pcDNA3.1(-)/PSMA7真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达

目的 构建pcDNA3.1(-)/PSMA7真核表达质粒并建立人肺腺癌细胞株A549的稳定表达株.方法 采用RT-PCR法从正常人支气管上皮细胞株HBE135-E6E7中克隆得到PSMA7 cDNA全长序列,将之与pMD18-T载体连接.双酶切和测序鉴定后,再将PSMA7片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)上.构建好的pcDNA3.1(-)/PSMA7真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后,经脂质体转染法转入A549细胞株中,经CA18筛选,得到阳性克隆细胞株,再用RT-PCR及Westem blotting法检测转染后PS-MA7的mRNA及蛋白表达水平.结果 pcDNA3.1(-)/PSMA7质粒经双酶切鉴定和DNA测序证实.目的 基因PSMA7的序列完全正确,真核表达质粒构建成功.RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1(-)/PSMA7组的PSMA7 mRNA表达水平(2.698±0.661)明显高于未转染组(1.243±0.176)和转染pcDNA3.1(-)组(1.198±0.514,P<0.05),后两者间无明显差异.Western blotting检测同样显示,转染pcDNA3.1(-)/PSMA7组的蛋白表达水平(1.978±0.661)明显高于未转染组(0.891±0.234)和转染pcDNA3.1(-)组(0.782±0.375,P<0.05),后两组间亦无明显差异.结论 成功构建了PSMA7基因的真核表达质粒,并建立了稳定表达PSMA7的A549细胞株,为后续研究奠定了基础.     

多学科综合治疗协作组诊治原发性主动脉附壁血栓致腹主动脉骑跨栓

原发性主动脉附壁血栓(primary aortic mural thrombus, PAMT)致腹主动脉骑跨栓是指在主动脉内无动脉粥样硬化或动脉瘤因素情况下, 附着于主动脉壁上的血栓, 其破裂碎片骑跨在腹主动脉末端分叉处, 导致两侧髂总动脉的血流阻断, 引起双下肢急性缺血综合征。北京协和医院血管外科于2022年收治了1例PAMT致腹主动脉骑跨栓, 经多学科协作团队讨论及评估后进行了全身抗凝、升主动脉开放手术、股动脉切开取栓和腹主动脉及双髂动脉球囊扩张支架置入术治疗, 术后患者恢复较好。现就本例患者的诊断和治疗过程进行总结, 以期为PAMT致急性下肢缺血甚至腹主动脉骑跨栓的诊疗模式提供参考。     

双腕二分舟骨一例

患者 男, 43岁, 6 d前左腕轻微扭伤后出现左腕部疼痛、肿胀, 症状逐渐加重伴活动受限, 于外院拍X线片诊断为左腕关节陈旧性骨折, 否认既往左腕明显外伤史。临床检查:左腕关节无明显畸形, 轻度红肿, 无皮下淤斑, 左腕桡背侧有压痛, 活动时疼痛加重, 鼻烟窝处无压痛, 腕舟骨移动实验(Watson′s test)阴性。双侧舟骨位X线示双腕二分舟骨;左腕关节CT可见左舟骨腰部透亮线影, 将其分为独立、边缘较为光滑的两块舟骨, 且骨密度基本相同(图1)。尿酸值为581.4 μmol/L, 高于参考值(134～416 μmol/L)。结合病史、专科检查、影像学检查以及实验室检查后考虑患者可能是高尿酸导致的腕关节痛风性滑膜炎, 予口服非甾体类抗炎药物后症状缓解, 未行手术治疗。     

区域阻滞麻醉与老年患者术后神经系统功能、病死率关系的研究进展

背景 区域阻滞麻醉应用于老年患者手术日益增多,其对老年患者术后神经系统功能、病死率的影响有待总结. 目的 通过文献综述,分析区域阻滞麻醉对老年患者术后神经系统、病死率的影响. 内容 讨论区域阻滞麻醉与老年患者术后神经系统功能,包括术后谵妄、认知功能障碍、脑卒中以及与病死率之间的关系. 趋向 区域阻滞麻醉可以减少老年患者术后肺部并发症,减少术后早期认知功能障碍,与全身麻醉相比,具有一定优势.区域阻滞麻醉是否能降低老年患者术后病死率、心血管并发症发生率、谵妄发生率、围手术期脑卒中发生率尚有待于进一步研究.     

新外膜技术在急性A型主动脉夹层根部修复中的应用

目的评估新外膜技术在急性A型主动脉夹层根部修复的安全性和有效性。方法回顾性分析北京安贞医院2019年1月至2022年2月期间外科治疗的94例急性A型主动脉夹层患者。根据主动脉根部处理方式的不同, 分为新外膜技术组(58例)和Bentall组(36例), 比较两组患者围手术期资料及术后随访结果, 分析新外膜技术在急性A型主动脉夹层中的疗效。结果全部患者无手术死亡, 新外膜技术组和Bentall组术后30天病死率分别为3.4%和5.6%(P=0.636)。新外膜技术体外循环时间[(154.3±29.8)min, P<0.001]及主动脉阻断时间[(94.7±20.6)min, P<0.001)]均显著缩短, 术后主动脉瓣反流情况较术前明显好转(0.33±0.50对1.02±0.80, P<0.001)。术后随访无主动脉根部相关性二次干预发生。两组患者生存率差异无统计学意义(P=0.248)。结论新外膜根部修复术是一种安全、可行的急性A型主动脉夹层根部处理方法, 近、中期疗效确切。     

基于病人自体肿瘤细胞体外培养模型的个体化精准用药

精准医疗概念的提出为肿瘤治疗开创了新的时代。利用基因测序技术精准地找到患者基因突变靶标,采取针对性的化疗药物治疗,对癌细胞完成"精确打击"成为肿瘤治疗的新模式。然而,由于癌细胞基因的不稳定性,仅仅采用基因测序这种间接方式,在大多数情况下并不足以给出最合理的用药方案。而精准医疗不仅仅是基因测序,还包括了多层面医疗技术的使用。利用病人自体肿瘤细胞体外模型对候选药物或药物组合进行精确的药理分析和药效检测,是一种更为直接、更为准确的肿瘤诊治模式。将基因筛选与体外肿瘤模型分析相结合,可以更大程度上的筛选出对病人个体有效的化疗药物,从而最终实现对患者进行个体化精准用药的目的。本文对基于病人自体肿瘤细胞体外模型指导个性化用药的发展历程、现状及未来展望进行了综述。     

基于中医传承辅助平台分析针灸治疗乳腺增生病的选穴组方规律

目的基于中医传承辅助平台(V2. 5),将临床研究文献进行数据挖掘,分析针灸治疗乳腺增生病(hyperplasia of mammar glands,HMG)的腧穴配伍规律,总结针灸治疗HMG的核心处方,为临床应用针灸治疗HMG提供可行的参考数据。方法检索2010年1月-2019年12月中国知网期刊数据库(CNKI)、万方数据库(WANFANG)、维普数据库(VIP)和中国生物医学文献服务系统(CBM) 4个数据库中收录的针灸治疗HMG的临床研究文献,通过排除和纳入标准进行筛选,将其中符合标准文献的针灸处方等信息录入中医传承辅助平台,采用软件集成的数据挖掘方法,分析针灸治疗HMG的腧穴配伍规律。结果共筛选纳入394篇文献,涉及112个腧穴;使用频次居于前10位的腧穴依次为膻中、乳根、足三里、屋翳、太冲、肩井、肝俞、天宗、合谷、三阴交。结论针灸治疗HMG的选穴以足阳明胃经、任脉、足厥阴肝经腧穴为主,本研究得到的腧穴配伍规律和核心处方可为临床治疗HMG提供参考。     

全科专业住院医师规范化培训学员职业倦怠及其影响因素研究

背景　全科医师是初级医疗保健体系和分级诊疗的重要支点,全科专业住院医师规范化培训（以下简称全科住培）是培养高素质全科医师最重要的渠道,但目前我国的执业现状使学员易产生职业倦怠,分析其职业倦怠影响因素可为完善全科住培管理和壮大全科医师队伍提供依据。目的　了解全科住培学员职业倦怠现状,并分析其影响因素。方法　2019年3-4月,从江苏省13个市各抽取1家国家级全科住培基地,基地内全科学员全样本调查,共抽取682名学员。采用自制社会人口学调查表、职业倦怠普适量表调查学员的职业倦怠情况,采用多元线性回归分析探讨全科住培学员职业倦怠的影响因素。结果　共发放问卷682份,回收有效问卷604份,有效问卷回收率为88.6%。职业倦怠3个维度情绪耗竭维度得分为（15.34±7.02）分、去个性化维度得分为（9.17±6.36）分、个人成就感低落维度得分为（13.61±8.12）分。零倦怠检出率为43.7%（264/604）,轻度职业倦怠检出率为27.3%（165/604）,中度职业倦怠检出率为21.5%（130/604）,重度职业倦怠检出率为7.5%（45/604）。体育锻炼次数、睡眠时长是全科住培学员情绪耗竭的影响因素（P<0.05）;学历、体育锻炼次数、睡眠时长、参加住培年度、收入水平是全科住培学员去个性化的影响因素（P<0.05）;性别、身份归属和体育锻炼次数是全科住培学员个人成就感低落的影响因素（P<0.05）。结论　全科住培学员职业倦怠检出率较高。体育锻炼次数、睡眠时长、参加住培年度、收入水平、学历、性别、身份归属是全科住培学员职业倦怠的影响因素。建议加强全科住培学员体育锻炼和心理建设、探索构建“行业社会人”的培养模式、夯实基层基地的建设、提高全科住培学员薪资待遇等,来缓解或降低其职业倦怠程度。     

原发于腰骶椎旁滑膜肉瘤1例报告

滑膜肉瘤是具有向不同程度上皮分化的间叶组织来源恶性肿瘤,好发于四肢远端或关节旁,原发于脊柱旁病例少见。本文报道一例罕见的青年女性腰骶椎旁滑膜肉瘤,MRI上病变信号不均匀,有分隔,侵犯周围骨质,邻近椎间孔、骶孔扩大。本文旨在通过病例分析和文献复习加强对该疾病的影像学特征的认识并指导临床诊疗。     

中小学校新型冠状病毒肺炎疫情防控指南

《中小学校新型冠状病毒肺炎疫情防控指南》可对中小学校疫情防控体系建立及开学前、开学期间和开学后的新型冠状病毒肺炎疫情防控等方面提出指引,适用于新型冠状病毒肺炎疫情期间为中小学校的防控工作提供必要的技术性帮助。