荧光定量聚合酶链反应法检测光感受器细胞凋亡大鼠视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA的表达

目的：检测半胱氨酸蛋白酶3mRNA在光感受器凋亡大鼠视网膜中的表达，探讨其在光感受器细胞凋亡的发生、发展中的意义。方法：实验于2004—03／12在中山眼科中心眼科学教育部重点实验室完成。选择雌性SD大鼠36只，随机数字表法分为正常对照组6只，N-甲基-N-亚硝脲组30只，后者又分为造模后12h，1，2，3，5d5个时相点．每个时相点6只。正常对照组大鼠经腹腔注射生理盐水；N-甲基-N-亚硝脲组大鼠按体质量一次性腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲40mg／kg，分别于造模后12h，1，2，3，5d处死动物，摘除右眼球，立即分离视网膜，提取总RNA，用荧光定量聚合酶链反应法检测视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA的含量。结果：纳入动物36只，均进入结果分析。正常对照组、N-甲基-N-亚硝脲组造模后12h，1，2，3，5d5个时相点视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量分别为1．52&;#215;10^5，18．35&;#215;10^5，25．14&;#215;10^5，29．25&;#215;10^5，13．72&;#215;10^5．12．24&;#215;10^5。N-甲基-N-亚硝脲腹腔注射后12h视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量上升，第2天时最高，达正常对照组表达量的19倍，此后渐下降，第5天表达量仍为正常对照组的8倍。结论：视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达与光感受器细胞的存亡有关，可作为光感受器细胞凋亡发生、发展的预测指标之一。     

激光诱导鼠脉络膜新生血管的两种检测方法对比研究

目的 比较病理组织切片和眼底荧光血管造影（FFA）在检测半导体激光诱导Brown Norway（BN）大鼠的脉络膜新生血管（CNV）中的应用价值。方法 用半导体激光（波长810nm，曝光时间0．1s，光斑100μm，能量100-140mW）对10只BN大鼠视乳头附近的视网膜进行光凝，每眼10个激光点，光凝后2h，3天，1、2、4周分别行FFA以及病理组织学检查，观察光斑区CNV的产生及变化过程。结果 激光照射后2h及3天无CNV形成，FFA显示无荧光渗漏。激光光凝后1周出现CNV，FFA1周时荧光渗漏34点（34／102，33．3％），2周时荧光渗漏42点（42／68，61．8％），4周时荧光渗漏21点（21／35，60．0％），且CNV出现不一定伴有荧光渗漏，病理切片证实激光光凝后1、2、4周CNV发生率分别为35．7％、72．2％、70．6％。结论 相对而言，病理组织切片对CNV的检出率要比FFA高，但它和FFA一样也存在一些技术缺陷，这两种常用方法有待进一步改进和补充。     

氩激光凝固法对糖尿病性视网膜病变的疗效观察

目的观察糖尿病性视网膜病变(DR)不同分期者接受氩激光治疗的临床效果。方法采用科以人2000型氩激光组合激光机对170例263只患眼分别做如下处理:(1)对非增殖期糖尿病视网膜病变(NPDR) 30眼行局部氩激光凝固术(光凝);(2)对增殖前期糖尿病视网膜病变(PPDR) 156眼行次全视网膜光凝;(3)对增殖期糖尿病视网膜病变(PDR ) 77眼行全视网膜光凝,对合并黄斑局限或弥漫性水肿者给予局灶性光凝或格栅样光凝。于光凝后3个月检查,进行视力、眼底、视网膜荧光血管造影,并与治疗前各项结果对比。结果视力提高92眼(35%)、无变化144眼(55%)、下降27眼(10%)。眼底检查、荧光血管造影复查示:NPDR、PPDR眼视网膜微血管瘤、水肿、渗出消退,荧光渗漏消退占89%,其余11%需补充光凝。PDR眼视网膜、视盘新生血管消退占67%,33%为部分消退需补充光凝。黄斑水肿完全或部分消退占91%,光凝后出现视网膜前灶性出血占8%,玻璃体积血为1%。结论氩激光对不同分期DR均有效。NPDR、PPDR效果好于PDR眼,后者光凝后荧光血管造影复查以及补充光凝对提高疗效非常必要。     

趋化性细胞因子及其受体与春季角结膜炎

春季角结膜炎是一种慢性季节性加重的双侧外眼变态反应性炎症,在春季角结膜炎的病理生理过程中,嗜酸性细胞在结膜的聚集占重要地位,有多种分子控制着选择性募集嗜酸性细胞到炎症部位的过程。趋化性细胞因子,一个具有化学趋化作用的肽家族,被认为在炎症中自细胞的游走和跨内皮通道的过程中发挥重要作用。本文着重介绍趋化性细胞因子及其受体的生物学特性及在春季角结膜炎发病中的作用。     

大鼠外伤性PVR视网膜前膜形成中TERT、PCNA和Bcl-2的变化

目的：探讨与细胞增殖相关的端粒酶逆转录酶TERT、增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡抑制蛋白Bcl-2在外伤性PVR视网膜前膜形成中的动态变化及其相关性。方法：S-P法对外伤性PVR大鼠模型视网膜前膜做TERT、PCNA、Bcl-2免疫组织化学染色和HE染色,染色结果行图像分析。结果：伤后PCNA蛋白表达阳性细胞率和平均光密度值出现先升高后降低的动态变化,14d组阳性率最高,与7d组和28d组比较有显性差异。伤后TERT蛋白和Bcl-2表达阳性细胞率和平均光密度值出现先升高后稍降低的动态变化,14d组和21d组阳性率最高,与7d组比较有显性差异,TERT、PCNA和Bcl-2蛋白表达之间有显相关性(P≤0．01)。结论：TERT、Bcl-2参与外伤性PVR视网膜前膜增殖细胞的生长调控,与细胞增殖的动态变化呈高度相关性。     

川芎嗪对rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞干预作用的光镜观察

目的通过rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞的病理变化探讨盐酸川芎嗪对遗传性视网膜色素变性小鼠可能的治疗作用。方法rd和rds新生鼠各84只,随机分为两组,实验组和对照组,每组42只小鼠。实验组小鼠从出生当天开始,ip盐酸川芎嗪80mg/kg,每日2次,至出生后35d;对照组ip等量生理盐水。分别于0d和注射后3、7、14、21、28、35d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察水平视网膜近赤道部位光感受器细胞的厚度。结果病理结果显示,经盐酸川芎嗪治疗后14、21、28、35d,与未用药的对照组相比较,rd和rds小鼠光感受器细胞层数明显增加(P<0.01)。结论川芎嗪可延缓rd和rds小鼠视网膜光感受器细胞的破坏。     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的:观察汉防己甲素(Tet)对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)分泌及表达的影响.方法:收集正常球结膜与初发翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液,ELISA法检测两种细胞培养上清液中MMP-1,MMP-3,MMP-9的含量及10-5mol/L的Tet作用48h翼状胬肉成纤维细胞培养的上清液中含量的变化.荧光定量PCR检测10-5mol/L的Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-3mRNA表达的影响.结果:培养的初发翼状胬肉成纤维细胞上清中MMP-1,MMP-3含量较正常成纤维细胞上清中含量高[MMP-1:26928±1135→3148±74(ng/L),MMP-3:52593±1031→12490±3126(ng/L),P＜O.01],加入10-5 mol/LTet作用48h后明显下降[MMP-1:26928±1135→15064±533(ng/L),MMP-3:52593±1031→29943±561(ng/L),P＜O.01].培养的正常结膜及初发翼状胬肉成纤维细胞上清中未检测到MMP-9.初发翼状胬肉成纤维细胞MMP-3 mRNA是正常结膜组织成纤维细胞的3倍,10-5mol/L的Tet作用24h后表达量下降了27.1%.结论:Tet对翼状胬肉成纤维细胞MMP-1,MMP-3的分泌有明显的抑制作用,并能抑制其细胞MMP-3 mRNA表达量.     

Leber遗传性视神经病的病理机制与治疗

Leber遗传性视神经病是由于线粒体基因突变导致的母系遗传性常见致盲眼疾。该病在发病率及突变位点中存在种族差异,不同突变位点间存在着不同比率的自发恢复现象。所谓的自发恢复现象尚待长期观察证实。由于线粒体基因的遗传特征的复杂性使该病发病机制及其病理生理机制不清。现今Leber遗传性视神经病尚无成功的动物模型,亦无明确有效的治疗方法。包括针灸在内的中医药疗法可能在该病的临床治疗中发挥重要作用。     

眼弓形体病基础及临床研究进展

刚地弓形体是一种细胞内寄生虫 ,可通过免疫介导引起局灶性坏死性视网膜炎或视网膜脉络膜炎 ,即眼弓形体病。是免疫健全人群中眼后部葡萄膜炎的常见病因之一 ,在艾滋病人中有较高的发病率 ,本文对近年来在该病的发病机制、诊断、治疗等方面的研究作一综述。     

眼炎症机制及抗炎药物药理进展

眼炎症是最常见的眼科疾患，环氧化酶（Cyclooxygenase)产物前列腺素（Prostaglandin,PG)是众所周知的眼炎症介质，脂氧化酶（Lipooxygenase)代谢产物白三烯（Leukotriene,LT)是比PG更强大的炎症介质，环氧化酶1（COX1）和环氧化酶2（COX2）的发现进一步阐明了消炎痛和激素等药的药理和毒理机制，塞来昔布（Celecoxib)是第一个特异性环氧化酶－2（COX－2）抑制剂，已用于骨关节和类风湿性关节炎的症状治疗，在眼科尚未见应用报导，细胞因子除维持正常生理功能外，主要参与机体的免疫炎症及抗感染抗肿瘤等重要的病理生理过程，趋化因子是细胞因子中的一类结构和功能特殊的活性分子，被分为四个家族，即α（CXC）－，β（CC）－，γ（C）－，和δ（CX3C）－趋化因子。已经证实趋化因子可使白细胞和其它细胞趋化募集于炎症或免疫反应部位，并使之活化，这些特殊细胞因子如同粘附分子和巢受体（Homing Receptor)一样，成为新的抗炎药物研究之靶子，NO是重要的小分子免疫炎症介质，NO既参与了对病原体的杀伤防护，又参与了组织细胞的病理损伤，NO合成酶－1，2，3的发现使得该研究前进了一大步。Fas介导的凋亡过程也是机体防护组织细胞损伤破坏的机制之一。有关凋亡的增强促进剂或抑制剂已经引起生物医学界的极大关注，更昔洛韦（Ganciclovir,GCV)系一种新的无环乌嘌呤衍生物，较阿昔洛韦更为独特，作用更强。环胞霉素－A（Cy-A)是特异性细胞免疫抑制剂。其药理机制之一是通过钙离子及其通道的影响。FK506（Tarcolimus)的免疫抑制强度是Cy-A的10－100倍，抗炎免疫抑制机制可能也与对钙离子的影响有关，中医药在眼炎症的治疗中起重要作用，其合理应用及作用机制有待进一步研究探讨。