葛根素抗rds小鼠视网膜光感受器细胞凋亡及其机制探讨

目的 观察葛根素对遗传性视网膜色素变性rds小鼠的治疗作用,并探讨其抗视网膜光感受器细胞凋亡的作用机制.方法 rds新生小鼠随机分为两组,实验组和对照组.实验组小鼠从出生时开始,ip盐酸葛根素80mg/kg,每天2次,至生后35 d,对照组同时ip等量生理盐水.分别在用药后0、3、7、14、21、28、35d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,常规病理切片.另取眼球经2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察.用TUNEL,方法检测视网膜光感受器细胞的凋亡,用免疫组化方法测定Bcl-2在视网膜的表达.结果 病理结果显示,经葛根素治疗后14、21、28、35 d,rds小鼠光感受器细胞层数与对照组比较,明显增加(P<0.01).电镜结果显示,葛根素治疗组与对照组比较,在7、14、21、28、35 d可减轻rds小鼠光感受器细胞及其外段盘膜部位的线粒体、盘膜和外界膜的破坏.rds小鼠经葛根素药物治疗后3、7、14、21、28、35 d,光感受器细胞的凋亡率与对照组比较明显减少(P<0.01);在7、14、21、28、35 d,Bcl-2在视网膜光感受器细胞基质及其内外段的表达明显增强(P<0.01).结论 葛根素可减轻rds小鼠视网膜光感受器细胞的病变,其作用机制可能是通过上调视网膜光感受器细胞及其内外段Bcl-2的表达延缓rds小鼠视网膜光感受器细胞的凋亡.     

杞菊地黄汤对化学诱导光感受器细胞凋亡大鼠的治疗观察

目的观察不同剂量杞菊地黄汤对N甲基N亚硝脲(NmethylNnitrosourea,MNU)诱导的大鼠光感受器细胞凋亡的影响。方法SD大鼠分为正常组、模型对照组以及杞菊地黄汤6倍、3倍、1倍和1/3倍各剂量组。TUNEL法检测光感受器细胞的凋亡,常规HE染色测量视网膜外核层的厚度。结果与模型对照组相比,3倍与1倍剂量杞菊地黄汤能显著降低MNU诱导的大鼠外核层细胞凋亡百分率(P<0.01),维持外核层厚度(P<0.01);6倍和1/3倍剂量杞菊地黄汤组大鼠与模型组无差异(P>0.05)。结论3倍与1倍剂量的杞菊地黄汤对MNU诱导的光感受器细胞凋亡有抑制作用。     

rd小鼠出生后5周内视网膜外核层细胞及其外段的光镜和电镜观察

目的观察遗传性视网膜色素变性rd小鼠视网膜外核层细胞层的病理和超微结构变化,为进一步应用rd小鼠进行实验研究提供数据。方法rd新生鼠42只,分别在第0、3、7、14、21、28、35d取眼球,立即经10%中性甲醛固定,光学显微镜下观察眼球水平位视网膜赤道部外核层细胞的厚度;另取眼球经2.5%戊二醛溶液固定,电镜观察。结果病理结果显示,rd小鼠视网膜外核层细胞层数或密度从第14d开始减少2.14层±0.60层,第21d减至近单层1.30层±0.37层,第35d减至0.57层±0.25层。电镜结果显示,rd小鼠视网膜光感受器细胞层生后第14d出现凋亡;外段盘膜部位线粒体从第7d开始出现部分溶解、减少,逐渐加重;外界膜也从第7d开始变为较连续,第21d后不连续。结论视网膜光感受器细胞外段的线粒体和外界膜对于视网膜盘膜的形成起重要作用。这一结果为进一步开展rd小鼠的研究提供了科学依据。     

汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的实验研究

目的观察汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用，寻找治疗翼状胬肉和预防其复发的有效药物。方法用MTT比色法测定不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞增生的抑制作用，并与丝裂霉素C（MMC）进行比较；用荧光定量PCR检测10^-5mol／L的汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞基质金属蛋白酶（MMP）MMP-3 mRNA的表达的影响。结果不同浓度的汉防己甲素对体外培养的翼状胬肉成纤维细胞的增生均有明显的抑制作用（P〈0．01）；10^-5mol／L的汉防己甲素作用24h其MMP-3 mRNA的表达量下降了27．12％。结论汉防己甲素对翼状胬肉成纤维细胞具有明显的抑制作用，可望用于对翼状胬肉的治疗。     

春季角膜结膜炎的免疫学发病机制研究

春季角膜结膜炎(VKC)乃变态反应源性结膜炎之一种,是长期反复发作的双侧结膜炎症,影响患者生活质量。春季角膜结膜炎的免疫学发病机制比较复杂,IgE介导的Ⅰ型变态反应在春季角膜结膜炎的发生中起一定作用,但近年越来越多研究证明,CD4 Th2细胞介导的细胞免疫在春季角膜结膜炎的发生中亦起重要作用,春季角膜结膜炎的发生是二者共同作用的结果。现就春季角膜结膜炎发生中两种不同的免疫学发病机制进行综述。     

川芎嗪对视网膜色素变性rd小鼠的干预作用及其抗凋亡作用机制研究

目的观察川芎嗪对视网膜色素变性以小鼠视网膜外核层细胞的病理、超微结构、凋亡和Bcl-2表达的影响，探讨川芎嗪对以小鼠的干预作用和干预机制。方法以新生小鼠84只随机分为实验组和对照组，每组42只。实验组小鼠从出生时腹腔注射盐酸川芎嗪80mg／kg，每天2次，至生后35天，对照组同时注射等量生理盐水。分别在用药后0、3、7、14、21、28、35天取眼球，立即经10％中性甲醛固定，常规病理切片。另取眼球经2．5％戊二醛溶液固定，电镜观察。用TUNEL方法检测视网膜外核层细胞的凋亡，用免疫组化方法测定Bcl-2在视网膜的表达。结果病理结果显示，经盐酸川芎嗪治疗后14、21、28、35天rd小鼠外核层细胞层数与未用药对照组比较，明显增加（P〈0．01）。电镜结果显示，川芎嗪可减缓以小鼠外核层细胞和视网膜光感受器细胞外段盘膜部位线粒体的病变，减少盘膜和外界膜的破坏。rd小鼠经盐酸川芎嗪药物治疗后第7、14、21、28、35天外核层细胞的凋亡率明显低于未用药对照组（P〈0．01）；第3、7、14、21、28、35天Bcl-2在视网膜外核层及光感受器细胞外段的表达明显增强（P〈0．05或0.01）。结论盐酸川芎嗪可延缓以小鼠视网膜外核层细胞的减少，其作用机制可能是通过上调视网膜外核层及光感受器细胞外段Bcl-2的表达延缓rd小鼠视网膜光感受器细胞的凋亡。     

ACUPUNCTURE AND GLAUCOMA

Glaucomaisthecommondisorderresultinginblindnessinclinic.Itisestimatedthatof67millionpatients6.7millionpatientssufferfromblindnessfinallyintheworld.AccordingtoHu scalculationandinvestigationof glaucomagroupinChinain1989thatofthegroupagedover40years,9.6mill…     

眼弓形虫病的PVER、OCT和中心视野改变

目的 探讨活动性眼弓形虫病(Ocular Toxoplasmosis,OT)的光相干断层成像、图形视诱发反应和中心视野改变。方法除临床检查、眼底彩色照像、眼底荧光造影(FFA)和脉络膜血管造影(ICG)外,21例33只活动性OT患者均行光相干断层成像(Optical Coherence Tonography,OCT)、图形视诱发反应(Pattern Visual Evoked Response,PVER)检测和自动中心视野分析。结果 本研究中21例患者33只眼的OCT检测结果显示黄斑区视网膜水肿增厚及黄斑顳侧脉络膜新生血管形成。自动视野检测分析,呈现中心部分视野光敏度显著下降。图形视诱发反应显示峰幅值显著降低。结论 活动性眼弓形虫感染的OCT、PVER和自动中心视野检测均呈现明显异常。这些异常类似干中心性渗出性视网膜脉络膜炎之改变。     

视神经挫伤后的眼底血管造影

目的：用荧光素眼底血管造影（Fundus fluorescein angiography,FFA)和吲哚青绿血管造影（Indocyanine green angiography,IGGA)探讨视神经挫伤后，视神经及周围视网膜，脉络膜的循环改变。方法：对30例（30只眼）不同程度的眼球挫伤致视神经损伤的患者进行FFA与ICGA同步检查，并对它们的图像进行分析（本组除外脉络膜破裂）。结果：除1例视盘及周围视网膜，脉络膜荧光大致正常外，其余29例均出现了异常的荧光表现。FFA主要表现为：在造影早期视盘呈象限性或全视盘性的荧光充盈不良，后期荧光素渗漏或始终不能充盈，ICGA主要表现为：在FFA显示的视盘象限性弱荧光区的相邻区域脉络膜充盈时间明显延迟；FFA显示的全视盘性的弱荧光，盘周的脉络膜充盈时间明显延长，在局限性脉络膜灌注不良的对应区均出现了视网膜色素上皮（Retinal pigment epithelium,RPE)的损害，而盘周脉络膜灌注不良的区域，有9例相应区视网膜并未出现RPE的损害；有2例合并视网膜分支动脉阻塞；有19例视盘缺血的部分正是“分水区”的位置，占63.3%，本组病例中有80%视力在0.1以下。结论：眼球挫伤不仅可使视神经损伤，其周围的视网膜，脉络膜均可受到损害，应尽早施行FFA与ICGA检查，它可以详细观察，正确判断视神经挫伤后的视盘缺血情况及周围视网膜，脉络膜损害的范围和程度，及时正确地指导治疗。     

荧光定量聚合酶链反应法检测光感受器细胞凋亡大鼠视网膜中半胱氨酸蛋白酶3 mRNA的表达

目的:检测半胱氨酸蛋白酶3mRNA在光感受器凋亡大鼠视网膜中的表达,探讨其在光感受器细胞凋亡的发生、发展中的意义。方法:实验于2004-03/12在中山眼科中心眼科学教育部重点实验室完成。选择雌性SD大鼠36只,随机数字表法分为正常对照组6只,N-甲基-N-亚硝脲组30只,后者又分为造模后12h,1,2,3,5d5个时相点,每个时相点6只。正常对照组大鼠经腹腔注射生理盐水;N-甲基-N-亚硝脲组大鼠按体质量一次性腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲40mg/kg,分别于造模后12h,1,2,3,5d处死动物,摘除右眼球,立即分离视网膜,提取总RNA,用荧光定量聚合酶链反应法检测视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA的含量。结果:纳入动物36只,均进入结果分析。正常对照组、N-甲基-N-亚硝脲组造模后12h,1,2,3,5d5个时相点视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量分别为1.52×105,18.35×105,25.14×105,29.25×105,13.72×105,12.24×105。N-甲基-N-亚硝脲腹腔注射后12h视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达量上升,第2天时最高,达正常对照组表达量的19倍,此后渐下降,第5天表达量仍为正常对照组的8倍。结论:视网膜中半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达与光感受器细胞的存亡有关,可作为光感受器细胞凋亡发生、发展的预测指标之一。