羊脾转移因子含化片治疗慢性咽炎25例

羊脾转移因子含化片治疗慢性咽炎２５例校医院周淑华山东省医学科学院韩玉美，肖东杰我们应用羊脾转移因子（ＯＳＳ－ＴＦ）含化片治疗慢性咽炎２５例，其中男６例、女１９例，５～６８岁，病程１～１８年，曾用其他药物治疗效果不明显。临床表现：咽部异物感１８例、咽干...     

siRNA靶向抑制CPB2基因对乳腺癌细胞TAFI表达及生长和转移的影响

目的探讨靶向羧肽酶B2(CPB2)基因的小干扰RNA(siRNA)对乳腺癌MDA-MB-231细胞凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)表达以及对乳腺癌细胞的生长和转移的影响。方法将细胞分为siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组、阴性对照组和空白对照组5组,设计并化学合成编码TAFI基因(CPB2)的特异性siRNA,用脂质体2000转染至MDA-MB-231细胞中,采用Western blot、RT-PCR分别检测各组TAFI蛋白及mRNA的表达,Transwell侵袭实验检测癌细胞转移侵袭能力,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞存活和生长情况。结果 siRNA抑制CPB2表达后,TAFI蛋白及其mRNA表达水平显著下降,siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组与阴性对照组比较细胞侵袭力和细胞生长都明显受到抑制(P<0.05)。结论靶向CPB2的siRNA可有效下调乳腺癌细胞MDA-MB-231中TAFI蛋白及其mRNA表达水平,降低肿瘤细胞的侵袭力,抑制细胞的生长和转移。     

小剂量阿司匹林、咪唑对SMAO休克家兔作用比较

已有不少文献报道前列腺素(PGs)在失血性及内毒素性休克发病机制中起着重要作用。但有关其在肠系膜上动脉阻塞(SMAO)性休克中的作用报导不多。本实验通过予先分别注射小剂量aspirin(环氧化酶抑制剂)、咪唑(imidazole, TXA_2合成抑制剂)观察一系列指标,以进一步探讨PG、TX在SMAO休克中的作用以及aspirin、imidazole影响上述休克过程的机制。     

多药耐药性逆转的研究进展

肿瘤细胞多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)是造成化疗失败的重要原因 ,寻找ＭＤＲ逆转剂成为现今肿瘤耐药研究的热门课题。ＭＤＲ逆转剂是指能全部或部分恢复耐药的肿瘤细胞对化疗药物敏感性的一类物质。利用体外培养的ＭＤＲ细胞株已经筛选出了许多种逆转剂 ,它们的作用机制和活性各有不同 ,可作用于能导致ＭＤＲ的不同环节 ,包括ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白水平。现将近年来对不同种类的逆转剂及其逆转机制的研究进展综述如下。1　钙离子通道阻滞剂钙离子通道阻滞剂是最早发现具有逆转ＭＤＲ作用的药物 ,主要有维拉…     

大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Hedgehog信号分子的表达

背景:Hedgehog信号通路是一个在胚胎阶段调控多种组织器官发育的重要信号通路,在成骨发育方面具有重要的作用.但Hedgehog信号分子在大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为成骨细胞过程中的作用尚未清楚.目的:体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化,检测Hedgehog信号分子在成骨诱导分化过程中的变化.方法:从大鼠骨髓中分离得到骨髓间充质干细胞,进行地塞米松成骨诱导,通过免疫组化方法鉴定成骨的情况,Western Blot方法检测 Hedgehog信号分子SHH和IHH在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达.结果与结论:成功分离得到骨髓间充质干细胞,地塞米松诱导培养7,14,21 d 后,Ⅰ型胶原的表达量逐渐增加;在诱导成骨分化过程中,SHH蛋白表达升高,诱导组的表达明显高于未诱导组的表达(P < 0.05),而IHH蛋白的表达降低,诱导组的表达明显低于未诱导组的表达(P < 0.05).结果提示,Hedgehog信号分子参与地塞米松诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的过程,且SHH和IHH在间充质干细胞诱导成骨过程中的作用有差异.     

甲胎蛋白特异性小干扰RNA重组腺病毒载体的构建

背景:RNA干扰技术的应用,关键在于能够采用1个有效的基因转移系统将小干扰RNA转入至靶细胞,目前广泛应用的是构建小干扰RNA表达载体.目的:利用AdMax腺病毒载体系统构建表达人甲胎蛋白-小干扰RNA的腺病毒载体.设计、时间及地点:开放性实验,于2007-03/10在山东大学附属济南市中心医院中心实验室完成.材料:穿梭质粒pDC316-EGFP-U6为本元正阳基因技术公司产品;AdMax KitD试剂盒与低代数HEK293细胞为Microbix Biosystems Inc.(Canada)公司产品.方法:选择针对甲胎蛋白 mRNA的特异性小干扰RNA靶序列,设计合成为相应的双链DNA,并将其与酶切线性化的pDC316-EGFP-U6载体片段连接,构建好的穿梭质粒pDC316-EGFP-U6-AFP-siRNA和腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒.主要观察指标:对重组腺病毒进行聚合酶链反应鉴定及扩增、纯化、滴度测定.结果:构建的穿梭质粒载体经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实与设计一致.重组腺病毒Ad-AFP-siRNA经聚合酶链反应和绿色荧光蛋白表达检测证实构建成功,测定滴度为1.4×109 nfu/L.结论:实验成功构建了Ad-EGFP-U6-AFP-siRNA重组腺病毒.     

B细胞被动凋亡的研究进展

<正>细胞凋亡(Apoptosis)或程序化死亡(Programmed Cell Death,PCD)是一个具有时间性和空间性的自主的生理性细胞死亡过程,是维持机体自身稳定的重要的负调节机制,近年来对T细胞和B     

系统性红斑狼疮患者T、B、NK细胞的变化及临床意义

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者存在免疫功能紊乱,其中淋巴细胞亚群异常在SLE病因及发病中具有重要的意义.我们利用双色荧光标记流式细胞术,探讨SLE患者在疾病的不同阶段外周血白细胞分化抗原CD3 、CD3 CD4 、CD3 CD8 、CD19 、自然杀伤细胞(NK)的变化,为阐述SLE患者存在的免疫功能紊乱、揭示SLE的发病机制提供实验依据.     

间接免疫荧光法与免疫印迹法检测抗核抗体结果不一致分析

<正>检测抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)是以HEp-2细胞结合大鼠肝脏组织为基质检测ANA的间接免疫荧光法(IIF)。基质包含大约100~150种自身抗原。ANA-IIF操作简单、敏感度高、特异性好,且结果易于判断等。美国风湿病学会(ACR)在2009年声明中建议将间接免疫荧     

α5-烟碱型乙酰胆碱受体表达下调对肺癌细胞HIF-1α表达的影响

目的 通过下调α5-烟碱型乙酰胆碱受体（α5-nAChR）的表达,体外研究尼古丁促肺癌细胞增殖过程中α5-nAChR对缺氧诱导因子（HIF-1α）表达的影响。方法 以不同浓度尼古丁作用人肺腺癌细胞株A549,分别采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测A549细胞中α5-nAChR、HIF-1α mRNA和蛋白的表达。MTT法、实时荧光定量PCR、Western blotting检测CHRNA5-siRNA转染后,尼古丁促A549细胞增殖的作用和HIF-1α表达的变化。结果 尼古丁浓度为1μmol/L时,α5-nAChR和HIF-1α表达明显升高（P<0.05）,二者表达呈尼古丁浓度依赖性。CHRNA5-siRNA转染显著抑制α5-nAChR、HIF-1α表达（P<0.05）,尼古丁促A549细胞增殖的作用明显受到抑制（P<0.05）。结论 α5-nAchR通过调节HIF-1α的表达,在尼古丁促肺癌细胞增殖中起作用,提示α5-nAChR/HIF-1α信号轴可能是吸烟相关性肺癌发生的重要分子机制之一。