乙型脑炎病毒TaqMan逆转录聚合酶链反应检测方法的建立

目的采用TaqMan技术，研究建立实时荧光逆转录聚合酶链反应技术（RT—PCR）检测乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis，JEV）的效果。方法根据JEV非结构蛋白基因NS3基因序列（GenBank序列号，U15763），结合生物学软件序列比对分析，设计1对特异性引物和TaqMan寡核苷酸探针，优化荧光RT～PCR反应条件后，以模板梯度稀释法及相关毒株对比扩增检验测定方法的敏感度和特异性。结果引物和探针最佳浓度均为0．20uM，复性温度为55℃。方法至少检测出1 copy／止病毒RNA，与流感、麻疹、腮腺炎、风疹、水痘等病毒均无交叉反应。从病毒核酸提取至完成检测仅需3hr左右。结论所建立的JEV病毒TaqMan荧光RT—PCR方法敏感特异，有助于JEV感染的实验室早期快速诊断。     

茶多酚对新生大鼠卵巢发育的影响

目的:探讨茶多酚对新生大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响及相关调控机制。方法:受孕11.5dSD大鼠灌胃茶多酚(100mg/kg,qd)直至分娩,分别用多聚甲醛固定出生后1d、2d、4d、8d龄雌仔鼠卵巢(A组),同时将正常出生后1d的雌幼SD大鼠腹腔注射茶多酚(50mg/kg×1-8d),分别固定出生后2d、4d、8d龄卵巢(B组);所有卵巢经HE染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)荧光染色检测卵巢内卵母细胞凋亡变化,免疫组化方法观察叉头转录因子(FOXO3a)、促凋亡因子(Bim)和抗凋亡因子(MnSOD2)在卵巢组织中的表达水平,并以母、幼均未处理的正常同龄大鼠卵巢为对照(C组)。结果:在茶多酚干预组(包括A组和B组)卵巢内,1d、2d龄未装配卵泡比例及4d、8d龄原始卵泡比例均高于C组;A组、B组中卵母细胞TUNEL阳性率显著低于C组;FOXO3a、MnSOD2在A组的1d、2d、4d龄卵巢中的表达高于C组,但二组间的Bim表达水平相一致。结论:茶多酚能延缓新生大鼠卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动,减少卵泡的消耗,可能有益于延长卵巢的生殖寿命;茶多酚可能通过上调FOXO3a的活性从而抑制原始卵泡的发育启动,同时通过激活其下游靶分子MnSOD2抑制卵母细胞的凋亡,促进卵母细胞的存活。     

深圳市广州管圆线虫疫源地调查及流行特征分析

目的 了解深圳市散发的广州管圆线虫病患者和疫源地分布,及其主要传播途径和流行特征.方法 在深圳市12个不同生态环境地点调查广州管圆线虫不同宿主分布和感染情况,采用匀浆沉淀镜检法对各调查点捕获的中间宿主进行解剖,以确定中间宿主的感染率和感染度.用鼠笼捕获鼠类,解剖鼠体,在鼠心脏和肺动脉血管寻找广州管圆线虫成虫,从野生螺体内分离的广州管圆线虫幼虫进行实验室广州管圆线虫生活史的循环,完成实验室生活史的循环证实现场调查的结论.结果 在12个调查点中有4个区域发现褐云玛瑙螺阳性,分布在深圳市西南部,感染率平均为31%,螺的感染度与其体重相关,螺体重≥55 g的个体平均感染度显著性高于＜55 g的个体(P＜0.05);阳性螺区域终末宿主褐家鼠和黄胸鼠均有感染,感染率平均为12%,雌鼠的感染率显著高于雄鼠(P＜0.01).结论 深圳市存在广州管圆线虫自然疫源地,疫源地内广州管圆线虫在中间宿主和终末宿主之间广泛传播,自然疫源地是深圳市散发广州管圆线虫患者的主要原因.     

限制饮食对老年早期大鼠生存状态和旷场行为的影响

目的 研究热量限制对老年早期大鼠的生存状态和行为学的影响.方法 选用18月龄的健康雄性SD大鼠,根据进食情况分为2组,一组为CR组(n=29)给予对照组进食量60%的食量饲养,对照组为ad libitum(AL)组(n=31)自由进食,观察6个月,在此期间,记录大鼠的生存状况,每周测定大鼠体质量;6个月后,进行旷场实验观察自发活动能力.结果 CR组给予60%的饮食控制后,体质量维持在低于对照组约20%左右(P<0.01).CR组的生存率为89.66%显著高于AL组67.74%(P=0.039);在旷场实验中测定的CR组大鼠自发活动路程为(201.06±78.35)m,显著长于AL组[(147.38±36.89)m,P=0.021],而CR组的自发活动速度为(78.10±34.38)mm/s也显著高于AL组[(48.96±14.87)mm/s,P=0.021],并且CR组大鼠具有在中央区域的活动距离长(P=0.048)和在周边区域活动速度快(P=0.012)的特点.结论 对老年早期的大鼠给予6个月的热量限制可以提高大鼠的生存率以及旷场活动能力,反映了大鼠的健康状况改善.     

白藜芦醇对PC12生长周期停滞的研究

目的 研究白藜芦醇对PC12的细胞周期停滞调节的作用.方法 应用5μmol/L,10μnol/L,20μmol/L和50μmol/L不同浓度的白藜芦醇作用于PC12,用MTT和流式细胞术观察PC12细胞周期的变化.结果 随着白藜芦醇浓度增加细胞存活率降低,流式细胞术检测发现10μmol/LRSV使细胞G0/G1期明显延长(P=0.023).而50μmol/LRSV细胞凋亡增加(P＜0.005).结论 低浓度的RS、,能够诱导PC12细胞周期停滞而高浓度的RSV诱导细胞凋亡.     

深圳市公明地区1994～2006年法定传染病流行特征分析

目的分析公明地区法定传染病流行特征，为新区政府制定传染病预防控制策略提供依据。方法对公明地区1994—2006年法定传染病甲乙丙类疫情报告资料进行描述性统计分析。结果疟疾发病呈明显下降趋势，淋病、肺结核、痢疾、病毒性肝炎发病率较高，梅毒、艾滋病发病率呈上升趋势，外来流动人口发病率较本地常住人口高，主要与流动人口存在高危行为有关。结论外来流动人口传染病防控是当前主要公共卫生问题，健康教育，行为干预等多项综合防治手段是预防控制传染病流行的有效措施。     

生物反馈技术在生理学实验教学中的应用效果分析

在生理学实验教学中应用生物反馈的原理,通过实时录像装置拍摄记录教师的示范授课过程和学生的实验操作过程,使教师和学生均能及时接受反馈信息,再根据反馈信息与正确的参考信息进行比较分析,及时、主动地调整和修正实验操作,最终达到提高学习质量和效率的目的。     

深圳市疟疾流行状况及其防制效果分析

目的分析深圳市疟疾流行病学特点,并评估防制效果。方法收集2007-2009年全市"三热"病人血检监测及疟疾发病资料,采用描述流行病学方法分析其"三间"分布特点,通过比较实施综合性干预措施前后疟疾发病率的变化,评估疟疾防制效果。结果 2007-2009年疟疾发病总数为85例,平均年发病率为0.025/万;输入性疟疾病例为54例,占总病例数的63.5%(54/85),其中恶性疟15例;2007-2009年本地疟疾发病数稳定在每年10例左右,而输入性病例数变化明显,分别为15,29和10例;按地区分,报告病例数前三位依次是罗湖、宝安和龙岗区,分别为31、21和20例,南山和福田区各5例,盐田区2例;发病时间动态分布显示每年的6-8月为发病的高峰期;从事野外作业的低收入群体和往来非洲、东南亚等疟疾高发地区的商务人员为高危人群。实施以输入性疟疾防治为重点的干预措施后,2009年疟疾发病数和输入性病例同比下降了46.1%和65.5%。结论深圳市本地疟疾疫情稳定,输入性疟疾是导致疟疾疫情波动的主要因素。今后,深圳市疟疾防制应以输入性疟疾为工作重点。     

沉默信息调节蛋白6基因重组腺病毒的构建及其在HepG2细胞中的表达

目的:构建高表达小鼠沉默信息调节蛋白6(SIRT6)基因的重组腺病毒Ad-SIRT6,并在HepG2细胞中验证其表达。方法:通过PCR获取SIRT6基因编码序列,克隆入pAd-Track-CMV载体质粒中;将重组质粒PmeⅠ线性化处理后与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同电转入大肠杆菌BJ5183中,获得Ad-SIRT6质粒pAd-SIRT6;用PacⅠ线性化处理后,转染Ad293细胞,包装获得Ad-SIRT6。用该病毒感染HepG2,进行RT-PCR及Western blot验证目的基因的表达。结果:pAd-Track-CMV-SIRT6测序结果正确;pAd-SIRT6转染Ad293后,扩增并纯化得Ad-SIRT6;转染HepG2后,经RT-PCR及Western blot验证,可表达外源性SIRT6基因,且SIRT6总蛋白表达量增高(P<0.05)。结论:成功构建可高表达SIRT6基因的Ad-SIRT6,为进一步研究SIRT6基因在肝糖脂代谢中的作用机制奠定了基础。     

深圳市300例MSM人群HIV/梅毒感染状况及行为学特征

目的了解深圳市部分男男同性性行为人群（MSM）艾滋病病毒（HIV）、梅毒感染状况,以及艾滋病相关危险行为,为预防控制性病、艾滋病传播提供依据。方法采用同伴推动抽样（RDS）法,收集2010年1月至2010年4月深圳市男男同性恋人群样本300例,并对该样本人群进行问卷调查,同时对该样本进行HIV和梅毒的实验室检测。结果300例研究对象中,HIV感染率为7.0%,梅毒感染率为12.0%,HIV梅毒合并感染率为2.9%;最近一次与男性发生性行为时安全套的使用率为65.3%,与女性发生性行为时安全套的使用率为48.9%。结论深圳市MSM人群HIV、梅毒感染率较高,危险性行为普遍存在,安全套使用率低,应加强对该人群艾滋病性病相关的宣传教育及干预工作,控制HIV的传播。