儿童大肠埃希菌泌尿系感染的耐药性监测

目的 了解湖北地区儿童大肠埃希菌泌尿系感染的耐药特点及现状,为临床诊断与治疗提供科学依据.方法 对湖北地区17所三级医院儿童尿培养分离的大肠埃希菌药敏结果 进行分析,药敏试验采用K-B法.结果 在423株病原菌中,共分离出大肠埃希菌158株,占37.4%,居首位;其中检出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株112株,占70.9%;其对阿米卡星、呋哺妥因、哑胺培南的敏感率较高,在80.9%～100.0%;对阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、氟喹诺酮类及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的敏感率在20.0%～56.0%;产ESBLs株耐药率明显高于非产ESBLs株.结论 临床医师需根据药敏结果 选用抗菌药物,亚胺培南是治疗产ESBLs大肠埃希菌感染的首选药物.     

葡萄球菌属生物被膜及其基因分析

目的 确定葡萄球菌属生物被膜表型与基因型的关系.方法 收集医院2005年3月-2008年7月从临床标本分离的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)156株、金黄色葡萄球菌(SAU)90株,另外从临床医护人员健康志愿者的鼻咽拭子培养物中分离的CNS 12株;采用刚果红法检测牛物被膜表犁,PCR法扩增icaA/icaD基因,确定基因型,并同生物被膜表型结果对比分析.结果 168株CNS中,产生物被膜菌株有32株(19.0%);90株SAU中,产牛物被膜株为32株(35.6%);所有icaA阳性的菌株同时也是icaD阳性;16株icaA/icaD基因阳性株(10株CNS、6株SAU)却表现为非产生物被膜株.结论 刚果红法检测SAU生物被膜阳性率为35.6%,明显高于CNS 19.0%.ica基因阳性葡萄球菌属的非产生物被膜特性可能有助于菌株的播散,对于临床标本中分离的表皮葡萄球菌,ica 基因不能作为区分污染菌和有意义菌的标志物.     

质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr分子流行病学研究

目的了解武汉大学人民医院分离的革兰阴性杆菌中qnr基因及其所携带的广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因的流行情况。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法对129株大肠埃希菌、29株肺炎克雷伯菌和10株阴沟肠杆菌进行qnr基因检测。对qnr阳性株，检测I类整合酶基因及SHV-1、TEM-1、CTX—M、OXA—Ⅰ、OXA-Ⅱ、OXA-Ⅲ、DHA、EBC型ESBLs基因。KB纸片法检测对16种抗菌药物的体外抗菌活性，美国临床实验标准委员会表型筛选和确证试验检测产ESBLs株。质粒接合试验分析qnr基因的水平转移能力，ERIC-PCR进行DNA同源性分析。结果6株菌株检出qnr基因（5株大肠埃希菌和1株阴沟肠杆菌），肺炎克雷伯菌中未检出；6株菌仅对亚胺培南全部敏感且对多种抗生素耐药，Ⅰ类整合酶基因扩增全为阳性，其中有2株大肠埃希菌对环丙沙星敏感，4株菌携带TEM-1型ESBLs基因、1株菌携带OXA—Ⅲ型ESBLs基因、2株菌携带EBC型AmpC酶；每株菌至少携带2种以上ESBLs基因。qnr基因介导的喹诺酮类耐药具有水平转移性，DNA同源性分析有2株指纹图谱一致。结论武汉地区存在qnr基因的流行，qnr阳性株多重耐药严重，且携带多种ESBLs基因。     

葡萄球菌中两类D试验阳性表型及基因分析

目的研究葡萄球菌中红霉素对克林霉素的诱导耐药表型及基因型。方法对116株金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌进行红霉素和克林霉素双纸片扩散法药敏实验,即D试验,以检测其耐药表型。应用PCR检测大环内酯类-林可酰胺类-链阳菌素B(MLSB)耐药葡萄球菌的3种erm耐药基因,比较耐药表型同基因型的关系。结果D试验结果出现两类不同的诱导耐药阳性表型,分别为D表型和D 表型。克林霉素对8株葡萄球菌的抑菌圈在靠近红霉素一侧变钝的截面平整而清晰,为D表型;其余32株钝形截面边缘到克林霉素纸片之间生长有细小菌落,为D 表型。PCR结果显示D表型的菌株含ermA基因,而D 表型主要含ermC或者同时含有ermA和ermC。两纸片距离10~15mm有利于预测菌株的基因型。结论D试验可有效检测葡萄球菌诱导型克林霉素耐药性,且可预测其诱导耐药的基因型。两类D试验阳性表型同基因型存在相关性。