继发突变位点对Leber's遗传性视神经萎缩作用机制的研究

目的探讨继发突变位点在Leber’s遗传性视神经萎缩(Leber’s hereditary optic neuropathy,LHON)疾病发生发展中的作用。方法对4个LHON家系患者及家系男性子代进行3个原发位点、24个继发位点及相邻片段检查。结果4家系均携带11778位点突变,所查患者无24个继发位点突变,但在这些位点的相邻片段上有5178、5108、3705、3721、13734等多个多态位点存在。结论线粒体多态位点具有家族遗传性,在LHON继发位点研究中应同时进行男性子代检查,以排查突变位点是否具有致病性。"修复基因"的存在可能对LHON疾病发展有影响。     

NF-κB/IκBα在MNU致实验性大鼠视网膜损伤中的变化

目的 观察核因子KappaB（NF-κB）在N-甲基-N-亚硝脲（MNU）诱导大鼠视网膜光感受器细胞凋亡中的的变化,探讨MNU损伤视网膜的机制。方法 给生后50d的雌性SD大鼠一次腹腔注射MNU60mg／kg．分别在MNU处理不同时间后处死动物。光学显微镜观察视网膜的形态学变化;TUNEL试剂盒检测光感受器细胞凋亡：Western blotting分析NF-κB。结果 MNU处理后24h,视网膜光感受器细胞核固缩和光感受器细胞层外节部定向障碍：7d后．外颗粒层和光感受层几乎完全消失。光感受器细胞凋亡在MNU处理后24h达高峰。在凋亡发生的过程中,仅在MNU作用12h和24h后,胞核内有低水平的p65蛋白。相反,胞浆和胞核内的KB蛋白水平呈时间依赖性地显著增加。结论 NF-κB／IKBa信号通路的激活可能介导了MNU所致的视网膜损伤。     

Caspase-3在急性视网膜光损伤模型中的作用

【目的】探讨Caspase-3在急性视网膜光损伤模型中的作用。【方法】利用手术显微镜光源E=(30000±50)lx照射SD大鼠右眼,照射时间为30min,建立急性光损伤模型。分别在照射后6h、1d、3d、7d和15d处死动物,取眼球做光镜和电镜检查;通过流式细胞仪检测视网膜细胞凋亡情况、Caspase-3试剂盒检测其活性、Westernblot法检测Caspase-3蛋白水平的表达。【结果】①光镜及电镜检查表明:随着时间的推移,视网膜的内、外节水肿逐渐加重,其中内节线粒体肿胀逐渐加重、外节盘膜叠状结构解离,而外核层细胞核排列紊乱、核固缩、核层变薄,后期视网膜色素上皮细胞几乎消失。②AnnexinV联合PI染色法结果表明:随着时间推移,凋亡细胞所占的比例呈上升趋势,但7d与15d凋亡细胞的比例无明显差异,分别为83%和81%。③Caspase-3活力测定表明:随着时间推移,Caspase-3活力呈上升趋势,由最初6h时的0.02活力单位,在第7天达最高峰至10.2,然后开始下降,在15d时下降至6.8活力单位。④WesternBlot检测结果表明:6h、1d、3d基本检测不到激活的Caspase-3蛋白酶,而7d与15dCaspase-3蛋白酶含量相似。【结论】急性光损伤引起的SD大鼠视网膜光感受器细胞凋亡与Caspase-3密切相关。     

川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲引起大鼠视网膜损伤的拯救效应

目的:观察川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲诱导SD大鼠光感受器细胞凋亡的保护作用。方法:2003-03/09在中山大学中山医学院实验动物中心,于雌性SD大鼠生后47d,分别经腹腔注射小、中及大剂量的川芎嗪注射剂,1次/d,并于生后50d腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲60mg/kg。在N-甲基-N-亚硝脲处理不同时间后处死动物,取眼球。通过dUTP缺口末端标记试剂盒检测光感受器细胞凋亡;视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度;反转录聚合酶链反应法检测基因c-fos的表达。结果:N-甲基-N-亚硝脲作用24h后,模型组周边视网膜的光感受器细胞凋亡指数为38.0%;川芎嗪注射剂组分别为30.0%,15.6%和8.4%。作用7d后,模型组周边视网膜的总厚度为37μm;川芎嗪注射剂组分别为41,66和85μm。川芎嗪注射剂可抑制N-甲基-N-亚硝脲诱导的即早基因c-fos的表达。结论:川芎嗪注射剂通过下调基因c-fos的表达,抑制光感受器细胞凋亡,从而部分地保护N-甲基-N-亚硝脲引起的视网膜损伤。     

N-甲基-N-亚硝脲对大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变

目的:观察N-甲基-N-亚硝脲(N—methyl—N—nitrosourea，MNU)对SD大鼠光感受器细胞毒性作用的形态学改变。方法：雌性SD大鼠76只，分12组，正常对照组4只，其余组各6只。于大鼠生后50d，分别一次腹腔注射MNU 40mg／kg、60mg／kg和80mg／kg。在MNU处理后24h、48h、3d和7d，处死大鼠，取眼球，做组织学检查。结果：不同剂量的MNU均引起视网膜损伤，其损伤的程度与MNU剂量呈正比。作用24h后，可见不同程度的视网膜光感受器细胞核固缩和光感受器细胞外节部定向障碍；48h或3d后，可见光感受器细胞丧失；7d后，外颗粒层和光感受层仅剩下少数几层或几乎完全消失。结论：MNU对大鼠视网膜光感受器细胞有选择性的毒性作用，该作用呈剂量和时间依赖性。     

氩激光治疗中心性浆液性视网膜脉络膜病变的临床研究

目的 分析氩激光治疗中心性浆液性视网膜脉络膜病变(中浆)的临床效果。方法 选择经眼底荧光血管造影显示有明确渗漏点，其渗漏点距黄斑中心凹500μm以外的中浆患者102例102眼，采用氩绿激光行渗漏点直接光凝封闭，激光参数：光斑直径106—200μn，爆光时间0．2s，能量80-150mW。激光光凝1次或2次补充完成。结果 激光光凝后视力迅速提高-行以上者95眼，视力无变化7眼；眼前黑影、视物变形症状消失的87眼；两周内视网膜神经上皮盘状脱离消失，中心凹反光出现的80眼；首次光凝未完全封闭渗漏点需2次补充光凝的4眼；治疗过程中无1例因光凝损伤黄斑中心凹；全部患者激光光凝后随访6个月至5年，未发现远期光凝并发症，同时无1例复发。结论 氩激光治疗中浆可较快提高视力、缩短病程、减少复发率，把握光凝条件是杜绝光凝并发症的关键。     

中国南部的葡萄膜炎流行病学研究

目的 葡萄膜炎是任何年龄段均可发生，尤其是中青年好发的严重威协视功能的眼内炎症。然后，有十二多亿人口的我国的葡萄膜炎流行病学几乎一无所知。本研究旨在探讨我国葡萄膜炎的发病及有关流行病学状况。方法 在我国南部广东省新会县以挨家挨户家访法进行葡萄膜炎流行病学调查。采用国际标准视力、侧照法、直接眼底镜及手持裂隙灯等方法检测，对疑患葡萄膜炎均用托品酰胺散瞳后使用裂裂隙灯和眼底镜检查。结果 随机抽查患共10500人（21000只眼），其中包括4800名男性和5700名女性，最年轻仅为出生后一个月，最年长为92岁，发现16人（20只眼）患葡萄膜炎。该病的人群患病率为0.152%。最年轻的患为7岁儿童，最年长为63岁老人。平均患病年龄为35.1岁，16名患中，11名年龄在10至49岁，占患的69.8%，5名患（6只眼）为活动性炎症，占所有患的30%。9人11只眼（占0.086%)巳成盲目，平均致盲年龄在44.5岁。结论 研究表明葡萄膜炎确是中青年严重损害视功能的常见眼疾之一。据此调查，估计我国有200余万葡萄膜炎患。     

火把花根治疗伤寒杆菌内毒素所致大鼠葡萄膜炎

目的 观察中药火把花根片对伤寒杆菌内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎动物模型的治疗作用。方法 用中药火把花根片治疗伤寒杆菌内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型,并设立不造模的空白对照组、生理盐水对照组和醋酸强的松治疗组作为对照,通过临床观察和病理学研究,探讨火把花根片对葡萄膜炎的治疗作用。结果 火把花根片治疗组与生理盐水治疗组相比炎症明显减轻,火把花根片治疗组与强的松治疗组的疗效相比没有显著差异。结论 火把花根片对伤寒杆菌内毒素诱导的动物模型有与强的松一样明显的治疗作用。     

中山医科大学中山眼科中心中美合作研究项目招聘

中山医科大学中山眼科中心临床药理研究室在多方资助下 ,预开展眼科药物药理学及眼部感染免疫学研究 ,其中包括眼弓形体病发病机理的实验和临床研究。现需 1或 2名博士后研究员 ,具有眼科工作经历者优先考虑。有意者请将中英文个人简历各 1份 ,您对眼科药物药理或眼部感染免疫学研究的兴趣和理论依据 (要求中英文对照 ,2或 3页 ) ,博士毕业论文 ,2或 3篇有代表性的论著 ,3或 4名推荐人姓名及本人工作单位名称、联系电话及Ｅｍａｉｌ地址 ,寄至 5 10 0 6 0广州中山医科大学中山眼科中心胡世兴教授 ,Ｅｍａｉｌ:ｍａｒｋｈｕ @ｇｚｓｕｍｓ.ｅ…     

视网膜色素变性rds小鼠生后5周内视网膜外核层细胞光镜和电镜观察

目的观察遗传性视网膜色素变性rds小鼠在出生后5周内视网膜外核层细胞的光镜和超微结构变化，为进一步应用rds小鼠进行实验研究提供数据。方法rds新生鼠42只，在0d、3d、7d、14d、21d、28d、35d分别取11个眼球，立即经体积分数10％中性甲醛固定，光学显微镜下观察眼球水平位视网膜赤道部外核层细胞的厚度；另取1个眼球经体积分数2．5％戊二醛溶液固定，电镜观察外核层细胞及其盘膜。结果光镜观查结果显示：0d、3d视网膜的外核层和内核层未分开；7d的rds小鼠外核层和内核层已能区分，外核层光感受器细胞层数为（9．55±0．69）层；14d稍有增加为（10．09±0．70）层；21d后逐渐减少，为（9．00±0．63）层；28d为（8．27±0．65）层；35d为（7．91±0．70）层。电镜结果显示，rds小鼠视网膜的外核层细胞从出生后第14天凋亡细胞增加；第21天盘膜初步形成，但部分被破坏；线粒体在出生当天、第3天和7天丰富，第14天破坏较重；外界膜从第14天发展为不连续；从7d开始，视网膜色素上皮层出现多层和吞噬泡增多。结论rds小鼠从21d后视网膜外核层细胞逐渐减少，视网膜光感受器细胞外段的线粒体和外界膜破坏逐渐加重。这一结果为进一步开展rds小鼠的研究提供了科学依据。