正视克隆 尊重生命

最近以来遗传工程学技术突飞猛进。一些科学家正在制造第一个克隆人。克隆人技术给人类带来了利弊。我们应以理性的态度来正视这场关于克隆人的伦理和道德讨论。     

过氧化氢对K562细胞凋亡的影响

目的：探讨活性氧对K562细胞凋亡的影响。方法：用过氧化氢(hydrogen peroxide，H2O2)作用于对数生长期的K562细胞。结果：Hoechst 33258染色法观察到K562细胞明显凋亡；caspase活性定量测定及Western Blotting检测显示caspase-3，-8，-9同时被激活。结论：H2O2可诱导K562细胞凋亡，且通过同时激活线粒体途径和死亡受体途径起作用。     

基于案例和问题的交互式病理生理学教学模式的效果评价

目的　评价病理生理学课堂教学应用“基于案例和问题的交互式教学”的效果,为促进学生从被动学习到主动学习,以及培养临床思维提供新思路。方法　在中南大学湘雅医学院2015级临床医学五年制和其他非临床专业的病理生理学教学中采用“基于案例和问题的交互式教学”,以460名医学生为调查对象,采取无记名问卷调查对基于案例和问题的交互式教学的效果进行评价,主要了解学生对该教学的认可程度。运用Excel收集、处理数据,描述性分析计算各指标百分率。结果　共发放问卷460份,回收有效问卷453份,获得如下评价结果：①针对该教学实施的课前导学,402人（88.7%）认为课前导学促使相关教学内容的预习;375人（82.8%）认为课前导学可以提高课堂讨论质量;347人（76.6%）认为课前导学扩大思考探索空间,而课前导学并不会增加学生的学习负担（306人,67.6%）。②学生认为“基于案例和问题的交互式教学”与传统教学相比具有以下优势：有利于培养学生的临床思维能力（414人,91.4%）;增强知识的理解记忆（400人,88.3%）;吸引学生课堂注意力（380人,83.9%）;激发学生参与讨论的兴趣（327人,72.2%）。③379名学生（83.4%）更喜欢这种教学方式,认为可以提高分析解决问题的能力（325人,71.7%）,培养临床思维能力（321人,70.9%）,提高自学能力（247人,54.5%）和综合归纳能力（197人,43.5%）。结论　在病理生理学课堂教学中采用“基于案例和问题的交互式教学”,可提高学生自主学习能力,活跃课堂气氛,提高教学质量,能有效培养学生的临床思维能力,在基础医学的课堂教学中值得推广和应用。     

KLF4过表达对热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡的影响

目的:探讨Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)对热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡的影响.方法:构建pcDNA3.1-KLF4真核表达质粒,采用脂质体转染法建立KLF4过表达Raw264.7巨噬细胞株,用免疫印迹法检测KLF4的过表达,采用热应激(42 ℃)处理稳定表达小鼠KLF4基因的Raw264.7巨噬细胞1 h,37 ℃恢复12 h,采用流式细胞术、Hoechest33258染色及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:获得了KLF4过表达的Raw264.7细胞株,流式细胞术结果显示,转空载体组和KLF4过表达组细胞凋亡百分率较热应激前均升高,但与转空载体组相比较KLF4过表达组升高更明显;荧光染色可见细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学改变;KLF4过表达细胞琼脂糖凝胶电泳能检测到明显的DNA"梯状条带".结论:KLF4可以促进热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡.     

从热休克因子1基因敲除小鼠心肌组织中筛选应激反应中受热休克因子1调控的靶基因

采用cDNA芯片（上海博星公司，含15000个基因）分析了热休克因子1（HSF）基因敲除小鼠经热休克反应（42℃ 15min，恢复3h)后心肌组织中基因表达谱的改变，结果共筛选到差异表达基因1142个，其中在HSF^-／-小鼠心肌中表达下调的基因为501个，已命名基因为173个；在HSF^-/-小鼠心肌中表达上调的基因为641个，已命名基因为235个。对基因启动子区转录因子结合位点的分析发现，在HSF^-/-小鼠心肌中表达下调2．5倍的基因中，有Klf4和Sdrfl等5个基因启动子区含有完整的热休克元件（heat shock element,HSE);在HSF^-/-小鼠心肌中表达上调2．5倍的基因中，有Neul、Fgl2等6个基因启动子区含有完整的热休克元件，上述结果表明热休克因子1直接调控了这些基因的表达。本研究还采用生物信息学技术成功克隆了人XLHSRF1基因（GenBank ID:AY221994)及其大鼠同源基因。本实验在国际上首次从热休克因子1基因敲除小鼠心肌组织中筛选到应激反应中受热休克因子1调控的多个靶基因，为从基因水平进一步揭示热休克因子1在调节应激反应中的作用提供了新的信息。     

短暂缺血再灌注对大鼠心肌Krppel样因子4表达的影响

目的 观察大鼠业主肌暂缺血再灌注及相应的细胞氧化应激反应对kǔppel样因子4表达的影响.方法 采用短时间结扎及松解左冠状动脉前降支法构建大鼠心肌短暂缺血再灌注动物模型;采用过氧化氢(1mmol/L)处理C2C12肌原细胞法复制相应的氧化应激细胞模型;采用逆转录聚合酶链反应检测kǔppel样因子4 mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法检测Krüppel样因子4蛋白的表达.结果 短暂缺血再灌注后,大鼠心肌组织中Krüppel样因子4 mRNA的水平明显增加;过氧化氢处理C2C12肌原细胞后,Krüppel样因子4 mRNA和蛋白的水平均明显增加.结论 大鼠心肌短暂缺血再灌注及相应的细胞氧化应激反应均能显著诱导Krǔppel样因子4的高表达.     

过氧化氢通过线粒体通路和死亡受体通路诱导心肌细胞凋亡

为探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡的分子机制，采用0．5mmol／L过氧化氢作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞。末端标记发现过氧化氢明显诱导心肌细胞凋亡；Caspase活性定量检测及Western-blot发现Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9同时被激活；而Western-blot及间接免疫荧光发现细胞色素C从线粒体释放入胞浆。以上结果提示，氧化应激通过同时激活线粒体通路与死亡受体通路导致心肌细胞凋亡，从而为临床防治与细胞凋亡相关的心血管疾病提供了新的信息。     

用cDNA芯片检测大鼠心肌缺血预适应后基因表达谱的改变

为了检测缺血预适应后大鼠心肌基因表达谱的改变，采用cDNA芯片方法对缺血预适应后大鼠心肌基因谱的改变进行检测。结果发现，缺血预适应大鼠心肌中差异表达基因共75项，其中表达上调基因48项，表达下调基因27项。采用逆转录—聚合酶链反应进一步验证了cDNA芯片结果的可靠性，并初步分析了基因表达谱改变在缺血预适应诱导的心肌内源性保护作用中有一定意义。以上研究有助于从基因水平阐明缺血预适应诱导的心肌保护的分子机制，为临床防治缺血／再灌注损伤及缺血性心脏疾病提供新的思路。     

从凋亡信号通路探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的机制

为探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的分子机制，采用热休克对原代培养的新生大鼠心肌细胞进行预处理，以诱导热休克蛋白的表达，观察热休克蛋白对过氧化氢所致心肌细胞凋亡的保护作用。结果发现，热休克预处理导致心肌细胞热休克蛋白70及αB-晶状体蛋白表达明显增加，同时显著抑制过氧化氢所致细胞色素C从线粒体释放，抑制Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3活化及随后的心肌细胞凋亡。以上结果提示，热休克蛋白通过抑制线粒体信号通路与死亡受体通路的活化保护过氧化氢导致的心肌细胞凋亡，为临床防治心血管疾病提供了新的信息。