人肝癌肿瘤相关抗原HCC-22-5抗体的制备及其在肝硬化组织中表达的临床意义

目的制备抗HCC02205的多克隆抗体,探讨其与肝硬化发生、发展的关系。方法将本课题组重组构建的含HCC-22-5cDNA序列表达质粒,经表达和纯化获得HCC-22-5的融合蛋白（MBP—HCC-22-5）,免疫家兔制备出抗MBP-HCC-22-5多克隆抗体。经ELISA和Westernblot鉴定抗体的免疫活性后,用免疫组化SABC法检测49例人肝硬化组织和30例正常人肝组织中HCC-22-5的表达。结果经ELISA和Westernblot鉴定所制备的多克隆抗体可以与MBP-HCC-22-5特异性结合。HCC-22-5主要表达于肝细胞质中。HCC-22．5在肝硬化组织中的表达与性别有关,且与年龄呈正相关。结论成功制备了抗HCC-22-5的多克隆抗体;HCC-22-5的表达与肝硬化的发生、发展有关。     

七种癌-睾丸抗原基因在广西肝细胞癌中的表达

广西是肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)的高发区，其死亡率极高。尽管目前已建立了许多治疗的方法，但五年的生存率仍很低。因此急需寻求新的治疗方法，而免疫治疗正是其中新方法之一，但开展免疫治疗的前提是特异性肿瘤抗原的存在。目前己发现了众多的肿瘤相关抗原，其中一类为癌-睾丸抗原(Cancer-Testis Antigen，CTA)，     

组织学实验课的改革设想

随着２１世纪的即将到来,高等院校作为培养高级人才的重要基地,面临着比以往任何时候都艰巨的任务,几十年来沿用的一套教学模式再也不能适应新形势的发展,教育改革势在必行。而在改革的方方面面中,教学内容及教学方法的改革极其重要,作为医学基础课的教师,我们深感...     

脑胶质瘤Pten/MMAC1/Tep1基因表达的免疫组化研究

肿瘤抑制基因 Pten/ MMAC1/ Tep1于 1997年由美国 3个科研小组分别克隆 ,定位于染色体 10 q2 3.3,编码的蛋白质由 40 3个氨基酸组成 ,为一种酪氨酸磷酸酶。现除了在 Cowden病——一种常染色体显性遗传性错构瘤综合症中发现了该基因的胚系突变外 ,在许多肿瘤如胶质瘤、乳腺癌、肾癌、前列腺癌和黑色素瘤等发现了各种类型的体细胞性突变。目前有关 Pten/ MMAL 1/ Tep1的研究多集中于基因的突变和缺失 ,对基因蛋白表达的研究较少。本研究应用免疫组化 ABC法观察 2 0例人脑胶质母细胞瘤 (GBM)中Pten/ MMAC1/ Tep1基因蛋白的表达。结果…     

大肠良恶性肿瘤PTEN/MMAC1/TEP1肿瘤抑制基因的蛋白表达研究

目的 :探讨 PTEN/ MMAC1/ TEP1与大肠癌的发生 ,发展的相关性。方法 :应用 S- P免疫组织化学方法检测 2 3例正常大肠粘膜、 2 8例大肠腺瘤和 75例大肠癌组织中 PTEN/ MMAC1/ TEP1蛋白的表达情况。结果 :2 3例正常大肠粘膜组织中PTEN蛋白表达阳性率为 91.3% (2 1/ 2 3) ,2 8例大肠腺瘤组织中 PTEN蛋白表达阳性率均为 89.3% (2 5 / 2 8) ,75例大肠癌组织中 PTEN蛋白表达阳性率为 6 8% (5 1/ 75 ) ,与正常大肠粘膜及大肠腺瘤差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;有淋巴结转移的2 8例大肠癌阳性率为 43% (12 / 2 8) ,无淋巴结转移的 47例大肠癌阳性率为 83% (39/ 47) ,两者差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;有远处器官转移的 2 3例大肠癌中阳性率为 43.5 % (10 / 2 3) ,无远处器官转移的 5 2例大肠癌阳性率为 78.8% (4 1/ 5 2 ) ,差异有显著意义 (P〈0 .0 1) ;6 0例大肠腺癌中蛋白表达阳性率为 81.2 % (4 9/ 6 0 ) ,15例粘液癌蛋白表达阳性率为 13.3% (2 / 15 ) ;两者之间有显著性差异 (P <0 .0 1) ;6 0例大肠腺癌中高 /中分化大肠腺癌 37例表达阳性率为 97.3% (36 / 37) ,低分化大肠腺癌 2 3例中表达阳性率为 5 6 .5 % (13/ 2 3) ,两者差异有显著意义 (P <0 .0 1)。结论 :PTEN/ MMAC1/ TEP1与大肠癌的发生、发展有相关     

肝癌抗原特异性的检测

目的　检测两种新的人肝细胞癌 (HCC)抗原 (编号为HCC 1 8a和HCC 3 13)对HCC的特异性。方法　应用重组克隆表达抗原的血清学技术 (SEREX) ,用异体HCC血清和非HCC血清检测两种新的HCC抗原的特异性。结果　相应的抗体主要见于HCC患者 ,阳性反应率分别为 80 % (8/ 10 )及 90 % (9/ 10 ) ;胃癌为 0及 2 0 % (1/ 5 ) ;正常人各为 7.1% (2 / 2 8) ;乳癌为 0。结论　两种新的HCC抗原对HCC有高度特异性 ,可考虑作为HCC血清学诊断的指标之一。     

重组Kinectin蛋白的表达、纯化及应用研究

目的优化重组kinectin蛋白的诱导表达及纯化条件;探讨用其致敏的树突状细胞(DC)对自体T淋巴细胞增殖能力的影响。方法以pMAL-C2为载体构建重组质粒,并转入TB1宿主菌。从IPTG加入时机、诱导温度、诱导时间及IPTG浓度方面对工程菌的诱导条件进行优化;过Amylose-resin亲和层析柱对诱导产物进行分离纯化。用获取的MBP-kinectin融合蛋白致敏从人外周血中分离培养的DC,并用ELISA检测细胞上清液中的IL-12、IFN-γ含量;再用MTT法检测致敏DC刺激自体T淋巴细胞增殖的能力。结果 工程菌在37℃振荡培养2个小时后加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,降低温度到34℃继续诱导3个小时,可明显提高诱导效率;所得MBP-kinectin与DC共培养上清液中IL-12、IFN-γ含量分别为(615.32±7.93)pg/ml,(544.28±7.17)pg/ml,用其刺激的T淋巴细胞增殖指数为53.14±0.62,均高于麦芽糖结合蛋白(MBP)组和空白对照组,且差异有统计学意义。结论pMAL-C2载体可用于构建kinectin重组质粒;通过对诱导条件的优化,可获得较高的诱导效率;所得MBP-kinectin融合蛋白能致敏DC并具有很强的刺激自体T淋巴细胞增殖的能力。     

衰老标记蛋白-30在人晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的 研究人晶状体上皮细胞中衰老标记蛋白-30(senescence marker protein-30,SMP-30)的表达,探讨其在白内障发生发展中的作用及临床意义.方法 制备57例人晶状体前囊膜、4例正常人肝组织和2例正常人肾组织的石蜡切片.采用免疫组织化学SP法检测SMP-30在晶状体上皮细胞中的表达,并结合临床资料进行统计分析.结果 实验发现SMP-30在白内障晶状体上皮细胞的表达较透明晶状体弱(P＜0.05),其在晶状体上皮细胞的表达与性别、年龄未见相关性.结论 SMP-30在晶状体上皮细胞表达的减少可能导致白内障的发生.     

抗体制备的新技术

抗体的研究已有100多年的历史,其制备技术经历了血清多克隆抗体、鼠源单克隆抗体和基因工程抗体三个时期。本文就基因工程抗体制备的新技术简要综述。     

多种癌-睾丸抗原基因在广西肝细胞癌中的表达

广西地区为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的高发区。尽管目前已有许多治疗方法，但5年生存率仍很低。因此急需寻求新的治疗方法，而免疫治疗正是这些新的治疗方法中的一种。然而开展免疫治疗的前提是特异性肿瘤抗原的存在。目前已发现了众多的肿瘤相关抗原，其中一类为“癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen，CTA)，这类抗原有