氧化性低密度脂蛋白对肝细胞脂肪积累及SIRT1-LXR信号通路的影响

目的探讨氧化性低密度脂蛋白（αLDL）对肝细胞内脂肪积累及SIRT1-LXR信号通路的影响。方法实验分为对照组、高脂（HF）组、αLDL组、HF＋αLDL组和能量限制（CR）组。将HepG2细胞培养于DMEM培养基中,培养48h后用油红O染色法定性观察和测定各组OD值、细胞内脂肪积累,并用RT—PCR法检测各组SIRT1、肝x受体（LXR）及其靶基因ATP结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达水平。结果与对照组比较,HF组、αLDL组和HF＋αLDL组细胞内脂肪含量均增加（P〈0．05）,CR组脂肪含量下降（P〈0．05）。αLDL组与对照组比较,SIRT1、LXRct和ABCG1mRNA表达均增加,其中SIRT1和LXRα差异有统计学意义：HF组SIRT1和LXRα表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,而ABCG1显著降低（P〈0．05）;HF＋αLDL组LXRα和ABCG1表达均显著降低（P〈0．05）,而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义;CR组LXRα和ABCG1表达均显著增加（P〈0．05）,然而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义。结论αLDL可能会促进脂肪肝的形成。     

短期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

目的：探讨短期能量限制对雌性大鼠生殖寿命的影响。方法：21只8周龄雌性sD大鼠随机分为对照组和能量限制组,并监测大鼠体质量及动情周期变化,8周后取大鼠卵巢,其切片由苏木精．伊红染色,观察存活卵泡数和不同发育阶段的卵泡比例。结果：对照组体质量持续上升,能量限制组较平缓。能量限制组健康卵泡（135．3．4±11．7）比对照组（90．7±7．1）多（P〈0．05）,原始卵泡数（57．7±7．7）与对照组（19．4±4．0）比显著增多（P〈0．001）,原始卵泡比例（41．9±2．9）比对照组（20．5±3．5）要多（P〈0．01）,而发育和成熟卵泡比例与对照组比则降低。结论：短期能量限制可能通过抑制卵泡发育启动、减少每个周期成熟卵泡的个数来降低卵泡消耗,有益于生殖寿命延长。     

一个含有25 bp内含子的阴道毛滴虫Rab1-like新基因

目的 克隆和鉴定一个新的阴道毛滴虫Rab1-like基因(TvRab1-like)及其内含子.方法 我们从一阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离出一个cDNA克隆,它与各物种的Rab家族蛋白有较高的同源性,因此我们进一步用BLASTP、RPS-BLAST、ClustalW和MEGA3等分析软件对该cDNA克隆进行了序列分析和进化树分析;用PCR和RT-PCR等技术分别对该基因组和mRNA进行了扩增和测序分析.结果 序列分析结果表明该cDNA克隆长705 bp,开放阅读框具603 bp,推测肽链含有200个氨基酸.序列比较分析结果提示该cDNA克隆所推测的蛋白质是一个Rab1亚家族的亚型.进化树分析也表明它属于阴道毛滴虫Rab1亚家族.基因组PCR扩增和测序分析表明该基因包含一个25 bp的内含子,该内含子具有阴道毛滴虫和其它真核生物较大内含子所具备的典型的5'GT-AG-3'和分支位点基序.RT-PCR产物及其测序分析表明在该基因的转录本中存在着未剪切和剪切后的mRNA,说明确实有内含子的存在.结论 TvRab1-like基因属于阴道毛滴虫Rab1亚家族,该基因含有一个25 bp的内含子.该内含子是至今发现的最小的阴道毛滴虫基因内含子之一,很可能也是真核生物中最小的内含子.对诸类最低等真核生物内含子的研究将有助于我们理解真核生物内含子的起源和进化.     

几种化疗药物杀原头蚴的效果比较

离体试验0.062～0.25％新洁尔灭,0.125～O.25％醋酸,O.1～O.2％安替福民和0.05～0.2％麝香草酚溶液均具有较强的杀原头蚴作用。均在5～10分钟内可达到100％杀死原头蚴的效果,作用迅速可靠,毒性小。原头蚴与药液接触后可在2～3分钟内出现皮层起泡、起刺、皮层分离、溶解及虫体发暗、钙粒减少等形态结构变化,原头蚴经药液处理10分钟后,给小白鼠腹腔接种,均未发育成棘球蚴。原头蚴经10％甲醛和3％双氧水溶液处理10分钟,死亡率(染色法的着色率)分别为5.2％和O,用5％甲醛和1.5％双氧水溶液处理原头蚴10分钟后接种小鼠腹腔其感染率分别为16.6％和22.2％。     

应用间接荧光抗体试验诊断包虫病

用原头蚴作抗原作间接荧光抗体试验(IFA)诊断包虫病,并与临床常规检查皮内试验(ID)、间接血凝试验(IHA)、对流免疫电泳试验(CIEP)的结果比较。102例经手术证明包虫病用间接荧光抗体进行诊断,阳性率为92.1％,45例非包虫病人和131例正常人假阳性率为1.7％。ID阳性率为93.1％,假阳性率为9.6％。IHA阳性率为87.2％,假阳性率为1.1％。CIEP阳性率为74.5％,假阳性率为1.7％。试验证明IFA对包虫病有较高的敏感性和特异性,操作简单,可供临床诊断和包虫病普查工作选用。     

一个含有25bp内含子的阴道毛滴虫Rabl-like新基因

目的 克隆和鉴定一个新的阴道毛滴虫Rabl-like基因（TvRabl-like）及其内含子。方法 我们从一阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离出一个cDNA克隆，它与各物种的Rab家族蛋白有较高的同源性，因此我们进一步用BLASTP、RPS-BLAST、ClustalW和MEGA3等分析软件对该cDNA克隆进行了序列分析和进化树分析；用PCR和RT-PCR等技术分别对该基因组和mRNA进行了扩增和测序分析。结果 序列分析结果表明该eDNA克隆长705bp，开放阅读框具603bp，推测肽链含有200个氨基酸。序列比较分析结果提示该cDNA克隆所推测的蛋白质是一个Rabl亚家族的亚型。进化树分析也表明它属于阴道毛滴虫Rabl亚家族。基因组PCR扩增和测序分析表明该基因包含一个25bp的内含子，该内含子具有阴道毛滴虫和其它真核生物较大内含子所具备的典型的5’GT-AG-3’和分支位点基序。RT-PCR产物及其测序分析表明在该基因的转录本中存在着未剪切和剪切后的mRNA，说明确实有内含子的存在。结论 TvRabl-like基因属于阴道毛滴虫Rabl亚家族，该基因含有一个25bp的内含子。该内含子是至今发现的最小的阴道毛滴虫基因内含子之一，很可能也是真核生物中最小的内含子。对诸类最低等真核生物内含子的研究将有助于我们理解真核生物内含子的起源和进化。     

植物原油与地沟油拉曼光谱谱图的分析研究

目的建立一种简便、快速、准确的鉴别植物原油与地沟油的检测方法。方法以10个品种(大豆、葵花籽、玉米、茶籽、花生、菜籽、橄榄等原油以及初榨棕榈油、初榨棕仁油、初榨芝麻油)的106份正常植物原油和11批次的精炼地沟油为样品,通过扫描样品的拉曼光谱,比对谱图的形态特征,谱图一阶导数处理和数据分析等,确立结果判定的方法和程序。并通过对234份勾兑样品的检测,初步评估新建方法的准确性。结果精炼地沟油和正常植物原油相比,其拉曼光谱呈现出拉曼强度高(达到105数量级)、平滑包状的特点,而后者除玉米原油和初榨芝麻油外,拉曼强度较低(仅在104数量级),均无平滑包状的特点,且油脂固有成分对应的各种谱带清晰可见。精炼地沟油的一阶导数图谱中2 839 cm-1的峰高值均为负值,正常植物原油均为正值。确定的植物原油一阶导数图谱中2 944和2 839 cm-12峰强度比值的下限值最高为-0.851,最低为-3.015。运用新建方法对勾兑样品(5%、10%、20%地沟油勾兑植物原油)进行判定,10%勾兑样品的正确检出率达到了80%以上;20%勾兑浓度的地沟油勾兑样品检测的准确率达到了100%。结论地沟油拉曼光谱图与植物原油拉曼光谱图有显著不同,可作为鉴别地沟油的参考依据。     

嗜人按蚊雌蚊差异表达基因的鉴定及全长cDNA的克隆

目的鉴定和克隆嗜人按蚊雌蚊差异表达基因并对基因序列进行分析。方法以嗜人按蚊为试验模型,根据差异表达基因EST序列(GenBankTM接受号:EX916923)设计引物,采用实时定量PCR(real-time PCR)和RACE(rapid amplifica-tion of cDNAend)技术对雌蚊差异表达基因进行鉴定并扩增其cDNA序列。结果利用F=2-△△CT公式计算出雌蚊差异表达基因在雌蚊和雄蚊中的表达比值为267.49;差异表达基因全长mRNA序列为364bp,开放阅读框(ORF)编码的氨基酸序列经BLAST分析与致倦库纹(Culexquinque fasciatus)结构蛋白(tectin)及其他物种蛋白序列具有相似性。序列发送至NCBI获得接受号:FJ907236。结论该基因为雌蚊差异表达的基因,其全长mRNA序列的获得为进一步研究其生物学功能奠定了基础。