氧化石墨烯促进HaCaT细胞迁移及初步机制研究

目的 观察氧化石墨烯(grapheneoxide,GO)对人表皮细胞株HaCaT细胞迁移的影响,初步探讨其可能机制.方法 将HaCaT细胞分别应用GO终浓度为0、0.001、0.01、0.1、1.0、10.0 μg/mL的RPMI 1640细胞培养液培养,在培养的不同时相点,应用CCK-8法检测细胞活性,蛋白印迹法检测PCNA表达.采用划痕实验检测细胞迁移情况,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架改变,蛋白质印迹法检测细胞F-actin、Vinculin的表达.结果 (1)低浓度GO对HaCaT细胞增殖无影响,当GO浓度高于1.0 μg/mL时则具有明显的毒性作用.10.0 μg/mL GO可明显抑制细胞PCNA表达(P＜0.05).(2)划痕实验结果显示:低浓度GO可促进HaCaT细胞迁移,其中以0.01 μg/mL浓度效果最明显,在划痕后24 h,该组细胞迁移面积比对照组增加35.33％ (P ＜0.01).(3)激光共聚焦显微镜观察发现,0.01μg/mL GO刺激后,细胞纤毛明显增多,胞内应力性纤维增粗.而其1.0 μg/mL组细胞变小、变圆.(4)蛋白印迹法检测结果显示:0.01μg/mL GO刺激后F-actin表达增加(P＜0.05),而1.0μg/mL作用后F-actin表达却明显低于对照组.GO能促进Vinculin表达,但仅当GO浓度高于0.1 μg/mL后差异才有统计学意义.结论 特定浓度的GO可促进HaCaT细胞迁移,可能与其影响细胞骨架及F-actin、Vinculin表达有关.     

切除性手术治疗学龄儿童病灶性Lennox-Gastaut 综合征

目的：研究MRI阳性的学龄期儿童Lennox-Gastaut 综合征（ LGS）患者切除性手术的疗效,并分析手术适应证。方法回顾性分析解放军总医院第一附属医院神经外科收治的学龄期LGS儿童患者14例,其中左侧大脑半球切除术1例,单脑叶切除术9例,多脑叶切除术4例。对患者的人口学特征和临床特征,手术方法,手术结果进行分析。结果本组患者MRI显示局限性异常6例,广泛性异常8例。病理灶全切除9例。术后1年和3年的癫痫无发作率为64．3％和57．1％。其中病理灶全切除和MRI显示局限病理者术后3年无发作率分别为75％和83．3％。术后较术前QOL改善者11例,术后IQ改善者9例。术后3年总体患者满意度评分为86．07％±12．66％。满意度与术后无癫痫发作有明显相关性（ P＝0．001）。术后使用AEDs较术前显著下降。结论切除性手术治疗学龄期儿童合并病理灶相关的LGS癫痫控制效果良好,QOL和IQ显著改善,安全性高。 MRI显示局限性病理灶的患者应当优先考虑切除性手术,完整切除病理灶疗效可能更好。     

禽流感病毒检测技术研究进展

禽流行性感冒病毒简称禽流感病毒（AIV）,属于正粘病毒科、流感病毒属。流感病毒根据可溶性抗原不同可分为A、B、C3型,只有A型（AIV）易变异,并可在禽、人、猪、马和海洋哺乳动物中暴发流行,出现轻度呼吸疾病到严重败血症等。1878年AIV在意大利首次暴发,其后在英、法、德等欧洲国家和美国均有流行。高致病性AIVH5N1于1997年在香港致6人死亡,2003～2004年在亚洲致4人死亡,     

人神经干细胞移植治疗重度新生儿一氧化碳中毒的初步探讨

目的探讨人神经干细胞移植治疗新生儿重度一氧化碳中毒的可行性。方法1例生后18d的新生儿重度一氧化碳中毒急性期患儿，肌张力异常，原始反射减弱，新生儿神经行为测定评分15分。取孕12周胚胎前脑细胞体外培养扩增11d，获取人神经干细胞球，经患儿脑室穿刺注入。结果移植后28d，患儿肌张力、原始反射明显改善，新生儿神经行为测定评分35分。移植后9个月Peabody量表，0～6岁儿童神经心理检查量表评估，患儿运动、智力、语言发育正常。结论本例人胚胎来源神经干细胞移植治疗急性期新生儿重度一氧化碳中毒，临床疗效显著。最终的疗效还需更多病例的进一步观察。     

类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞的差异蛋白质谱分析

目的 应用双向凝胶电泳-质谱法分析正常人及类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞蛋白质组表达差异,探讨差异蛋白在类风湿关节炎发病中的作用.方法 采用固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞总蛋白质,银染显色,PDQuest软件分析图像,比较两种细胞蛋白质组表达差异,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,并用Western blot验证部分表达差异蛋白质.结果 ①采用窄范围的pH 4～7 IPG胶条进行2-DE分析,正常人及RA患者滑膜细胞蛋白胶图上分别平均显示852、837个点.有49个蛋白点在正常、RA滑膜细胞间有2倍以上的显著性量变.②分别在胶图上共选取40个表达水平存在明显差异的蛋白质点进行质谱鉴定,鉴定出23个在RA患者滑膜细胞中表达上调蛋白质.Western blot验证Enolaseα、Annexin Ⅰ、Cathepsin D、SOD2、Peroxiredoxin 2在RA滑膜细胞中表达显著升高.结论 正常人及类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞表达蛋白质组存在差异.这些差异蛋白可能参与类风湿关节炎的发病.     

酵母双杂交系统筛选FOXP3的相互作用蛋白

目的 利用酵母双杂交系统筛选与人FOXP3相互作用的蛋白.方法 应用酵母双杂交系统,将成功构建的酵母诱饵表达载体pGBKT7-FOXP3,与转化了成人肝cDNA文库的酵母菌Y187接合,筛选与FOXP3相互作用的蛋白,通过一对一的回复性杂交实验排除假阳性,并对阳性克隆进行序列测定和生物信息学分析.结果 经过酵母双杂交共获得最终确认3个阳性克隆,测序后经生物信息分析为肿瘤蛋白D52、分裂因子3b及未知蛋白.结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与FOXP3相互作用的3个蛋白,它们可能与Treg细胞的发育分化及其功能有关.     

低剂量铅接触对幼大鼠行为的影响(英文)

SD雌大鼠从妊娠d 16到分娩后d 21摄取含铅水,断奶后仔鼠仍摄取至出生后d 30,测试仔鼠行为。步下法中,第二次下台潜伏期缩短,5 min内的下台次数增加;水迷宫测试中,通过水迷宫的时间延长,进入盲端的次数增加;且自发活动增强,对新环境的适应性下降。结果表明低剂量铅使幼鼠学习和记忆能力下降,活动增加。     

增生性瘢痕不同时期结缔组织生长因子表达的动态研究

目的 探讨结缔组织生长因子在增生性瘢痕发病机制中的作用。方法 分别留取不同时期增生性瘢痕和正常皮肤组织标本，应用免疫组织化学SABC法对组织中的结缔组织生长因子蛋白进行检测，并进行图像定量分析。结果 随着增生性瘢痕的增生、减退和成熟，结缔组织生长因子蛋白的表达量明显呈由强至弱的变化；正常皮肤组织中仅有少量结缔组织生长因子蛋白表达。结论 结缔组织生长因子可能在增生性瘢痕纤维化进程中发挥重要促进作用。     

徒手旋转胎头法在持续性枕横位、枕后位中的应用

持续性枕横位及持续性枕后位是胎头位置异常中最常见的 ,也是导致头位难产的重要原因之一。纠正胎头位置异常是预防头位难产的最主要措施。本文重点对持续性枕横位及枕后位的产妇在临产过程中不同时期应用徒手旋转胎位的效果进行了分析比较。1 临床资料一般资料　我院自 1 998～ 2 0 0 1年间因持续枕横位及枕后位在进入活跃期后出现宫颈扩张延缓或停滞的5 86例 ,并随机分为 3组 ,第 1组 :宫口扩张 6～ 8ｃｍ ,先露在坐骨棘平至棘下 1 .5ｃｍ ;第 2组 :宫口扩张 4～ 5ｃｍ ,先露在坐骨棘上 1～ 2ｃｍ ;第 3组 :宫口扩张 9～ 1 0ｃｍ ,先露在…     

铅对大鼠海马生长抑素的影响

探讨铅对大鼠海马生长抑素含量的影响以及停止接触后生长抑素的恢复情况。随着铅染毒剂量增加，血铅及皮层铅浓度均增加，海马中生长抑素含量减少；停止接触３０、９０天后，生长抑素可恢复至正常水平。