黑色素瘤相关抗原-E1在胶质瘤中的表达和意义

一、材料与方法 提取总RNA(胶质瘤47例,相对正常脑组织14例),合成cDNA.     

GCF2基因片段原核表达载体的构建与鉴定

目的 构建肝癌相关抗原GCF2基因片断(323～1 234 bp)原核表达重组质粒.方法 提取人肝癌组织总RNA,通过反转录酶合成cDNA;根据GenBank公布的GCF2基因cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法扩增出人GCF2基因片断(编号2-5a),将此片段连接在克隆载体pGEM-T上进行测序,通过酶切、连接将...     

肝癌相关抗原Kinectin蛋白致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株杀伤作用的检测

目的 探讨肝癌相关抗原Kinectin基因重组蛋白Kinectin-MBP(MBP,麦芽糖结合蛋白)致敏树突状细胞(DCs)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株的杀伤作用.方法 体外基因工程的方法表达、纯化Kinectin-MBP.从正常人外周血中分离单个核细胞(PBMC),重组人粒细胞-巨噬细胞集落因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)联合培养,诱导扩增DCs,并通过形态学、流式细胞术鉴定DCs.DCs经Kinectin-MBP致敏后,ELISA检测细胞上清液中IL-12和IFN-γ的含量;将致敏DCs与自体T淋巴细胞混合培养后,MTT法检测T细胞增殖的能力;同时诱导T细胞增殖转化为CTL,以此CTL为效应细胞,Kinectin表达阳性的肝癌细胞株bel-7404为靶细胞,LDH 4 h释放法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用.结果 体外重组蛋白技术成功表达、纯化出Kinectin-MBP.PBMC经rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导,可成功培养出DCs.DCs经Kinectin-MBP致敏后上清液中IL-12和IFN-γ的分泌量明显增高,且刺激自体T细胞增殖的能力也显著增强;同时Kinectin-MBP致敏的DCs能明显诱导CTL的增殖,此CTL对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株有较明显的杀伤作用,其杀伤率在效靶比为25∶1时达最高峰[为(65.00±1.47 )％],显著高于其他对照组(均P ＜0.001).结论 体外诱导扩增的DCs经肝癌相关抗原Kinectin-MBP致敏后具有较强的刺激自体T细胞增殖的能力,且在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株具有较强的杀伤效应.该实验为将Kinectin蛋白运用于以DCs为基础的肝癌临床免疫治疗奠定了基础.     

肝细胞癌中OY-TES-1基因mRNA的表达

 目的：检测OY-TES-1基因mRNA在肝细胞癌(HCC)中的表达水平。方法:建立实时定量PCR方法,检测56例HCC及37例配对癌旁组织中目的基因OY-TES-1及看家基因HPRT的表达,OY-TES -1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示,应用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析。结果:（1）经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为73.21%（41/56）,癌旁组织阳性率为 64.86%（24/37）,有17对HCC及配对癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织中 的阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的 癌旁组织（P＜0.05）,但与HCC患者的年龄、性别等临床资料无关。结论:OY-TES-1 mRNA在HCC中有较高的表达频率,其表达水平高于对应的癌旁组织,它有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原。OY-TES-1蛋白在HCC及癌旁组织中的表达及相关意义尚值得做进一步的研究。     

Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏树突状细胞对T细胞分化格局的改变

背景：Kinectin作为树突状细胞瘤苗可运用于肝癌临床免疫治疗。 目的：检测kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞刺激T细胞亚群的分化情况。 方法：运用免疫组化法检测kinectin-麦芽糖结合蛋白孵育的树突状细胞刺激增殖的T细胞中CD4⁺、CD8⁺ T细胞亚群活化情况,同时设立麦芽糖结合蛋白组、非致敏树突状细胞组及普通培养T细胞组作为比较。 结果与结论：Kinectin-麦芽糖结合蛋白致敏树突状细胞刺激的T细胞组CD8⁺T细胞明显高于麦芽糖结合蛋白孵育树突状细胞刺激的T细胞组、非致敏树突状细胞刺激组及普通培养T细胞组(P < 0.05);各组CD4值之间、CD4/CD8值之间比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。经Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞能有效刺激自体CD8⁺ T淋巴细胞的增殖,Kinectin-麦芽糖结合蛋白作为肝癌相关抗原可通过致敏树突状细胞发挥较明显的抗肿瘤功能。     

开设双语学习室 拓展课堂教学空间

2001年国家教育部下达文件《关于加强高等学校本科教学工作,提高教学质量的若干意见》,明确提出各高校应倡导、推广双语教学。依据教育部的指导精神,结合本校实际和学生的承受能力,我们在5年制本科生、7年制本硕生中采用自愿参加的原则,由学习积极性较高的学生选择性参与,以小班制为试点进行双语教学的初步探索。在教学实践中,我们发现学生的英语水平参差不齐,对专业知识的理解和掌握也不尽相同,单一的课堂教学已不能满足教学要求。如何根据学生需要,实行分层指导?如何以学生发展为本,营造双语学习的氛围和情境?如何拓展课题教学空间,合理促进教学相长?为此,我们开设了双语学习室,旨在搭建一个具有“辅导培训、反馈交流、拓展知识”等多功能的教学平台,立足于教学、服务于学生。1组织1.1造设双语学习空间:组织胚胎学属于形态学科,需要学生把握正常人体微观的结构变化。我们在学习室墙壁粘贴了一些色彩丰富、图文并茂的相片和挂图,辅之中、英文双语说明,开辟了一个新的视觉空间,激发学生的求知欲望。1.2完善配套设施:借助光学显微镜观察切片是组织胚胎学主要的研究手段之一,实习课的时间有限,学生难以全面掌握教学内容。我们配套了数十套光学显微镜和组织切片,以...     

医学本科生组织胚胎学双语教学的调查分析

教育部办公厅在《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》中,强调指出:“积极推动使用英语等外语进行教学,按照教育面向现代化、面向世界、面向未来的要求,为适应经济全球化和科技革命的挑战,本科教育要创造条件使用英语等外语进行公共课和专业课教学。对于高新技术领域的生物技术、信息技术等专业,以及为适应我国加入WTO后需要的金融、法律等专业,更要先行一步,力争3年内,外语教学课程达到所开课程的5%~10%”。“双语教学”由英语专门术语“bilingual education”翻译而来。其定义可划分广义及狭义两种:广义的双语教育指的是,学校中使用两种语言的教育;狭义的双语教育指的是,学校中使用第二语言或外语传授数学、物理、化学、历史、地理等学科内容的教育。我国目前开展的双语教学基本符合狭义的双语教育的界定。2004年教育部《普通高等学校本科教学工作水平评估方案》中,对双语教学的要求是“用双语授课课程指采用了外文教材并且外语授课课时达到该课程课时的50%及其以上的课程。”对医学英语课的要求是“培养学生专业英语的阅读能力,使学生能以英语为工作阅读有关专业书刊、获取专业信息,为今后的工作、学习、科研打下良好的基础。...     

广西金秀瑶族15个STR基因座遗传多态性

目的:了解广西金秀瑶族群体15个STR基因座的遗传多态性。方法:Chelex-100法提取样本DNA,荧光标记复合扩增基因座,ABIPrism(3100型遗传分析仪对扩增产物进行检测。结果:15个位点共检测出113种等位基因,基因频率分布在0.0029~0.5514;366种基因型,频率分布在0.0054~0.3657之间;符合Hardy-Weinberg平衡定律;杂合度(H)分布在0.5718~0.9286,个人识别力(DP)分布在0.7241~0.9601,累积个人识别力TDP为>0.9999999999,非父排除率(EP)在0.3658~0.8783,累积非父排除率CEP为0.999999998,多态信息量PIC分布在0.4953~0.8428。结论:广西金秀瑶族15个STR基因座除TPOX基因座外,其它基因座均属于高度多态性遗传标记。     

融水苗族STR基因座D7S820、D13S317、D16S539的遗传多态性研究

目的：为了解广西融水苗族人群无关个体的3个短串联重复序列（short tandem repeat,STR）：D7S820、D13S317、D16S539遗传多态性分布情况.方法：用枸橼酸钠抗凝法采集融水苗族208份无亲缘关系的健康个体的血样（男102例,女106例）,酚-氯仿抽提法提取DNA,应用荧光标记复合扩增技术对血样DNA的3个STR基因座进行扩增,用ABI3100型遗传分析仪对扩增产物进行检测.结果：3个STR位点共检测出21种等位基因,62种基因型,频率分布分别在0.004 8～0.448 4和0.004 8～0.201 9之间,其中累积个人识别力0.998 6,累积非父排除率0.956 6,多态信息总量0.972 9;基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P＞0.05）.结论：苗族群体的3个STR位点具有高度多态性和遗传稳定性,符合孟德尔遗传规律,可以应用于个体识别和亲权鉴定,可作为广西苗族的民族遗传学研究和法医学鉴定的基础数据.     

通识教育人文并举培养复合型高素质医学人才

培养复合型高素质医学人才已成为时代的要求.文章主要分析了培养复合型高素质医学人才 的意叉以及我校如何在通识教育模式下培养复合型高素质医学人才.