栀子抑制小鼠S180和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的 探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用.方法 分别采用荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)-1,qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的增重(P＜0.01),抑瘤率分别为44.8%和61.0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52.6%.结论 栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

葛根素拮抗胰岛素抵抗-高血压大鼠肿瘤坏死因子-α及肾素-血管紧张素的作用

目的研究葛根素对胰岛素抵抗-高血压大鼠(IRH)的肿瘤坏死因子-α及肾素-血管紧张素的影响。方法用喂饲高糖高盐高脂的方法建立胰岛素抵抗-高血压(IRH)病理模型,随机分为模型卡托普利(Cap)组、葛根素注射液(Pue)高、中、低三个剂量组、模型阴性对照组,分别给药后,测定血浆胰岛素(Fins)、空腹血糖、肾素、血管紧张II(Ang-II)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量及给药前后的血压变化。结果Cap和Pue80mg·kg-1及40mg·kg-1组均能明显降低IRH大鼠的肾素、Ang-II的含量及血压(P<0.05～0.01)。Pue20mg·kg-1组对上述各指标,则差异均未见显著性(P>0.05)。Cap和Pue80mg·kg-1组,能降低Fins及TNF-α含量(P<0.05～0.01),改善IRH大鼠的高胰岛素血症;提高低下的ISI,差异有高度显著性(P<0.01);而其余两个剂量组,则差异均未见显著性(P>0.05)。结论Pue可以有效增强胰岛素的敏感性,降低胰岛素抵抗-高血压大鼠的肾素—血管紧张素的含量,降低高血压。     

小活络丸的免疫抑制、抗氧化及抗炎镇痛作用

背景：小活络丸具有祛风除湿、活络通痹等功效，用于治疗风寒湿痹、肢体疼痛，麻木拘挛等症。目的：观察小活络丸对小鼠再次免疫应答、特异性免疫（包括细胞免疫和体液免疫）、非特异性免疫（包括补体C3、单核-巨噬细胞系统和红细胞黏附功能）和自由基损伤，以及对疼痛及多种炎症模型的药理作用。设计：随机对照，分层实验。单位：广州市中医中药研究所和广州市中医医院药剂科。材料：选用NIH小鼠和ICR小鼠共628只，鼠龄6～8周。小活络丸（成分：胆南星、制川乌、制草乌、地龙、乳香（制）等；广州陈李济药厂生产，生产批号：19980612）。兔抗小鼠IgG和补体C，抗血清试剂盒，由广州市医药卫生研究所药物室提供；超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量测定试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。方法：实验于1998-09／1999—12在广州市中医中药研究所药理研究室和广州市医药卫生研究所药物研究室动物室完成。①观察小活络丸抑制鸡红细胞诱导小鼠再次免疫应答作用：取ICR小鼠84只，雌雄各半，取出20只作为空白对照组；其余均腹腔注射环磷酰胺0.2g/k，1次／d，1d。第4和12天，共2次腹膜内注射鸡红细胞诱导免疫增强病理模型探讨再次免疫应答。空白对照组（20只）腹腔注射等量生理盐水；动物于加强免疫后．按随机抽签法分为3组：环磷酰胺组20只（灌胃环磷酰胺40mg/kg），小活络丸组21只（灌胃小活络丸混悬液5．54g/kg），模型组20只（灌胃等量蒸馏水）；均1次／d，连续灌胃给药7d。19d后分别按单向免疫扩散法测定血清IgG，补体C3含量，采用聚乙二醇沉淀法测定循环免疫复合物含量变化：②观察小活络丸抑制小鼠迟发型超敏反应作用：取ICR小鼠54只，雌雄各半。第1天皮下注射10g/L2,4-二硝基氟苯50μL／只致敏，第4天，将处理后动物按随机抽签法分为3组：泼尼松组（灌胃泼尼松0．01g/kg），小活络丸组（灌胃小活络丸混悬液5．54g/kg），模型组（灌胃等量蒸馏水），每组18只。均1次／d，连续灌胃给药7d。11d后各组小鼠均涂10异／L2，4-二硝基氟苯25μL／右耳，24h后计算肿胀度（右、左耳质量差值）。③观察小活络丸抑制小鼠红细胞免疫黏附功能：取NIH小鼠36只，雌雄各半，按随机抽签法分为3组：环磷酰胺组（灌胃环磷酰胺20mg／kg），小活络丸组（灌胃小活络丸5．54g/kg），空白对照组（灌胃等量蒸馏水），每组12只。均1次／d．连续灌胃给药7d。7d后取小鼠眼眶血，计算红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率。④观察小活络丸抑制小鼠碳粒廓清作用：取ICR小鼠33只，雌雄不拘，将其按随机抽签法分为3组：泼尼松组（灌胃泼尼松20mg/k），小活络丸组（灌胃小活络丸混悬液5．54异／kg），空白对照组（灌胃等量蒸馏水）；均1次／d，连续灌胃7d。于给药第7天末次给药后2h，进行碳粒廓清试验，计算廓清指数K（K值=（LogA1-LogA2）／（T2-T1），式中A1和A2分别表示2和10min所取血样的吸光度，正和疋表示给碳粒后5和10min取血时间；以K值高低，评价碳粒廓清作用。⑤观察小活络丸对鸡红细胞免疫小鼠溶血素．C3和丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性的影响：取ICR小鼠80只，雌雄各半，取20只小鼠作为空白对照组，其余均腹腔注射2&;#215;10^8-鸡红细胞15mL／kg作免疫诱导，空白对照组均以等量生理盐水代替鸡红细胞，灌胃蒸馏水，1次／d，连续灌胃7d。按随机抽签法将免疫处理的动物分为3组：免疫对照组（灌胃给予蒸馏水），环磷酰胺组（灌胃环磷酰胺20mg／kg），小活络丸组（灌胃小活络丸混悬液5．54g／kg）；均1次／d．连续灌胃7d；于第7天末次给药后2h，计算IgM型溶血素半数溶血值[（样品吸收度／鸡红细胞半数溶血时的吸收度）&;#215;稀释倍数1。按相应试剂盒操作说明书方法测定血清C3含量及丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。⑥观察小活络丸抑制小鼠琼脂肉芽组织增生作用：取NIH小鼠59只，皮下注射20g／L琼脂0．5mL／只，24h后，按随机抽签法分为3组：双氯芬酸组（灌胃双氯芬酸10mg/kg），小活络丸组（灌胃给予小活络丸混悬液5．54g／kg）．模型组（灌胃等量蒸馏水）；均1次／d，连续灌胃给药7d；第8天处死小鼠，以每千克体质量琼脂肉芽克数表示抑制增生作用。⑦观察小活络丸抑制小鼠醋酸性扭体反应作用：取NIH小鼠63只，按随机抽签法分为3组：双氯芬酸组（灌胃双氯芬酸50mg／k），小活络丸组（灌胃小活络丸混悬液5．54g／k），模型组（灌胃等量蒸馏水）；均1次／d，连续灌胃给药2d。末次给药后2h，腹腔注射0．1mol／L醋酸0．2mL／只，计数20min内小鼠的扭体次数。⑧观察小活络丸对二甲苯、巴豆油和角叉菜胶诱发急性渗出性炎症及炎症渗出液中前列腺素E含量的影响：取NIH小鼠219只，双氯芬酸组（灌胃双氯芬酸50mg／k），小活络丸组（灌胃小活络丸混悬液5．54g/kg），模型组（灌胃等量蒸馏水）；均1次／d，共2d。末次给药后2h．①涂二甲苯25μL／右耳，20min后；②涂巴豆油25μL／右耳，4h后；计算耳肿胀度（右耳片重-左耳片重）。②用10g／L角叉菜胶20μL／右足皮内注射致炎，3h后，计算肿胀度（右足和左足间重量差值）；并测致炎足渗出液中前列腺素E含量。组间计量资料差异比较采用t（方差不齐用t’）检验。主要观察指标：小活络丸对小鼠再次免疫应答．特异性免疫．非特异性免疫和自由基损伤，以及对疼痛及多种炎症模型的药理作用一结果：NIH小鼠和ICR小鼠628只均进入结果分析。④模型组小鼠IgG．循环免疫复合物含量明显高于其他3组（P〈0．01），C3含量明显低于其他3组（P〈0．05～0．01）：②泼尼松组和小活络丸组小鼠耳肿胀度明显低于空白对照组（P〈0．01）：③空白对照组红细胞C3b受体花环率明显高于其他2组（P〈0．01），红细胞免疫复合物花环率明显低于其他2组（P〈0．01）。④泼尼松组和小活络丸组吞噬指数（K值）明显低于空白对照组（P〈0．01）。⑤环磷酰胺组和小活络丸组IgM型溶血素半数溶血值和血清丙二醛含量明显低于免疫对照组（P〈0．01），C3含量明显高于免疫对照组（P〈0．01），血清超氧化物歧化酶活力与免疫对照组比较，差异不明显（P〉0．05）：⑥双氯芬酸组和小活络丸组小鼠琼脂肉芽组织质量与体质量比值明显低于模型组（P〈0．01）。⑦双氯芬酸组和小活络丸组小鼠20min内扭体次数明显少于模型组（P〈0．01，0．05）。⑧双氯芬酸组二甲苯炎症模型和巴豆油炎症模型耳肿胀度、角叉菜胶急性炎症模型足肿胀度、炎症渗出液中前列腺索E含量明显小于或低于模型组（P〈0．05～0．01），小活络丸组炎症渗出液中前列腺素E含量明显低于模型组（P〈0．01）：结论．小活络丸既有免疫抑制的药理作用，又有抗增殖性炎症、镇痛、抗氧化药效学效应。     

补阳还五汤治疗大鼠佐剂性关节炎作用

目的探讨补阳还五汤对佐剂性关节炎（从）大鼠动物模型治疗作用的影响。方法给关节炎大鼠注射Freud＇s完全佐剂诱导13d后,当其右足趾出现肿胀而发生继发性免疫炎症反应时．将大鼠随机分成三组：阴性对照组．阳性对照尼美舒利加药组及试药组补阳还五汤（方剂组成：黄芪、赤芍、桃仁、红花、地龙及当归和川芎蒸馏所得挥发油的渗滤液）。所有大鼠在出现炎症性足29d后,均经胃每天给予蒸馏水或药物,共诱导15d;测量肿胀足跖的厚度以及病鼠血清中的白介素1（IL-1）,循环免疫复合物（CIC）,丙二醛（MDA）含量并检测超氧化物岐化酶（SDD）的活性。结果与模型组相比,补阳还五汤能抑制大鼠足肿胀的程度（P〈0．05）,同时降低免疫调节因子IL-1,CIC,MDA的含量（P〈0．05）,相反地,原本低下的SOD活性显著提高（P〈0．01）。因此,补阳还五汤和尼美舒利在抗关节炎的作用上有相关性。结论Freud＇s完全佐剂能诱导AA大鼠发生迟发性超敏反应的免疫病理损伤,补阳还五汤和尼美舒利对从大鼠的炎症具有抑制作用,两者都能调节大鼠的自身免疫情况并能减少与其调节免疫自由基损伤。     

荔枝核提取物抑制乳腺增生模型大鼠乳腺组织ER和PR表达及促进乳腺细胞凋亡作用研究

目的:研究荔枝核提取物抑制乳腺增生(HMG)模型大鼠乳腺组织雌二醇受体(ER)和孕酮受体(PR)表达及促进乳腺细胞凋亡的作用。方法:肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg·kg-1连续25d后,改肌肉注射黄体酮4mg·kg-1连续5d,复制大鼠HMG模型。取健康、未孕雌性SD大鼠60只,均分为6组,即正常(蒸馏水)、模型(蒸馏水)、乳结平(3.3g·kg-1)及荔枝核提取物高、中、低剂量(44、22、11g·kg-1)组,ig给药,每天1次,连续给药30d。通过免疫组化方法观察大鼠乳腺组织中ER和PR的表达情况,流式细胞仪检测乳腺组织细胞凋亡情况,并计算子宫指数。结果:高、中剂量荔枝核提取物能显著抑制HMG模型大鼠乳腺中ER和PR表达(P<0.01或P<0.05),显著促进乳腺细胞凋亡(P<0.01或P<0.05)。HMG大鼠乳头红肿及增生明显,子宫指数显著增加(P<0.01),而各给药组能不同程度地逆转上述病理性改变(P<0.05或0.01)。结论:荔枝核提取物能抑制HMG模型大鼠乳腺组织ER和PR表达,并促进乳腺细胞凋亡,改善HMG及子宫的病理变化,从而有效地对抗雌激素性大鼠HMG。     

健肝灵胶囊对小鼠免疫性肝炎的影响

目的研究健肝灵胶囊对小鼠免疫性肝损伤的影响.方法小鼠iv卡介苗(BCG)5×106个菌/只,10d后再iv脂多糖(LPS)7.5 μg/只,造成免疫性肝炎模型.结果健肝灵胶囊能明显降低免疫性肝炎模型小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT),并能显著减轻肝炎小鼠的肝指数和脾指数.结论健肝灵胶囊对小鼠免疫性肝损伤有保护作用.     

葛根素对代谢综合征-高血压大鼠胰岛素抵抗、高血压的干预作用及机制研究

目的观察葛根素（puerarin,Pue）对代谢综合征（MetS）-高血压大鼠胰岛素敏感性、血压、肾素-血管紧张素系统以及糖脂代谢的作用。方法：SD大鼠,♀♂各半,除空白对照组食用标准饲料外,其余动物随机喂饲富含高盐（8%）、高脂肪（25%）和高蔗糖（10%）饲料,连续8周;当造模动物出现高血压、糖耐量减退,即建成MetS-高血压病理模型;然后将大鼠随机分为模型对照、模型咪达普利（imidapril,Imid）7mg·kg-1和Pue300,150,75mg·kg-1三个剂量组;分别灌胃给药或蒸馏水,qd×4周后,测定大鼠血压、空腹血糖（FBG）和口服糖耐量试验2小时血糖（OGTT-2hBG）及血浆胰岛素（Fins）、血糖（FPG）,并计算胰岛素敏感性（ISI）以及血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、内皮素、肾素和血管紧张索含量。结果：与正常对照组比较,MetS大鼠血压升高、FBG和OGTF-2hBG,FPG和Fins含量增高,ISI减弱,血清TGTC,TNF-Ⅱ和肾素、血管紧张素含量增高（P〈0．05或P〈0．01）。经Pue3（Ihng·kg。或Imid处理MetS大鼠后,血压降低（尸〈0．01）,FPGFBGOGTr．2hBG降低和IGT改善（P〈0．05或P〈0．01）,纠正高胰岛素血症（尸〈O．05或P〈0．01）,增强ISI（P〈O．01）,降低TG和TC含量（P〈0．05或P〈0．01）,下调内皮素、肾素、血管紧张素和TNF—a含量（P〈O05或P〈0．01）,上述观察资料,差异均有显著性;而Pue150mg·kg^-1组,对Fins、TNF—α含量和ISI作用,差异则未见显著性（P〉0．05）;Pue75mg·kg^-1组对上述各指标,差异均未见显著性（P〉0．05）。结论：Pue或Imid对MetS大鼠,能对抗胰岛素抵抗、增强胰岛素敏感性、纠正高胰岛素血症,降低血糖和血脂,拮抗内皮素、肾素．血管紧张素系统,降低血压。葛根素以上效应呈量效关系。     

葛根降低D-gal诱导大鼠血糖和改善糖耐量减退的作用

目的:研究葛根、二甲双胍及水飞蓟宾对D-半乳糖诱导大鼠糖耐量减退(IGT)的影响.方法:腹腔注射D-半乳糖150mg/kg,每天1次,连续56d,诱导胰岛素抵抗(IR)的IGT大鼠模型;观察口服葛根、二甲双胍和水飞蓟宾对病鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)后2h血糖含量的效应.结果:二甲双胍组和水飞蓟宾组与模型组比较,空腹血糖均未见明显影响,差异未见显著性(P＞0.05);而葛根组与模型组的空腹血糖差异有显著性(P＜0.05).OGTT后2h血糖,模型组明显高于空白对照组(P＜0.01),说明D-半乳糖致大鼠IGT模型成立.葛根组、二甲双胍组和水飞蓟宾组均能抑制OGTT后2h血糖的升高,差异有显著性(P＜0.01),说明各药均能改善D-半乳糖致IR模型大鼠的IGT.结论:D-半乳糖可诱导以IGT为表现的IR,葛根与二甲双胍和水飞蓟宾均能改善D-半乳糖诱导IR大鼠的糖耐量.     

葛根芩连汤拮抗D-半乳糖诱导大鼠糖耐量减退作用

目的研究葛根芩连汤(gegenqinlian decoction,GGQLD)、二甲双胍(metformin,met)和水飞蓟宾(silibinin,sil)对D-半乳糖(D-galactose,G-gal)诱导大鼠糖耐量减退(impaired glucose tolerance,IGT)的影响.方法以ip D-gal 150 mg·kg-1,qd×56d诱导胰岛素抵抗(insulin resistance,IR),IGT大鼠模型,测其空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)和口服葡萄糖耐量试验(o-ral glucose tolerance test,OGTT)后2小时血糖(2-hours blood glucose,2hBG)含量;并观察GGQL3个剂量、met和sil对病鼠FBG及OGTT后2hBG的效应.结果正常对照组、GGQL3个剂量、met和sil与模型组比较,FBG均未见明显影响,差异未见显著性(P＞0.05);而OGTT后2hBG,模型组明显高于正常对照组(P＜0.01),说明D-gal至大鼠IGT模型成立;GGQL3个剂量、met和sil均能抑制OGTT后2hBG的升高,差异均有高度显著性(P＜0.01),FBG与OGTT后2hBG间差值降低,差异均有高度显著性(P＜0.01),说明各药均能改善D-gal致IR模型大鼠的IGT.结论D-gal可诱导以IGT为表现的IR,其机制可能与D-gal诱导蛋白非酶糖基化-氧化应激-自由基损伤作用和直接干扰糖脂代谢有关;葛根芩连汤与met和sil一样,能改善D-gal诱导IR大鼠的糖耐量.     

荔枝核颗粒对小鼠EAC、S_(180)及肝癌组织的抑瘤作用的实验研究

目的采用小鼠腋下接种瘤株的方法,建立EAC、S180及肝癌荷瘤小鼠动物模型;并研究荔枝核颗粒对此动物模型实体瘤生长的影响作用。方法小鼠EAC、S180细胞与肝癌细胞混悬液用生理盐水按1:1进行稀释制成含瘤腹水混悬液,在给药前24h,每只小鼠腋窝皮下接种0.2ml/只。整个操作应在无菌条件下60min内完成。荔枝核颗粒对小鼠EAC、S180、肝癌的抑瘤实验连续给药10d。结果荔枝核颗粒能够明显抑制EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤的生长(P<0.01);结论荔枝核具有抑制小鼠EAC、S180、肝癌的作用;