HPLC-ELSD法测定白头翁总皂苷碱水解产物中8种皂苷

目的 建立同时测定白头翁总皂苷碱水解产物中8种皂苷成分的HPLC-ELSD方法。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.2%甲酸水溶液;柱温35 ℃;梯度洗脱条件：0～30 min,70%～100%甲醇;体积流量1.0 mL/min;ELSD气化室温度40 ℃;气体压力350 kPa。结果 白头翁皂苷D、常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖、白头翁皂苷A、黑海常春藤苷A1、白头翁皂苷F、齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、齐墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、齐墩果酸3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷进样量分别在0.799～4.568、0.563～6.756、0.431～2.683、0.894～7.826、0.643～7.504、1.351～7.822、0.629～2.515、0.698～2.794 μg,峰面积（A）的对数值lgA与相应质量（M,μg）的对数值lgM呈良好的线性关系（n＝5）,8种成分的平均回收率在99.0%～101.0%,且RSD值均小于1.5%。结论 本检测方法简便、准确,为白头翁总皂苷碱水解产物的质量控制提供了依据。     

PM2.5通过TLR4破坏自噬流加重Raw264.7巨噬细胞炎症反应

目的 探讨PM_2.5对Raw264.7巨噬细胞自噬及炎症反应的影响及机制。方法 CCK-8检测PM_2.5对Raw264.7巨噬细胞活性的影响,透射电镜观察自噬结构;Ad-mCherry-GFP-LC3B转染细胞后荧光显微镜观察自噬通量,以探讨PM_2.5对巨噬细胞活性和自噬流的影响。再设置对照组、PM_2.5组、雷帕霉素（Rap,自噬诱导剂）组、羟氯喹（HCQ,自噬抑制剂）组、PM_2.5+HCQ组、PM_2.5+TAK-242[Toll样受体4（TLR4）抑制剂]组。Western blot法检测自噬相关蛋白,包括微管相关轻链蛋白3比值（LC3Ⅱ/Ⅰ）、p62、组织蛋白酶B（CTSB）、溶酶体膜蛋白2（LAMP2）和炎症相关蛋白,包括Toll样受体4（TLR4）、核苷酸结合域样受体蛋白3（NLRP3）的表达水平;酶联免疫吸附试验检测相关炎性因子白细胞介素（IL）-1β、IL-18、IL-10分泌水平。结果 Raw264.7巨噬细胞活性随着PM_2.5浓度的增加和作用时间的延长而降低。透射电镜观察到PM_2.5组有较多自噬空泡和双膜自噬体,自噬溶酶体少见,且荧光显微镜下PM_2.5组绿色荧光淬灭不明显,Merge后黄红色荧光比值高于对照组和Rap组（P<0.05）。相较于对照组,PM_2.5组NLRP3、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、CTSB、IL-1β、IL-18的表达上调,LAMP2、IL-10表达下调（P<0.05）,而HCQ抑制自噬的同时,促进NLRP3、IL-1β、IL-18的表达,抑制IL-10表达（P<0.05）。相较于对照组、PM_2.5组和HCQ组,PM_2.5+HCQ组NLRP3、IL-1β、IL-18的上调及IL-10下调更为显著（P<0.05）。此外,PM_2.5组TLR4表达高于对照组,TAK-242抑制TLR4后NLRP3、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、CTSB、IL-1β、IL-18的表达较PM_2.5组下调,LAMP2和IL-10的表达上调（P<0.05）。结论 PM_2.5可呈时间和浓度依赖性地降低巨噬细胞活性;且PM_2.5诱导Raw264.7巨噬细胞发生自噬,但阻断自噬流,加重巨噬细胞炎症反应,且该过程可能由TLR4介导。     

中成药和保健食品中18种非法添加降压药物的HPLC QTOF/MS定性检测

摘 要 目的：建立降压类中成药和保健食品中非法添加18种降压药物的液相色谱串联四级杆飞行时间质谱（HPLC-QTOF/MS）快速定性检测方法。方法: 采用Agilent Eclipse plusC₁₈(50 mm×2.1 mm,1.8 μm)色谱柱进行分离,以0.5%甲酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0.2 ml·min^-1,离子源为ESI源,正离子检测模式,对降压类中成药及保健品中非法添加的该18种化学药物进行定性检测。结果: 18种化学药物的检出限分别为0.2～2.5 ng·mL^-1,12批供试品中有1批检测到添加了利血平。结论:该方法专属性强、灵敏度高,适用于降压类中成药及保健品中非法添加该18种化学药物的定性分析。     

新疆羊遗传资源开发利用的成就与问题

概述了新疆羊遗传资源现状,分析了建国以来新疆羊遗传资源开发利用工作的成就和存在的问题,提出了目前开发研究工作的重点.     

肺栓塞79例临床诊治分析

<正>肺栓塞(PE)是各种栓子阻塞肺动脉系统的一组疾病或临床综合征的总称。目前,因其高发病率、高病死率和低诊断率已成为全球医学界关注的疾病,且发病率有明显升高趋势,是一种极易被误诊的急危重症疾病,可见于各临床科室。在老年人群中,PE的患病率和病死率均随年龄的增长而增加,在65～69岁的患者中年发病率为1.8%,85～89岁的患者中年发病率为3.1%。美国每年新发病人数约60万,其中近20%死     

糖尿病肾病的治疗概况

糖尿病肾病（diabetes nephropathy,DN）是1型及2型糖尿病（DM）最常见的并发症之一,亦是1型糖尿病患者主要死因。随着糖尿病（特别是2型）发生率的逐步上升,糖尿病肾病的发病人数也相应增加。多数研究表明,30%～60%糖尿病患者合并糖尿病肾病。在欧美,糖尿病已成为导致终末     

脂多糖通过LDLr诱导巨噬细胞泡沫化:炎症应激下巨噬细胞泡沫化的另一条通路

目的研究炎症介质-脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1巨噬细胞在无血清培养基中培养4 h后,分为对照组(继续无血清培养),高脂组(加入LDL负荷,终浓度为25 mg·L-1),高脂加炎症刺激组(加入LDL负荷,终浓度为25 mg·L-1,同时加入炎症介质LPS,终浓度200μg·L-1),单纯炎症刺激组(加入炎症介质LPS,终浓度200μg·L-1),以上各组细胞培养24 h后收获。ELISA法检测细胞培养基中TNF-α浓度,酶化学法检测细胞内胆固醇浓度,琼脂糖电泳检测LDL氧化程度,Real time PCR法检测LDLr、SREBP2和SCAP mRNA表达水平,Western blot法检测LDLr、SREBP2和SCAP蛋白表达,激光共聚焦检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况。结果细胞内胆固醇测定发现,炎症介质LPS通过增加THP-1巨噬细胞对非修饰LDL摄取,导致巨噬细胞转变为泡沫细胞。在无炎症介质LPS时,25 mg·L-1LDL减少LDLr mRNA和蛋白表达(P<0.05)。然而,LPS增加LDLr mRNA和蛋白表达,逆转25 mg·L-1LDL对LDLr的抑制效应,不恰当的增加了巨噬细胞对LDL摄取(P<0.05),LPS刺激也导致了SCAP和SREBP2的mRNA和蛋白过表达(P<0.05),同时促进了SCAP从内质网转移到高尔基体。这些结果提示LPS干扰了胆固醇介导的LDLr负反馈调控,使非修饰LDL在巨噬细胞内堆积,导致泡沫细胞形成。结论本研究提示,在LPS诱导的炎症应激状态条件下,天然LDL可以通过LDLr被巨噬细胞大量摄取入细胞内,导致泡沫细胞形成,这可能是巨噬细胞泡沫化的另一条通路。     

社区卫生筹资机制的探索

随着卫生改革的深入,社区卫生作为基层卫生服务体系中的重要组成部分得到了发展和壮大.近年来对社区卫生服务的筹资机制的探索有两种提法,一是收支两条线,二是政府购买.对这两种筹资机制的探索,在全国范围内均开展了试点.但在试点过程中对这两种筹资机制,都存在不同的理解和做法.在进一步明确社区卫生筹资目的的前提下,对不同筹资机制的产生背景、不同的理解以及风险进行归纳和总结.     

盆底肌肉功能锻炼治疗女性轻中度压力性尿失禁的临床研究

目的观察盆底肌肉功能锻炼治疗女性轻、中度压力性尿失禁(SUI)的临床疗效,为寻找合适的治疗方法提供理论参考。方法将107例轻、中度SUI患者随机分为治疗组和对照组。对照组采用常规药物治疗,治疗组采用盆底肌肉功能锻炼治疗。连续治疗12周后评价临床疗效,观察治疗前后两组患者尿动力学指标的变化。结果 (1)两组患者的最大尿流率、平均尿流率与治疗前比较显著下降(P0.05)。两组患者的排尿时间、功能性尿道长、最大尿道关闭压与治疗前比较显著上升(P0.05),且治疗组与对照组比较均有显著性差异(P0.05);(2)治疗组临床疗效总有效率为92.2%,显著高于对照组(P0.05)。结论盆底肌肉功能锻炼是轻、中度女性SUI患者的首选治疗方法 ,值得临床推广应用。     

根管治疗中旋转镍钛锉安全使用次数的测试

目的 探讨使用旋转镍钛锉进行根管治疗时的安全次数,明确护士在根管治疗时对镍钛锉的使用次数进行记录的重要性.方法 选用PorTaper和FlexMaster镍钛锉对200颗离体牙进行根管预备.结果 无论是ProTaper统还是FlexMaster统的镍钛锉,最少使用14次后发生折断,最多使用20次.不同的镍钛锉在正常情况下有95%的可能在使用15-18次时发生折断.结论 每种镍钛锉正常情况下使用最好不超过14次.