血清CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1联合检测对肺癌诊断的价值

目的:探讨血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)和细胞角蛋白19(CYFRA21-1)联合检测在肺癌诊断方面的价值.方法:采用ELISA法检测52例肺癌患者和88例肺良性疾病患者血清CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1水平.结果:肺癌组血清CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1水平(中位数)分别为3.41、7.97、0.86和1.84 μg/L,高于肺良性疾病组血清CEA、NSE、SCC-Ag和CYFRA21-1的水平2.58μg/L(Wilcoxon W=5452.043,P<0.001)、3.11 μg/L(Wilcoxon W=4572.538,P=0.006)、0.33 μg/L(Wilcoxon W=5408.051,P<0.001)和1.02 μg/L(Wilcoxon W=4642.574,P=0.002).CEA检测肺腺癌、NSE检测肺小细胞癌、SCC-Ag和CYFRA21-1检测肺鳞状细胞癌的灵敏度分别为60.0%、66.7%、72.0%和80.0%.4项肿瘤标志物联合检测诊断肺癌的灵敏度为97.48%.结论:CEA对腺癌、NSE对小细胞肺癌、SCC-Ag和CYFRA21-1对肺鳞癌具有较大的辅助诊断价值,4项联合检测可提高肺癌诊断的灵敏度.     

婴幼儿先天性心脏病术后急性肾功能不全的腹膜透析治疗

目的 总结34例低龄小儿先天性心脏病术后急性肾功能不全患者应用腹膜透析(PD)治疗的资料,评估其在小儿先天性心脏病手术后治疗急性肾功能不全的有效性.方法 收集2002年6月～2008年6月间在我院行先天性心脏病手术后并发急性肾功能不全、年龄8月～6岁[平均年龄(2.6±1.8)岁]的34例患者.应用外科手术置入腹膜透析管,术后4～8 h[平均(4.10±1.71)h]开始进行PD,同时予以其他综合治疗,包括强心利尿、呼吸支持等.结果 PD治疗6h后,血清K+和HCO3-得到纠正,治疗12h后基本正常,与治疗前比较差异有显著性(P<0.05,0.01);BUN、Scr在PD治疗6 h后开始下降,治疗12 h后两者与治疗前比较差异有显著性(P<0.01,0.05);PD治疗6h后尿量开始增多,与治疗前比较差异有显著性(P<0.01).治愈23例(总治愈率67.65%):其中,14例PD6～102h[平均(49.05±22.67)h]后肾功能恢复正常,治愈率35.29%;9例PD10～12 h[平均(8.33±3.06)h]后,因肾功能无改善或进展而改为连续性静脉-静脉血液透析滤过(CVVHDF)治疗后痊愈.死亡11例(总死亡率32.35%):其中,5例死于多器官功能衰竭,4例死于低心排血量综合征,2例死于急性肺水肿.结论 低龄小儿先天性心脏病术后并发急性肾功能不全时,尽早应用PD是一种较为安全、有效的治疗方法,对改善患者预后有积极影响.     

ERO1α启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化相互作用调控ERO1α表达改变介导Hcy致肝脏脂代谢紊乱的分子机制

【目的】 探讨ERO1α DNA甲基化和组蛋白甲基化相互作用调控ERO1α基因表达介导同型半胱氨酸致肝脏脂代谢紊乱的分子机制。 【方法】 建立apoE-/-小鼠HHcy模型,分为对照组、ApoE-/-对照组、HHcy组和干预组。检测肝脏脂质沉积情况、TC、TG及DNMT1含量、ERO1α 及G9a的表达;ntMS-PCR法检测ERO1α DNA甲基化改变;CHIP-qPCR法检测H3K9me2含量;不同Hcy刺激HL-7702肝细胞,验证ERO1α表达及甲基化程度;构建ERO1α和DNMT1的重组表达及沉默载体,检测肝细胞内TC和TG含量变化;AZC及Bix01294干预细胞后,分别检测H3K9me2表达及ERO1α甲基化水平。 【结果】 HHcy组小鼠肝脏脂质面积和血脂水平显著高于对照组,TC、 TG与其血清Hcy水平呈正相关。与对照组相比,各组中ERO1α的表达下降,与HHcy组相比,干预组中ERO1α表达升高,均与蛋白检测结果趋势一致;HHcy组DNMT1及G9a表达显著高于对照组,HHcy组中ERO1α甲基化水平及H3K9me2显著高于对照组。各组中ERO1α的表达逐渐下降,与Hcy呈浓度依赖关系;其中,与100 μmol/L Hcy组比较,叶酸组中ERO1α的表达升高,差异有统计学意义。分别过表达和沉默ERO1α并以Hcy作用后,与对照组相比,ERO1α过表达组TC和TG分别下降48.5%和38.1%,沉默组分别增加39.3%和46.4%。分别过表达和沉默DNMT1,结果显示,与对照组比较,过表达DNMT1后ERO1α甲基化水平增加15.9%,沉默组则下降55.9%,差异均有显著性。AZC抑制DNMT1并以Hcy干预后,抑制剂组与100 μmol/L Hcy组比较,ERO1α DNA甲基化水平降低了51%,H3K9me2水平随之降低;Bix01294干预后,100 μmol/L Hcy+Bix01294组与100 μmol/L Hcy组比较ERO1α启动子区H3K9me2水平降低,ERO1α甲基化水平随之降低。 【结论】 HHcy调控ERO1α启动子区DNA甲基化,和组蛋白甲基化相互作用导致ApoE-/-鼠肝脏脂代谢紊乱。     

维生素E经LOX-1/NADPH氧化酶/ROS通路抑制oxLDL诱导的HUVEC细胞损伤

【目的】 复制氧化性低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein,oxLDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)损伤模型,建立慢病毒介导的LOX-1-shRNA转染HUVEC细胞模型,从LOX-1/NADPH氧化酶/ROS信号通路研究维生素E(Vit E)对oxLDL诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用。 【方法】 以200 μg/mL oxLDL与HUVEC细胞共孵育24 h,用于复制细胞损伤模型;实验设计分为:正常对照组、oxLDL模型组、药物组(200 μmol/L Vit E);以MTT检测细胞存活率,DCFH-DA检测细胞内ROS及蛋白质印迹法检测LOX-1、NADPH氧化酶亚基(gp91phox、p47phox、p67phox)蛋白经时改变(3、6、12、24 h);real-time PCR检测24 h后LOX-1、NADPH氧化酶亚基(p22phox、gp91phox、rac1)mRNA的表达,采用慢病毒介导的基因沉默技术抑制LOX-1表达48 h后,用oxLDL诱导24 h,检测LOX-1蛋白、NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白和ROS的含量。采用SPSS 17.0进行统计学分析。 【结果】 与正常组比较,oxLDL处理后细胞生存率仅为50.31%,LOX-1蛋白伴随细胞氧化损伤在3、6、12、24 h表达量显著增加,且在3 h和24 h时呈现两个表达高峰(P<0.05),NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白表达水平在各时间点均显著升高(P均<0.01),24 h达高峰,ROS检测结果表明其动态经时改变在3 h和24 h达峰值( P<0.05)。Real-time PCR结果显示,LOX-1 mRNA及NADPH氧化酶亚基(gp91phox、p22phox、rac1) mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。慢病毒介导LOX-1基因沉默后,最佳转染效率为73.23%。oxLDL诱导24 h后,LOX-1及NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白表达下调,ROS生成量相应降低。VitE组下调LOX-1和NADPH氧化酶的mRNA及蛋白质表达并降低ROS生成。 【结论】 oxLDL经LOX-1/NADPH氧化酶/ROS通路诱导HUVEC细胞损伤。200 μmol/L的VitE可通过抑制LOX-1/NADPH氧化酶/ROS信号通路的活化而发挥对oxLDL诱导的HUVEC细胞损伤的保护作用。     

不同剂量瑞舒伐他汀对实验性动脉粥样硬化大鼠过氧化及血管平滑肌增生的影响

目的：观察不同剂量瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化大鼠过氧化及血管平滑肌增生的影响。方法将46只大鼠随机分为5组。对照组（n ＝6）给予普通饲料喂养;高蛋氨酸组（n ＝10）在此基础上加质量分数2％的蛋氨酸;叶酸组（n ＝10）在高蛋氨酸饲料喂养4周后,叶酸按每天0．8 mg／kg剂量灌胃;瑞舒伐他汀低剂量组（n ＝10）和高剂量组（n ＝10）以高蛋氨酸饲料喂养4周后,瑞舒伐他汀分别按每天1、2 mg／kg剂量灌胃。末次灌胃后4 h 处死动物取血及颈主动脉。检测各组大鼠血浆同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）、血浆丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）活性及炎症因子表达,测量颈动脉内膜中膜厚度。结果建模后12周,各组血浆 Hcy 水平均较建模前显著升高,依次为高蛋氨酸组＞叶酸组＞低剂量组＞高剂量组＞对照组（P ＜0．05）;瑞舒伐他汀组各过氧化、炎症指标均显著优于高蛋氨酸组,高剂量组 MDA、肿瘤坏死因子α、白细胞介素8及基质金属蛋白酶9含量较低剂量组降低,GSH-PX 活性则明显增强（P ＜0．05）;高蛋氨酸组、叶酸组与低剂量组颈动脉内膜中膜厚度明显高于对照组、高剂量组（P ＜0．05）。结论高剂量瑞舒伐他汀对高 Hcy性动脉粥样硬化的疗效更佳,可达到更好的过氧化抑制作用,降低动脉血管平滑肌厚度。     

在临床医学八年制教学中开展呼吸系统课程整合的实践与思考

课程整合是指以器官系统为中心,按学科之间的内在联系,把传统学科内容组织起来,形成一种新的结构。作者及其团队在对临床医学八年制2010级学生的呼吸系统教学中,进行课程整合实践,取得初步效果。     

mTOR依赖的自噬通路与神经变性疾病

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）是一种保守的蛋白激酶。当真核细胞缺乏营养时,可以通过抑制mTOR来诱导自噬。作为细胞生长的重要调节因素,当营养条件、生长环境和应激状况发生变化时,mTOR在协调细胞生长与自噬的平衡过程中发挥关键作用,是调节细胞自噬的一个关键因素,但是其潜在的机制尚不十分清楚。mTOR活性主要受PI3K/Akt和LKB1/AMPK信号通路支配,并且通过调节自噬相关基因来调控自噬。在神经变性疾病的不同发病阶段,mTOR活性的调节至关重要。本文综述了mTOR调控自噬的相关机制及其对帕金森氏病、阿尔茨海默病和亨廷顿病的重要影响。     

肠功能恢复汤的临床应用体会

目的:观察肠功能恢复汤对腹腔术后肠功能的恢复情况。方法:对1380例腹部手术后2d～3d开始用肠功能恢复汤,观察肠功能恢复时间。结果:所有患者功能恢复均提前1d～2d,且无明显并发症。结论:术后早期使用肠功能恢复汤可以达到通里攻下,促进肠功能恢复,也促进包括肺功能在内的整个机体得以尽快恢复。     

左旋精氨酸对大鼠心肌细胞ATP敏感性钾通道的影响

目的研究左旋精氨酸(L-Arg)对大鼠离体心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP)的影响。方法急性分离大鼠心肌细胞,设保持电位-40mV,指令电位-100～ 40mV,步阶脉冲20mV,波宽200ms,刺激间隔为6s。记录IKATP。结果观察正常生理条件下和给予不同浓度L-Arg后心肌细胞IKATP的变化,并分析L-Arg对KATP通道功能的影响。指令电位为-100mV,给予10,30,50mmol·L-1的L-Arg后,KATP的开放率分别为:(173±19)%,(190±18)%,(268±21)%,具有浓度依赖性增加趋势。后两者与对照组比较(P<0.05),r=0.958,与对照组比较(P<0.05);当L-Arg的浓度增加到100mmol·L-1时,KATP的开放率为(175±54)%。结论L-Arg在低浓度范围内(10～50mmol·L-1),可浓度依赖性的开放KATP通道;L-Arg浓度增加至100mmol·L-1时,则该作用不明显。