弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析

目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。     

尿酸盐致血管内皮细胞损伤的机制

目的观察不同浓度尿酸盐对人血管内皮细胞损伤相关因子表达的影响,明确高尿酸血症对人血管内皮细胞的损伤的机制。方法体外单独培养人血管内皮细胞或与单核细胞共培养,尿酸盐分别用6．6mg／dl（约为人体男、女高尿酸血症最低值平均值）及该值2、3、4、5倍值刺激血管内皮细胞48小时,用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）测定上清液白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-d）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血浆纤溶酶原激活抑制剂-1（PAI-1）等因子表达水平,用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PcR）测定血管内皮细胞人尿酸盐转运子（hUAT）mRNA的表达。结果①不同浓度尿酸盐与血管内皮细胞单独培养：结果显示高浓度尿酸盐使血管内皮细胞IL-l、TNF-Ⅸ、ICAM-1、PAI-1的表达上调,明显高于对照组（P均〈0．05）;②不同浓度尿酸盐与血管内皮细胞及单核细胞共培养：结果显示高浓度尿酸盐使血管内皮细胞IL-1、TNF-α、ICAM-1、PAI-1的表达进一步增高,明显高于对照组（P均〈0．05）;③hUATmRNA表达：高浓度尿酸盐使血管内皮细胞hUATmRNA表达明显低于对照组（P〈0．05）;与单核细胞共培养高浓度尿酸盐使血管内皮细胞hUATmRNA表达明显进一步下调（P〈0．05）。结论尿酸盐可以作为独立的危险因素引起内皮细胞的直接损伤,单核细胞在内皮细胞损伤过程中亦起到了重要作用,血管内皮细胞和单核细胞共培养使血管内皮细胞损伤进一步加重。     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与中国汉族人1型糖尿病、自身免疫性甲状腺病的相关性研究

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA－4）基因外显子1的49位点A／G多态性与中国汉族人1型糖尿病、自身免疫性甲状腺病（AITDs）的关系。方法 对33例典型1型糖尿病患者、57例成人晚发自身免疫性糖尿病患者（LADA）、122例自身免疫甲状腺疾病患者（AITDs）和84例健康对照者采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）技术分析CTLA－4基因外显子1的49位点基因型。结果 1型糖尿病患者的CTLA－4G等位基因频率显著高于对照组（P＝0．0005）;胰岛细胞抗体和谷氨酸脱酶脱羧酶抗体阳性率与G无明显相关性。AITDs患者CTLA－4G等位基因频率高于对照组（P＜0．0001）;Graves病组按性别分层分析后发现G等位基因在不同性别的分布差异无显著性。12例AITDs患者同时合并糖尿病,其CTLA－4G等位基因频率与单纯AITDs患者相比差异无显著性。结论 CTLA－4基因外显子1多态性与中国汉族人1型糖尿病、AITDs有关,G等位基因是1型糖尿病、AITDs的危险因素之一。     

CD44V6对实验性大肠癌肝转移影响的实验研究

目的:研究 CD44V6在大肠癌肝转移中的作用,探索一种有效的抗肿瘤转移方法。方法:应用大肠癌肝转移模型来研究 CD44v6单抗对大肠癌 HT29、Lovo 细胞裸鼠实验性肝转移的影响,分析 CD44V6单抗在抗大肠癌肝转移中的作用。结果:CD44V6单抗能有效阻断裸鼠实验性大肠癌肝转移的发生。     

膨体聚四氟乙烯补片无张力疝修补术57例临床观察

无张力疝修补手术使疝的治疗发生了根本变化，并在国内外逐渐广泛开展。作者于２０００年９月至２００２年９月应用膨体聚四氟乙烯补片行无张力疝修补术５７例，取得较好效果，报道如下。１资料与方法１．１一般资料本组５７例，男４１例，女１６例，平均年龄５６（２３～８７）岁，６０岁以上３１例，占５４．３９％；左侧１８例，右侧３９例，４１例为腹股沟斜疝，３例为腹股沟直疝，１３例为嵌顿疝，术前有各种并存症２１例（心肺功能不全、高血压、前列腺肥大等）。１．２材料美国Gore公司生产的膨体聚四氟乙烯５cm×１０cm×０．１cm…     

冠状动脉旁路移植术后血栓形成和再狭窄影响因素的研究现状

<正>冠状动脉旁路移植术(CABG)后,每年有4%～8%的患者可能再次出现心绞痛等心肌缺血症状,血栓形成和再狭窄是其主要原因之一。CABG同时损伤冠状动脉和旁路血管,血流动力学发生紊乱,表现为血管舒张或血管收缩减弱,引起内皮细胞缺乏和吻合口局部血栓形成,同时血管平滑肌细胞的增生使局部内膜增厚,这是形成旁路血管内膜迁移和增生以及导致粥样硬化的基础。再狭窄是一个复杂的生物     

卷曲霉素致药物超敏综合征1例报告

患者男,26岁。因"全身红斑伴发热7 d"于2010年12月9日来我院就诊。8年前患者因反复阵发性咳嗽伴胸闷,在当地医院诊断为肺结核,间断口服抗结核药物治疗,具体药物及剂量不详,效果较差,并多次出现咯血症状,遂来我院就诊。依药敏结果于8月份开始给予利福布丁、力克肺疾、克拉霉素、乙胺丁醇等药物规律治疗,2个月后仍有咯血症     

内皮型一氧化氮合酶和N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与苏皖地区汉族人群早发冠心病易感性的相关关系

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第7外显子G894T突变和N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变与苏皖地区汉族人群早发冠心病(PCAD)发病的关系.方法 采用病例对照研究的方法,应用聚合酶链反应-限制性片长多态性(PCR-RFLP)技术,分别检测131例PCAD患者(PCAD组)和131例年龄、性别相匹配的无冠心病者(对照组)的eNOS和MTHFR基因的单核苷酸多态性,判定其基因型并统计各基因型及等位基因的频率.结果 eNOS基因G894T多态性在PCAD组和对照组中的基因型分布(x2=2.072,P=0.355)和T等位基因频率(x2=0.727,P=0.394)差异均无统计学意义.MTHFR基因C677T基因型在PCAD组CT和TT型分布均高于对照组(x2 =14.290,P=0.001),T等位基因频率亦高于对照组(x2=16.339,P =0.000),差异有显著性(P＜0.05).Logistic回归分析显示,携带MTHFR基因C677TTT基因型是PCAD发病的独立危险因素.结论 eNOS基因G894T多态性可能与苏皖地区汉族人群PCAD发病无关;MTHFR基因677C/T多态性的TT基因型可能增加苏皖地区汉族人群PCAD的患病风险,T等位基因可能是PCAD的遗传易感基因.     

α-硫辛酸注射液对2型糖尿病患者周围神经病变的疗效和安全性

目的观察α-硫辛酸对合并周围神经病变的2型糖尿病患者的疗效和安全性。方法于2009年8B至2010年3月入选16家医院284例合并周围神经病变的2型糖尿病患者,在基础降糖治疗上加用仅．硫辛酸600mg,静脉滴注1次／d,共10～14d,考察治疗前后周围神经病变的总症状评分（TSS）等疗效指标和不良反应。治疗前后疗效比较采用配对t检验。结果研究中有15例患者因自身原因提前出院而退出研究,故实际共269例患者完成研究。α-硫辛酸注射液治疗至少10d后的平均TSS较治疗前明显降低[（3．4±2．2）比（6．7±2．6）分,t=25．31,P〈0．01],有效率为73．2％。TSS评分中刺痛、烧灼感、感觉减退和麻木症状评分均较治疗前明显缓解,差异均有统计学意义（t=20．82、16．29、16．82、22．49,均P〈0．01）。Pearson相关分析显示,α-硫辛酸的疗效（即TSS评分改善）与患者的疗程满14d、治疗前神经症状严重程度、血糖降低幅度、治疗前血糖水平呈显著正相关（r=0．125、0．602、0．150、0．172,均P〈0．05）,与尿微量白蛋白呈显著负相关（r=－0．200,P〈0．05）,与患者的年龄、性别、糖尿病病程、肥胖无关（r=－0．027、－0．083、－0．076、－0．115,均P〉0．05）。99．2％（267／269）的医师和97．8％（263／269）的患者对疗效满意。研究过程中仅有2例患者出现轻度头晕和皮疹,未经特殊处理自行缓解。结论α-硫辛酸治疗2型糖尿病合并周围神经病变可以显著改善患者的神经病变症状,且具有良好的安全性。     

收缩功能保持的心力衰竭

收缩功能保持的心力衰竭(HFpEF)又被称为收缩功能正常的心力衰竭(HFnEF),以往被称为舒张性心力衰竭(DHF).收缩功能障碍一定伴有舒张功能障碍,严重者可引起充盈压增高;而舒张功能障碍也会影响收缩功能,患者可存在左心室壁心肌纵向运动异常[1,2],但心脏整体收缩功能可保持正常或基本正常.影响舒张功能的主要因素是各种原因引起的心肌基质增生和心内膜、心包纤维化等,典型的疾病如高血压、肥厚型心肌病等.当高血压引起左心室向心性重构和肥厚时左心室舒张特性发生变化,左心室松弛和充盈受损即发生舒张功能不全.左心室舒张功能不全常发生在收缩功能改变之前.患者初期可能无症状,一旦出现心力衰竭症状和体征则称之为HFpEF.