中国人语前非综合征性耳聋患者GJB2基因的突变分析

目的 分析中国人语前非综合征性耳聋（ＮＳＨＩ）患者ＧＪＢ２基因编码区的突变。方法 采取来自浙江地区４３个独立家系的４３例语前ＮＳＨＩ患者（包括隐性遗传和散发性）血样,用３对引物经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＧＪＢ２基因,产物依次部分重叠覆盖全部编码区１～６８１ｂｐ片段;用单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析法进行突变筛选,部分异常带型的ＰＣＲ产物经Ｔ克隆、ＤＮＡ测序以明确突变方式;对有ＧＪＢ２基因突变的部     

N-甲基-D门冬氨酸受体复合物亚单位蛋白的组成及其在发育过程中表达的研究

本研究通过用重组DNA技术制备NMDA受体亚单位融合蛋白并免疫动物获得相应的特异性抗体,采用定量免疫印迹技术系统研究了大鼠、小鼠和人类不同脑区NMDA受体亚单位NR1、NR2A及NR2B在不同发育阶段的表达。并经免疫沉淀和定量免疫印迹分析,获得了有关天然NMDA受体亚单位组成的结果:成年大鼠皮层组织的主要受体亚型     

人细胞色素P450 1A1与谷胱甘肽S-转移酶的融合蛋白及其抗体的制备

采用融合蛋白技术原核表达CYP1A1（第241-381个氨基酸）与谷胱甘肽S-转移酶（GST）的融合蛋白作为抗原,用于制备CYP1A1多克隆抗体. 根据正反重组质粒pGEX/1A1表达的融合蛋白大小不同的原理,直接表达筛选得到正向重组质粒pGEX/1A1. 通过优化表达条件, 提高了目的蛋白的表达水平. 包涵体蛋白经制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离, 获含纯化融合蛋白GST-1A1的PAGE凝胶. 直接用含GST-1A1的凝胶悬液免疫BALB/c小鼠,自腹水中获取CYP1A1多克隆抗体（1A1pAb）. 1A1pAb用切胶纯化的融合蛋白GST-2B6交叉吸收,蛋白A- Sepharose亲和层析柱来纯化. 用切胶纯化的融合蛋白GST-1A1及GST-2B6的免疫印迹反应初步鉴定1A1pAb的特异性. 纯化的1A1pAb对融合蛋白GST-1A1反应特异性较强,但仍对GST-2B6有弱交叉反应. 在实际应用中可根据反应强度来加以区分.     

人细胞色素P450 1A1与谷胱甘肽S-转移酶的融合蛋白及其抗体的制备

采用融合蛋白技术原核表达 CYP1 A1 (第 2 4 1- 381个氨基酸 )与谷胱甘肽 S-转移酶 (GST)的融合蛋白作为抗原 ,用于制备 CYP1 A1多克隆抗体 .根据正反重组质粒 p GEX/ 1 A1表达的融合蛋白大小不同的原理 ,直接表达筛选得到正向重组质粒p GEX/ 1 A1 .通过优化表达条件 ,提高了目的蛋白的表达水平 .包涵体蛋白经制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离 ,获含纯化融合蛋白 GST- 1 A1的 PAGE凝胶 .直接用含 GST- 1 A1的凝胶悬液免疫 BALB/ c小鼠 ,自腹水中获取 CYP1 A1多克隆抗体 (1 A1 p Ab) . 1 A1 p Ab用切胶纯化的融合蛋白GST- 2 B6交叉吸收 ,蛋白 A- Sepharose亲和层析柱来纯化 .用切胶纯化的融合蛋白 GST- 1 A1及 GST-2 B6的免疫印迹反应初步鉴定 1 A1 p Ab的特异性 .纯化的 1 A1 p Ab对融合蛋白 GST- 1 A1反应特异性较强 ,但仍对 GST- 2 B6有弱交叉反应 .在实际应用中可根据反应强度来加以区分     

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景：体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。 目的：探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。 方法：Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。 结果与结论：与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。     

付出-获得不平衡量表中文版的信度和效度

目的 评价付出-获得不平衡（ERI）量表中文版的信度和效度.方法 采用中文版ERI量表对4782名不同职业人群进行工作压力的横断面调查,量表包括付出、获得和超负荷三部分23个条目.运用可靠性分析来评价ERI量表的信度,运用因子分析方法来评价ERI量表的结构效度.结果 研究中获取的调查数据支持付出-获得不平衡模式的理论假设;中文版ERI量表中付出和获得子量表的信度和效度均较高,但是超负荷子量表的信度和效度均不高.结论 ERI量表中付出、获得子量表可以直接应用于中国人群的调查,但是超负荷子量表中条目不能直接用于中国人群的调查.     

公交司机付出-获得不平衡与抑郁症状关系

目的 研究公交司机付出-获得不平衡与抑郁症状之间的关系。方法 付出-获得不平衡采用付出-获得不平衡(Effort-Reward imbalance,ERI)量表进行测量;抑郁情绪调查采用美国流调中心的抑郁自评量表(Center for Epidemiologic Studies Depression Scale,CES-D)对浙江省307名公交司机进行横断面调查。采用单因素和多元Logis-tic回归进行抑郁症状的影响因素分析。结果 公交司机抑郁症状阳性率为67.10%,其抑郁症状与工作中付出-获得不平衡、超负荷、性别、喜欢旅游和球类运动等因素有关(P<0.05)。结论 公交司机工作中付出-获得不平衡对其抑郁症状有负面影响。     

真核生物水稻的苯丙氨酸氨解酶基因在原核生物大肠杆菌BL21DE3中的表达

目的：研究真核生物水稻的苯丙氨氨氨解酶基因在原核生物大肠杆菌中表达及其规律,为酶替代疗法治疗苯丙酮尿症及某些肿瘤治疗奠定基础。方法：根据水稻苯丙氨酸氨解酶基因序列,在ＡＴＧ下游１３１－１１２碱基处设计引物：５’ＴＧＧＡＴＣＴＴＧＡＣＣＡＧＣＧＧＣＴ３’,对质粒ｐＵＣ１９－ｒＰＡＬ－１－ｃＤＮＡ（日本国立农业生物研究所Ｅｉ－ｉｃｈｉＭｉｎａｍｉ惠赠）中的ｒＰＡＬ－１－ｃＤＮＡ进行反向测序,根据ｃＤＮＡ测序结果及质粒ｐＥＴ－２８系列中阅读框架结构选定ｐＥＴ－２８ｃ作为载体,用ＥｃｏＲＩ酶将其从多克…     

我国七年制医学教育教学工作评估的实践与思考

评估表明，七年制医学教育经过十几年的实践已经取得重要成就和经验，主要有，建立了长学制的医学人才培养模式，培养了一批高质量医学人才，办学指导思想进一步明确，教学改革不断深入，教学投入持续增加等。评估也发现，七年制医学教育还存在着学生临床技能欠佳、综合性大学的优势尚未充分发挥、医学教育管理体制尚未理顺等问题，需要我们在今后的长学制医学教育改革实践中，进一步研究、探索，逐步加以解决。