Calpain重组分子免疫小鼠IFN-γ和IL-4表达的变化

目的探讨日本血吸虫疫苗侯选分子-钙离子激活的中性蛋白激酶（Calpain）的保护性免疫和免疫保护机制. 方法用重组纯化的Calpain抗原免疫BALB/c小鼠,RT-PCR分析小鼠-氧化氮激酶（iNos.enos.nNos）mRNA的表达;ELISA分析免疫小鼠体外培养脾细胞产生的细胞因子IFN-γ和IL-4的动态变化.结果重组Calpain抗原免疫小鼠1周后,小鼠iNos mRNA的表达显著增强;培养24h免疫鼠脾细胞上清中IFN-γ浓度显著高于对照组,而IL-4的产生在免役组与对照组之间无显著性差异. 结论Calpain抗原能诱导IFN-γ的产生,提示Calpain诱导Th1的免疫应答反应来抗日本血吸虫的感染.     

大鼠Sirt1基因原核表达质粒的构建及融合蛋白表达

目的构建大鼠Sirt1基因重组原核表达质粒pET41-Sirt1,表达其重组蛋白,为进一步研究Sirt1在哺乳动物细胞内的作用奠定基础。方法根据GenBank中大鼠Sirt1基因序列设计引物,用RT-PCR扩增得到含BamHI/XhoI酶切位点的Sirt1片段,克隆至pGEM-Teasy载体后亚克隆至原核表达载体pET41,测序鉴定后,转化宿主菌进行表达、蛋白纯化,SDS-PAGE鉴定。结果从大鼠脑的mRNA中扩增出特异Sirt1基因片段长506bp,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实pET41-Sirt1重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为48kD。结论成功构建重组原核表达质粒pET41-Sirt1,并能表达融合蛋白,其分子量大小与预期一致。     

深圳市疟疾预防与控制综合措施分析

目的研究深圳控制疟疾爆发流行的预防、控制措施及蚊的种群分布。方法分析深圳控制疟疾综合防治的措施,对疟疾高度流行区的人群使用氟氯氰菊酯缓释剂型防蚊蚊帐预防疟疾感染,利用金标层析试纸条快速筛查来自疟疾流行区人群,筛选传播疟疾蚊媒遗传标志并建立传疟蚊媒分子诊断技术;利用多基因遗传分析系统监测蚊媒耐药基因的表达。结果深圳市疟疾的年发病率从1981年的1097.89/10万下降到2005年的1/10万以内,在1985-1990年疟疾高度流行期间制作防蚊蚊帐148万顶,保护了60多万暴露在疟疾感染下的人群,金标层析试纸条检测与镜检结果的符合率为100%,筛选了ITS2基因用于快速鉴别不同蚊媒的种类。结论疟疾控制必须采取积极预防、早期诊断和治疗、媒介监测和健康教育等综合防治措施。     

深圳市疟疾流行状况及其防制效果分析

目的分析深圳市疟疾流行病学特点,并评估防制效果。方法收集2007-2009年全市＂三热＂病人血检监测及疟疾发病资料,采用描述流行病学方法分析其＂三间＂分布特点,通过比较实施综合性干预措施前后疟疾发病率的变化,评估疟疾防制效果。结果 2007-2009年疟疾发病总数为85例,平均年发病率为0.025/万;输入性疟疾病例为54例,占总病例数的63.5%（54/85）,其中恶性疟15例;2007-2009年本地疟疾发病数稳定在每年10例左右,而输入性病例数变化明显,分别为15,29和10例;按地区分,报告病例数前三位依次是罗湖、宝安和龙岗区,分别为31、21和20例,南山和福田区各5例,盐田区2例;发病时间动态分布显示每年的6-8月为发病的高峰期;从事野外作业的低收入群体和往来非洲、东南亚等疟疾高发地区的商务人员为高危人群。实施以输入性疟疾防治为重点的干预措施后,2009年疟疾发病数和输入性病例同比下降了46.1%和65.5%。结论深圳市本地疟疾疫情稳定,输入性疟疾是导致疟疾疫情波动的主要因素。今后,深圳市疟疾防制应以输入性疟疾为工作重点。     

疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策研究

目的探讨深圳市赴疟疾高度流行区回国人员的疟疾综合防制对策,为进一步加强我市的疟疾防制工作提供科学依据。方法对我市某高新企业赴疟疾高度流行区外派人员进行出国前健康教育、出国间药物预防和回国后健康排查并对该防制对策的效果进行分析研究。结果在疟疾相关知识健康教育前后,涉外员工的教育依从性和疟疾相关知识水平有显著提高,其中问卷回收率(χ2=21.024,ν=1,P<0.001)、疫区知识正确性(χ2=21.213,ν=1,P<0.001)和态度行为正确性(χ2=15.142,ν=1,P<0.001)增高明显。被干预人员的预防药物使用率逐年上升,疟疾发病率维持在较低水平。疟疾快速筛查方法与病原学检查结果符合率高,有助于病例的早期诊断和治疗。结论深圳市针对从疟疾高度流行区回国人员的疟疾防制对策为我市和其他涉外交流频繁地区的疟疾防制提供了重要的工作经验。     

限制热量对NIT-1细胞胰岛素／胰岛素样生长因子通路及胰岛素分泌功能的影响

目的 研究限制热量(CR)对胰岛素β瘤细胞(NIT-1)细胞胰岛素/胰岛素样生长因子(IGF-1)信号通路及胰岛素分泌功能的影响,为2型糖尿病(T2DM)的发病机制及防治提供实验依据和理论基础.方法 NIT-1细胞培养至指数生长期,分别用PI3-K的阻断剂LY294002(LY)进行干扰,实验分成4组:对照组;CR组;LY+CR组;LY组.用RT-PCR、免疫细胞化学等方法检测Foxo1及其下游基因的转录及表达,用放射免疫及免疫细胞化学法检测胰岛素的分泌及表达,用细胞计数法检测细胞倍增周期.结果 ①CR可使NIT-1细胞倍增周期延长;②Foxo1主要定位于胞浆,阻断PI3-K后Foxo1从胞浆移入胞核,mRNA转录减少;③CR在正常状态及PI3-K通路障碍的细胞均可使Foxo1mRNA转录增加,并影响其下游基因p27、Bim的转录;④PI3-K通路障碍可使NIT-1细胞胰岛素分泌增加,CR则可使PI3-K通路障碍的NIT-1细胞胰岛素分泌减少.结论 CR不需通过上游PI3-K/Akt,可直接或间接作用于Foxo1参与对胰岛素/IGF-1信号通路的调控,延长细胞寿命,增强NIT-1细胞的糖耐量,改善胰岛素信号的传导及NIT-1的胰岛素分泌功能;可能参与了T2DM的发生发展.     

中国大陆窄翅伊蚊形态学及分类学地位探讨(Diptera:Culicidae)

对广东省野外采集的伊蚊属、新黑蚊亚属的窄翅伊蚊四龄幼虫、蛹和雌、雄成蚊进行形态学观察并与我国以前记录和世界其他地区同亚属蚊虫进行对比。对我国窄翅伊蚊的形态学特征进行补充并与世界其他地区相关蚊种进行比较．探讨其分类学地位。     

PC-1基因K121Q多态性与2型糖尿病相关性研究

目的探讨浆细胞膜糖蛋白PC-1基因多态性与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态，（Polymeras chain reaction - restriction fragment length polymorphism , PCR - RFL P）技术对深圳市50例2型糖尿病（T2DM）患者和50例非糖尿病对照（NCT）人群的PC-1基因第四外显子K1Z1Q多态性进行分析。结果2型糖尿病组与非糖尿病对照组比较，PC-1基因型频率和等位基因频率分布差异均无显著性。结论PC-1基因K121Q多态性与2型糖尿病的发生无明显关联。