝痛及头颈转动时眩晕。单侧上肢麻木,疼痛者154例,双侧上肢麻木,疼痛者12例,椎动脉型者16例。X线柏片颈椎有骨质增生者162例。无骨质增生者20例。     

青壮年高血压患者遵医行为现状调查

目的 了解青壮年高血压患者遵医行为的现状.方法 采用自行设计的问卷对青壮年高血压患者在服药、饮食、睡眠、运动、自我监测、寻求健康帮助等方面情况进行调查.结果 青壮年高血压患者遵医行为不佳,主要表现在以下方面：不注重运动,不能做到定时、定量运动;近半患者不能按时、按量、按种类服药;大多患者没有定期到医疗单位监测血压和自我监测症状.本组患者三餐规律、食量适中遵医行为较好.结论 应加强对青壮年高血压患者的健康宣教,积极创造条件,改进青壮年高血压患者的遵医行为,从而提高患者远期的生活质量和健康水平.     

桃红四物汤对桡骨远端骨折患者腕关节功能及骨代谢的影响

目的:探讨桃红四物汤对桡骨远端骨折患者腕关节功能及骨代谢的影响。方法:选取2017年3月—2019年3月我院正骨科收治的120例桡骨远端骨折患者,按随机数字表法将其分为对照组(60例)和观察组(60例)。对照组采用手法复位夹板外固定进行治疗,观察组在此基础上给予桃红四物汤进行治疗,治疗8周。比较两组术后8周的临床疗效;对比两组术前、术后8周的血流流变学指标、骨代谢指标水平及腕关节功能和视觉模拟评分(VAS)评分;统计两组治疗期间的并发症发生率。结果:观察组总有效率为96.67%(58/60),高于对照组的80.00%(48/60)(P<0.05)。与术前相比,术后8周,两组腕关节功能评分均升高,且观察组高于对照组(P<0.05);两组VAS评分均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);两组血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、护骨素(OPG)水平均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组并发症发生率为5.00%,低于对照组的13.33%(P<0.05)。结论:桃红四物汤治疗桡骨远端骨折,可明显升高患者血清ALP、BGP、OPG水平,增强腕关节功能,并能减轻患者疼痛,降低其并发症发生率,疗效显著。     

精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子对血液补体活性和溶血作用的影响

目的 考察精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子（ACGN）对血液补体活性和溶血的影响.方法 将精氨酸接枝到壳聚糖上制备精氨酸修饰的壳聚糖,用共沉降的方法制备精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子,用光子相关光谱检测精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子的粒径,用凝胶电泳阻滞实验对精氨酸修饰壳聚糖与DNA的相互作用进行研究,并考察壳聚糖基因纳米粒子（CGN）和ACGN在体内外对血液补体活性和溶血作用的影响.结果 精氨酸修饰壳聚糖在电荷比为2∶1时能有效地完全包覆DNA,并形成粒径大约为120～180nm的纳米粒子,ACGN和CGN在体内外对红细胞没有明显的破坏作用,在体外对补体系统均没有明显的影响作用,但在体内引起补体的轻微升高.结论 ACGN在体内外没有引起明显的补体激活和溶血作用,有望成为一种新型的、安全的非病毒基因载体.     

质粒DNA荧光修饰方法的研究

目的 研究一种质粒DNA荧光标记的简便方法,以便进行DNA递送的示踪.方法 质粒经 溴激活后,于不同温度下存放不同时间,再与1,10-二氨基葵烷形成氨基衍生物.氨基修饰质粒与荧光素异硫氰酸酯( FITC)反应,制备出荧光标记的质粒,纯化并收集产物,计算其标记效率,评估溴激活质粒在不同温度下存放不同时长对标记反应的影响;观察荧光标记对质粒转染效率的影响,并用激光共聚焦显微镜观察和流式细胞仪检测示踪效果.结果 实验数据显示溴活化的质粒随存放时间的延长标记效率反而下降,存放4℃较室温(25℃)的标记效率更高,提示溴活化质粒不适宜存放;而与没有标记的质粒相比,荧光标记的质粒对转染效率几乎没有影响.荧光标记的质粒应用于流式细胞仪检测和激光共聚焦显微观察都取得了较好的示踪效果.结论 本研究建立了一种荧光标记质粒DNA的简便方法,并且在基因递送的示踪实验中获得了较好的效果.     

组织因子途径抑制因子/绿色荧光蛋白双顺反子真核表达载体构建及其在NIH 3T3细胞中表达

目的构建含人组织因子途径抑制因子(TFPI)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子真核表达载体,并验证其在NIH 3T3细胞中的表达,为血管再狭窄的防治提供一个具有示踪和治疗双重作用的有效载体。方法以含有全长cDNA的pIRES-TFPI为模板,多聚酶链反应(PCR)扩增TFPI全长cDNA,经酶切后插入到pIRES2-AcGFP1-Nuc载体中,构建成双顺反子真核表达载体,重组质粒经酶切图谱分析、PCR扩增及测序鉴定后命名为pIRES2-AcGFP1-Nuc-TFPI。将其转染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜观察GFP在细胞中的表达,以RT-PCR检测TFPI在细胞内的表达。结果经酶切图谱分析、PCR扩增及DNA测序证实双顺反子真核表达载体构建正确;荧光显微镜可观察到细胞内GFP的表达;RT-PCR证实经TFPI基因转染的细胞内TFPI mRNA表达增高。结论成功构建了包括TFPI和GFP的真核双表达载体,并使其在NIH3T3细胞中顺利表达。     

气溶酸盐治疗儿童哮喘的临床疗效观察

哮喘是当今世界上最常见的慢性疾患,我国儿童哮喘的患病率为0.5％～2％,个别地区则高达约5％。国外有报告哮喘的发病率以年5％的惊人速度增长,如此的发病率与增长率已使哮喘成为全世界公共卫生问题,成为各国关注的焦点。尽管目前在哮喘的防治中取得了一定的进展,但长期的药物治疗难免会有些不良影响,所以,寻找一种非药物疗法,以期减少药物的负荷及免除药物的副作用就显得特别重要。我们采用的气溶酸盐疗法在探索的过程中取得了较满意的效果,现报告如下: