胸腺基质淋巴细胞生成素受体剔降的未成熟树突状细胞调节哮喘小鼠Th1/Th2失衡的研究

目的树突细胞疫苗是治疗哮喘的新途径,文中探讨经鼻滴注基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoetin,TSLP）受体剔降的未成熟树突状细胞（immature dendritic cell,imDC）对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1/Th2免疫失衡的影响,为免疫调节治疗哮喘提供理论和实验基础。方法36只C57BL/6小鼠随机分为胸腺TSLP受体剔降的imDC治疗组（A组）、imDC治疗组（B组）和哮喘组（C组）。以卵蛋白（ovalbumin,OVA）、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组和B组分别于激发前气道内滴注100μl的细胞悬液,分别含有1×106TSLPR剔降的imDC、imDC,C组气道内滴注100μl的PBS;各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份,分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD4＋干扰素-γ（interferonγ,IFN-γ）＋、CD4＋白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）＋百分比及IFN-γ＋/IL-4＋比值,比较各组肺组织学改变。结果TSLP受体剔降的imDC治疗组与其他组比较：①可明显抑制OVA抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润（P〈0.01）;②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5,增加了IFN-γ的产生;③肺淋巴细胞CD4＋IFN-γ＋百分比及IFN-γ＋/IL-4＋明显升高（P〈0.01）,而CD4＋IL-4＋百分比则明显下降（P〈0.01）;④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前经鼻滴注TSLP受体剔降的imDC对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与抑制树突细胞TSLP-TSLP受体信号通路,调整Thl/Th2失衡有关。     

Id1强制表达对血管内皮细胞株ECV-304增殖能力的影响

[目的]为深入研究hCASK功能,构建Id1真核表达载体并转染ECV-304细胞,筛选出Id1强制表达细胞株,观察Id1上调表达对ECV-304细胞增殖能力的影响. [方法]采用RT-PCR方法获取编码Id1的cDNA序列,并将其导入真核表达载体成功构建pIRES2-EGFP-ld1重组表达质粒.将重组质粒转染人ECV-304细胞株,经G418加压筛选,成功筛选出Id1强制表达的细胞株.用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中Id1基因的表达水平.采用流式细胞技术、细胞计数的方法观察筛选出的细胞株增殖能力的变化. [结果]成功建立了Id1强制表达的ECV-304细胞株.同未转染细胞相比,Id1强制表达细胞株中G0/G1细胞比率下降约4.8%,G2M期细胞比率上升约26.3%,增殖指数明显增高,细胞增殖能力增强. [结论]Id1强制表达细胞株的成功建立和鉴定为CASK、Id1基因功能研究提供了有效手 段.Id1的上调表达可导致ECV-304细胞增殖能力增强.     

粘附分子和中性粒细胞在烧伤早期心脏和肝脏损害中的作用

本项目研究的目的主要是探讨严重烧伤早期粘附分子和中性粒细胞在心脏和肝脏损害中的作用,进一步阐明烧伤后脏器损害的发病机制,特别是粘附分子和中性粒细胞在其中的关键作用,为烧伤后脏器损害的防治提供理论依据。项目采用多种现代化实验技术,如RT-PCR、原位杂交、流式细胞仪