应用抑制性消减杂交在阴道毛滴虫筛选热卡限制相关差异表达基因

热卡限制能使众多实验动物的寿命延长,而且它是唯一延缓哺乳动物衰老的途径.我们用原生动物阴道毛滴虫建立了热卡限制模型.在此研究体系中,该原生动物细胞周期在热卡限制的培养条件下较糖充足的培养条件下延长80%.本研究运用抑制性消减杂交的方法,以期筛选在两种培养条件下差异表达的基因,并从2个cDNA消减杂交文库中分离到15个克隆.经序列分析表明,有9个未知基因,6个已知基因.     

应用分类树模型构建缺血性脑卒中发病风险的预测模型

目的应用分类树模型构建缺血性脑卒中发病风险的预测模型,并评价其应用价值。方法采用1:1配比病例对照研究设计,选择深圳市2所综合性医院的309名缺血性脑卒中患者为病例组,同时选择按年龄、性别匹配的健康者作为对照;采用卡方自动交互检测(CHAID)法建立缺血性脑卒中发病风险的预测模型,采用错分概率Risk值、索引图及受试者工作特征曲线(ROC)评价模型的应用价值。结果所建立的分类树模型共包括4层,共19个结点,共筛检出6个解释变量;其中最为重要的预测因素为体育锻炼和高血压病史。模型错分概率Risk值为0.207,利用预测概率绘制的ROC曲线下面积为0.789,与0.5比较,差异有统计学意义(P=0.001),模型拟合的效果较好。结论分类树模型不仅能有效地拟合缺血性脑卒中发病风险的预测模型,还可以有效地筛检变量间的交互作用效应。     

转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6基因表达的影响

 目的：研究肿瘤相关转录因子YY1 对口腔鳞癌细胞整合素β6（integrin β6, ITGB6）基因表达调控的影响。方法：用生物信息学方法预测分布在ITGB6启动子区域的转录因子YY1潜在的结合位点,构建萤光素酶报告基因质粒,利用双萤光素酶报告基因系统检测ITGB6启动子片段的转录活性;利用染色质免疫沉淀技术检测在天然染色质条件下转录因子YY1与ITGB6启动子的结合情况;采用定点突变方法检测YY1结合位点对ITGB6启动子活性的影响;利用RT-PCR方法检测过表达转录因子YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA表达水平的影响。结果：ITGB6启动子-421~-150 nt区域存在多个转录因子YY1潜在的结合位点。在口腔鳞癌细胞的天然染色质中,转录因子YY1结合于ITGB6启动子-421~-150 nt区域;定点突变YY1潜在结合位点对口腔鳞癌细胞中ITGB6启动子活性无显著影响。另外,过表达的YY1对口腔鳞癌细胞ITGB6 mRNA的表达水平也无影响。结论:转录因子YY1在口腔鳞癌细胞中结合于ITGB6基因启动子-421~-150 nt区域,但对ITGB6基因的基础转录水平无影响。     

哺乳类沉默信息调节因子1激活剂可上调肝X受体α-趋化因子受体7泡沫细胞移出信号和抑制炎症信号通路

目的：研究哺乳类沉默信息调节因子（SIRT）1参与调控单核细胞（U937）源性泡沫细胞从动脉粥样硬化斑块移出信号通路及其机制。方法：在体外模拟限制泡沫细胞移出的条件下检测泡沫细胞中SIRT1、肝X受体（LXR）α、趋化因子受体（CCR）7和转录核因子（NF）-κb的蛋白表达。结果：在SIRT1激动剂SRT1720激活下,SIRT1、LXRα和CCR7的蛋白表达水平上调,而NF-κb表达下调。SIRT1抑制剂尼克酰胺可阻断SRT1720的调节作用。结论：SIRT1可能通过上调LXRα-CCR7信号和抑制NF-κb炎症信号通路正向调节泡沫细胞的移出作用。     

深圳中学女生心理卫生状况及影响因素分析

目的：分析初中、普高及职高等不同类型学校中学女生的心理卫生状况及影响因素,为学校健康教育和心理咨询开展针对性心理卫生工作提供依据。方法采用SCL-90症状自评量表和青少年生活事件量表（ ASLEC）对1168名中学学生（其中高中女生204名、男生217名,初中女生263名、男生198名,技校女生152名、男生134名）的心理卫生状况进行了分析。结果调查女生的心理卫生问题检出率（55．43％）高于男生,且差异具有统计学意义（χ^2＝10．131,P＜0．05）。女生在强迫（ t＝2．998, P＜0．05）、人际关系敏感（t＝12．662,P＜0．01）、抑郁（t＝2．624,P＜0．05）、焦虑（t＝7．581,P＜0．01）、敌对（t＝5．091,P＜0．01）、精神病性（t＝3．025,P＜0．05）等因子上的得分与常模相比的增高均有统计学意义。初中、普高、职高女生的强迫和抑郁因子得分依次增高,职高女生躯体化、恐怖、偏执、精神病性等因子得分最高,普高女生的人际关系敏感因子得分最高。 SCL-90总分和焦虑、抑郁及强迫各因子的得分与学习、受惩罚、人际关系存在正相关。结论深圳中学女生的心理卫生问题发生率及其程度较全国成人水平偏高,也高于同比男生,表现出自身特色,有必要对其开展针对性的心理卫生工作。     

合成衣原体属特异LPS决定簇糖结合物的抗原性分析

合成衣原体属特异脂多糖（ＬＰＳ）的四糖链α－２－酮基－３－脱氧辛酸（ＫＤＯ）（２→８）－α－ＫＤＯ（２→４）－α－ＫＤＯ（２→６）－β－ＧｌｃＮＡｃ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）共价结合，制成糖－ＢＳＡ结合物抗原，用其免疫小鼠所制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）经间接血凝试验、血凝抑制试验、ＥＬＩＳＡ、免疫荧光试验和免疫印渍等试验分析，结果把这些ＭｃＡｂ分为两组：一组与衣原体ＬＰＳ和Ｒｅ型ＬＰＳ有交叉反应；另一组为衣原体特异性抗体，其中ＫＤＯ３特异抗体与衣原体原体ＭｃＡｂ有共同决定簇特异性，但亲和力却高于后者１００多倍。表明合成糖－ＢＳＡ结合物与衣原体ＬＰＳ有相似的抗原性。     

一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因

目的 铁氧还蛋白系铁硫蛋白，在多种反应体系中起着传递电子的作用，也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因，以便进一步探讨其生理功能。方法 构建阴道毛滴虫cDNA表达文库，分离cDNA进行克隆、测序及序列分析。结果 在分离出的cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因。该基因读码框全长312bp，相应蛋白质序列具103个氨基酸；在该蛋白质前体的N端带有10个氨基酸残基的氢酶体靶片段(MLSQCSPLRF)。序列分析显示该铁氧还蛋白(TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白(TvFd)有高度同源性(69％)；TvFd2与铁氧还蛋白(2Fe-2S)的两大亚类(氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白)均具较低的同源性；可与(2Fe-2S)结合的4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列(-C-X5-C-X2-C-Xn-C-)。结论 分析表明TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白，其功能有待进一步研究。     

生物反馈技术在生理学实验教学中的应用效果分析

在生理学实验教学中应用生物反馈的原理,通过实时录像装置拍摄记录教师的示范授课过程和学生的实验操作过程,使教师和学生均能及时接受反馈信息,再根据反馈信息与正确的参考信息进行比较分析,及时、主动地调整和修正实验操作,最终达到提高学习质量和效率的目的.     

嗜人按蚊种群饲养及标本保存方法对总RNA提取影响的研究

目的 建立适合嗜人按蚊小型种群饲养方法，探讨按蚊标本不同保存方法对总RNA提取的影响，为进行相关性研究提供高质量总RNA标本提供依据。方法 拟合嗜人按蚊的生长习性，在实验室采用多种针对措施以提高按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率；采用总RNA变性胶凝胶电泳分析乙醚麻醉和低温速冻法对总RNA降解的影响。结果在非专业饲养室中采用简便低廉的改良方法大大提高了嗜人按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率。低温速冻法较传统的乙醚麻醉法更好得避免了标本RNA的过多降解。结论建立了一种低成本、高成功率的嗜人按蚊饲养方法和一种低降解、安全简便的差异分析用嗜人按蚊标本的保存方法。     

幽门螺旋杆菌感染者尿液中特异性IgG及亚类的检测

目的 研究幽门螺旋杆菌感染者尿液中特异性循环抗体在幽门螺旋杆菌诊断上的应用。方法采集经C^14尿素呼气实验确诊的幽门螺旋杆菌患者尿液，ELISA法测定尿液中抗幽门螺旋杆菌特异性IgG及亚类（IgG1，IgG2，IgG3）抗体；同时用健康人群尿液作为阴性对照。结果C^14尿素呼气实验幽门螺旋杆菌患者尿液中抗幽门螺旋杆菌IgG抗体的检出率为96％（47／49），其中IgG1为96％（47／49），IgG2为20％（9／49），IgG3为32％（16／49），健康人群尿液中有4％的假阳性，但在健康人群中无幽门螺旋杆菌IgG2和IgG3特异性抗体检出。结论幽门螺旋杆菌患者尿液中存在抗幽门螺旋杆菌的特异性循环抗体，提示尿液中的抗体可以作为幽门螺旋杆菌感染的诊断标志，特别是尿液中的IgGl抗体可以作为幽门螺旋杆菌病的诊断的依据。