白黎芦醇对心肌细胞去乙酰化酶1表达时序的影响

目的探讨白黎芦醇(RES)在心肌细胞中对去乙酰化酶(SIRT)1表达时序的影响。方法大鼠心肌细胞株H9c2培养48h后,分别以0(对照组)、10(低剂量组)、20(中等剂量组)、50、100μmol/L(高剂量组)的RES处理0、12、24、36、48h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析SIRT1 mRNA表达情况,Western blot法检测SIRT1蛋白表达水平的变化。结果H9c2心肌细胞经RES处理后,MTT测得的吸光度(A)值在低、中剂量升高,20μmol/L组作用最显著(P<0.05),50μmol/L组开始下降,低于对照组(P>0.05),100μmol/L组降至最低(P<0.05);各组SIRT1 mRNA和蛋白表达A值均高于对照组(P<0.05),与低、高剂量组相比,中等剂量组表达最高(P<0.05);中等剂量组RES处理0、12、24、36、48h后,不同时间点SIRT1 mRNA和蛋白表达A值均高于对照组(P<0.05),以24h时表达最强(P<0.01)。结论20μmol/LRES作用24h时心肌细胞的SIRT1表达最强。     

深圳市鼠类广州管圆线虫感染状况调查

目的 了解深圳市广州管圆线虫鼠类终宿主自然感染的情况,为该地区广州管圆线虫病的预防控制提供依据.方法 采用分层随机抽样法采样,对捕获鼠的血清进行广州管圆线虫IgG抗体检测,解剖其心、肺组织进行虫体检查.用卡方检验比较各组感染状况.结果 共调查深圳市4个行政区鼠类331只,检出广州管圆线虫IgG抗体阳性鼠50只,阳性率为...     

白细胞SIRT1、SIRT4与2型糖尿病的相关性

目的 了解外周血白细胞(WBC)中SIRT1、SIRT4与2型糖尿病(T2DM)的相关性,及其能否作为检测指标用于反映T2DM患者的血糖、血脂水平以及胰岛β细胞功能.方法 收集对照组(NC组)与T2DM组的资料,用免疫细胞化学染色检测SIRT1、SIRT4在WBC(包括粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)中的表达情况,用逆转录...     

PGC-1α与非酒精性脂肪肝病关系的研究进展

非酒精性脂肪肝病是代谢综合征在肝脏的表现,其对公众健康的危害受到普遍关注.胰岛素抵抗,线粒体损伤,脂代谢紊乱都参与了非酒精性脂肪肝的形成.过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α (PGC-1α)是一种核转录辅激活因子,它参与了机体的能量代谢.此文综述了它对胰岛素抵抗,线粒体损伤,脂代谢紊乱等非酒精性脂肪肝病形成机制方面的作用.PGC-1α有可能成为治疗非酒精性脂肪肝病药物的新靶点.     

白藜芦醇-Sirtl-Foxo1调控通路对缺氧心肌细胞的保护作用

目的 研究白藜芦醇-Sirtl-Foxol调控通路时缺氧心肌细胞的保护作用.方法 将大鼠心肌细胞株H9C2培养48 h后,随机分为5组,即20 μmol/L白藜芦醇(resveratrol,Res)干预组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对照组、40 mmol/L尼克酰胺(nicotinamide,Nam)干预组、Nam空白对照组及正常对照组.培养24 h后终止培养,用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法榆测Sirtl、Foxol、p27、Bim mRNA及其蛋白表达水平的变化;用TUNEL法及流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析细胞凋亡和细胞周期.结果 20 μmol/L Res 干预组可使Sirtl mRNA及SIRT1蛋白表达的水平增加.Sirtl 可通过抑制Foxol mRNA的转录活性而调节其下游基因p27及Bim的表达.SIRT1的高表达可使细胞周期延长,细胞调亡减少,结论 Res干预可使SIRT1表达增加.Sirtl可能通过对Foxol及其下游基因Bim、p27的调控,延长心肌细胞的细胞周期,减少其凋亡.     

山稔子提取物对体外DNA氧化性损伤的保护作用

目的 观察山稔子提取物对原代体外培养淋巴细胞DNA氧化损伤的保护作用.方法 原代培养24 h的脾淋巴细胞悬液,随机分为7组,其中5组细胞用不同浓度的山稔子提取物溶液预先处理60 min,再加入50 μmol/L的H2O2,H2O2染毒组直接加入相同浓度的H2O2,空白对照组加入等量的PBS溶液,7组细胞共同在4℃下染毒20 min,收获细胞同时进行单细胞凝胶电泳,计算DNA迁移的细胞率和总彗星长度.结果 H2O2可致原代培养脾淋巴细胞的DNA严重损伤,而山稔子提取物能不同程度地降低H2O2诱导产生的DNA损伤,在10、50、100 μg/mL的浓度下.彗星细胞出现率从阳性对照组的100%分别降低为85%、65%和30%(P分别<0.05、0.01、0.01),总彗星长度也从对照组的(52.82±6.42)μm,逐渐降低为(43.68±5.59)μm、(35.80±8.75)μm、(25.35±4.32)μm(P分别<0.05、0.01、0.01).结论 山稔子提取物具有抗氧化作用,能在一定浓度范围内保护细胞显著降低氧自由基对DNA的氧化损伤.     

LPA2受体介导LPA诱导的人支气管肺上皮细胞PAI-1表达

目的研究溶血磷脂酸（LPA）对原代培养人支气管肺上皮细胞（NHBE）表达纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）的调节作用。方法原代培养人支气管上皮细胞培养于6孔板培养板内,经LPA诱导后,收取RNA裂解液并用实时荧光定量RT-PCR技术检测PAI-1 mRNA表达水平;利用RNA干扰技术研究LPA受体的作用。结果 LPA可诱导NHBE细胞PAI-1 mRNA表达上调且呈时间相关性,此效应可被LPA2 siRNA完全阻断。结论 LPA2受体介导LPA诱导NHBE细胞表达PAI-1。     

SIRT6在大鼠脑组织中的表达与分布

目的研究SITR6蛋白在正常大鼠脑组织中的表达与分布。方法在常温下自由饮水与饮食的情况下喂养8周的大鼠,采用免疫组织化学检测大鼠脑组织中SIRT6的表达与定位。结果 SIRT6是一种主要在神经元中表达的核蛋白,在大鼠正常脑组织中广泛表达,尤其在大脑组织中的皮质、髓质、海马中的神经元表达量较高;且在海马集中表达和在大脑皮质的外锥体细胞层和内椎体细胞层较明显,而在大脑髓质中表达低于海马和皮质。结论 SIRT6作为一种核蛋白,为研究SIRT6的功能提供了新的思路。     

深圳水库区双脐螺rDNA基因片段克隆与序列分析

目的克隆深圳水库区双脐螺rDNA基因片段并进行序列分析。方法采集深圳水库排洪渠水体的双脐螺,提取基因组DNA,PCR方法扩增r DNA基因片段,纯化后与p MD18-T质粒连接,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选阳性克隆;重组质粒经双酶切鉴定后,进行序列测定,并以BLAST和MEGA4软件分析序列特点。结果深圳水库区双脐螺r DNA基因扩增片段大小约为959 bp;重组质粒经双酶切鉴定与预期结果相符;克隆的rDNA序列含有959个碱基,BLAST比对结果显示,rDNA克隆序列与Gen Bank中3株库恩双脐螺(B.kuhniana)序列的同源性为99%,与2株藁杆双脐螺(B.straminea)的同源性为98%,与1株中介双脐螺(B.intermedia)及2株亚马逊双脐螺(B.amazonica)的同源性介于96%~97%。应用邻位连接法(Neighbor-jioning,NJ)和最小进化法(Minimum Evolution,ME)2种方法构建系统发生树,深圳水库区双脐螺与3株B.kuhniana的遗传距离小,同属一个分支。结论成功克隆了深圳水库区双脐螺r DNA基因片段,其基因遗传特征与B.kuhniana双脐螺接近。     

沉默信息调节因子相关酶类1/核因子κB信号通路与2型糖尿病的关系

2型糖尿病是一种年龄、肥胖及炎症相关性疾病。随着年龄增长以及脂肪组织的积聚,炎性细胞激活以及炎性因子释放导致胰岛素靶细胞敏感性下降,形成胰岛素抵抗,即2型糖尿病前期。沉默信息调节因子相关酶类1(SIRT1)是一种组蛋白脱乙酰化酶,在哺乳动物糖脂能量代谢和生命活动中扮演重要角色;核因子κB可诱导多种炎性细胞因子,是炎性反应和细胞生存的枢纽环节。该文主要讨论SIRT1通过调节核因子κB的表达作用于2型糖尿病的发病,为2型糖尿病的预防以及治疗提供更多理论基础。