视黄酸依赖反义cyclin D1对HL-60细胞分化效应研究

目的 检测视黄酸(Retinoic acid，RA)依赖反义cyclin D1表达载体转染HL-60细胞后启动的诱导分化效应，并探讨其分子机制。方法 成功构建视黄酸依赖反义cyclin D1表达载体，以脂质体转染HL-60白血病细胞，经NBT还原实验、免疫荧光检测CD14表面抗原表达、RT-PCR以及Western blot等方法观测视黄酸处理后细胞分化效应的发生以及Rb基因的mRNA和蛋白表达水平的改变。结果 反义eyelin D1转染和未转染的HL-60细胞经RA处理后，NBT还原能力明显增强、CD14表面抗原表达显著增加，Rb基因的mRNA和蛋白表达水平均有所降低，其中，以反义cyclin D1转染细胞经RA处理后变化更为明显。结论 RA及其诱导的反义cyclin D1可协同诱导HL-60细胞分化成熟，下调Rb基因表达可能是其分子机制之一。     

三羟异黄酮对乳腺癌影响的研究进展

三羟异黄酮是一种植物雌激素，具有弱的雌激素、抗雌激素双重活性，在体内、外低浓度时促乳腺癌细胞增殖。拮抗抗雌激素类乳腺癌治疗药物他莫昔酚的作用，在体外高浓度时却表现出相反的效应。三羟异黄酮能促进乳腺癌细胞的凋亡。三羟异黄酮可通过ER、非ER途径，影响生长因子及受体、细胞周期蛋白和凋亡相关基因的表达，调节乳腺癌细胞的增殖与凋亡。曾患乳腺癌者应注意它可能具有潜在的促乳腺癌生长的危险性。     

实时荧光定量 PCR 在皮肤结核诊断中的应用

目的：比较实时荧光定量 PCR (qPCR)技术在皮肤结核(CTB)石蜡包埋组织及新鲜组织中的敏感性,以探讨在CTB石蜡包埋组织中开展结核分枝杆菌(MTB)检测的可行性。方法：应用qPCR技术检测临床确诊为CTB的6例新鲜组织样本和20例石蜡包埋组织样本的MTB阳性率。结果：新鲜组织敏感性为50%，石蜡包埋组织敏感性为35%。结论：qPCR技术可检测CTB新鲜组织和石蜡包埋组织中的MTB，前者的敏感性高于后者。     

高纯度子宫内膜细胞分离和体外培养技术及其应用

目的：分离、纯化子宫内膜间质细胞（ESC）和腺上皮细胞，建立体外ESC蜕膜化模型。方法：选择正常育龄妇女的新鲜子宫内膜组织，经多酶消化制成细胞悬液，分离、纯化间质细胞和腺上皮细胞；分别培养至细胞聚合成片，随机分组，用等渗浓度的甾体激素诱导ESC体外蜕膜化改变。结果：分离的间质细胞其纯度达95%以上，其细胞活力达92%——95%。在此体外培养系统中，ESC对生理剂量激素的应答出现与活体相仿的蜕膜化改变。结论：利用此技术可在细胞和分子水平上研究子宫内膜的各种功能及其调节。     

表皮生长因子受体及nm23在葡萄胎和恶性滋养细胞肿瘤中的表达

葡萄胎是一种与妊娠有关的良性病变,其中１０％～１５％可发生恶变。目前,临床还没有能准确预测葡萄胎恶变的可靠性指标。本研究通过检测表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及ｎｍ２３在葡萄胎及恶性滋养细胞肿瘤中的表达,以探讨二者在葡萄胎恶变过程中的意义。一、材料和方...     

三羟异黄酮对HER-2／neu过度表达乳腺癌裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用

背景：血管生成是判断肿瘤预后的一个重要标志。原癌基因HER-2／neu高表达乳腺癌患者预后不良，大量研究资料表明三羟异黄酮对乳腺癌有抗癌作用。目的：探讨乳腺癌HER-2／neu表达状态与血管生成的关系，以及三羟异黄酮对HER-2／neu过度表达乳腺癌血管生成的影响。设计：以实验动物为研究对象，随机对照观察研究。单位：一所军医大学营养与食品卫生学教研室。材料：20只健康雌性BALB／c裸小鼠，SPF级，体质量(10&;#177;2)g，鼠龄3—4周，购自第三军医大学实验动物中心。方法：实验于2001—06／2002—03在第三军医大学营养与食品卫生学教研室完成。HER-2／neu表达阴性的乳腺癌MCF-7细胞通过转染HER-2／neu基因建立HER-2／neu过度表达的MCF-7细胞(命名为MCF-7／HER-2细胞)，建立MCF-7和MCF-7／HER-2细胞BALB／c裸鼠移植瘤模型。4周后，MCF-7／HER-2细胞移植瘤裸鼠随机分为3组：对照组，三羟异黄酮处理组和抗HER-2／neu抗体处理组。3周后处死动物，切下移植瘤，检测肿瘤体积、微血管密度和血管内皮生长因子表达。主要观察指标：主要结局：裸鼠移植瘤微血管密度(micrmessel density，MVD)及血管内皮生长因子(vasular endothelial growth factor，VEGF）。次要结局：①MCF-7细胞转染HER-2／neu的鉴定。②裸鼠移植瘤体积结果：MCF-7细胞移植瘤组、MCF-7／HER-2细胞移植瘤对照组、三羟异黄酮处理组、HER-2／neu抗体处理组微血管密度分别为(16&;#177;6)，(98&;#177;21)，(56&;#177;18)，(52&;#177;19)个／视野。MCF-7／HER-2细胞移植瘤的微血管密度和血管内皮生长因子水平显著高于MCF-7细胞移植瘤，而三羟异黄酮和抗HER-2／neu抗体处理明显降低MCF-7／HER-2细胞移植瘤的微血管密度和血管内皮生长因子水平，移植瘤体积变化特点与微血管密度和血管内皮生长因子水平变化类似。结论：乳腺癌过度表达HER-2／neu促进血管生成，而三羟异黄酮能抑制HER-2／neu过度表达乳腺癌的血管生成，这有助于改善乳腺癌的预后。     

成分输血在肝移植手术中的应用和护理

目的探讨肝移植患者术中采用成分输血并进行妥善护理的重要性.找出输血过程的最佳护理方法及注意事项.方法对18例肝移植患者术中应用成分输血的情况进行总结分析.结果成分输血应用于肝移植手术中效果良好.结论护理人员熟练掌握成分输血的方法和注意事项,这对于缩短手术时间、提高肝移植手术的成功率具有重要意义.     

大豆异黄酮防治妇女雌激素缺乏相关性疾病的研究进展

大豆异黄酮是一种结构与雌激素17β-雌二醇相似，具有雌激素活性的重要植物雌激素。妇女绝经后由于雌激素水平下降，热潮红、心血管疾病、骨质疏松症和老年性痴呆等发病率升高。本文综述了近年来有关大豆异黄酮防治绝经后妇女雌激素缺乏相关性疾病的研究进展。     

2型糖尿病患者血管紧张素Ⅱ与胰岛β细胞分泌功能的关系探讨

目的 探讨不同糖耐量状态下血管紧张素Ⅱ与胰岛β细胞分泌功能的关系.方法 新诊断2型糖尿病患者42例(DM组)、空腹血糖受损/糖耐量受损者38例(IFG/IGT组)、正常对照者40名(NGT组)行静脉葡萄糖耐量试验,ELISA法测定空腹血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及脂联素水平.计算急性胰岛素分泌反应(AIR3-10)、第一时相(0～10min)胰岛素分泌曲线下面积(AUCⅠ)及峰值浓度、第二时相(10～120min)胰岛素分泌曲线下面积(AUCⅡ)、稳态模型评估胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).探讨AngⅡ与AIR3-10、AUCⅠ及峰值浓度、AUCⅡ、脂联素、HOMA-β及HOMA-IR的关系.结果 (1)DM组和IFG/IGT组AngⅡ显著高于NGT组(P＜0.05);DM组和IFG/IGT组AIR3-10、AUCⅠ及峰值浓度、AUCⅡ、脂联素显著低于NGT组(P＜0.05),DM组降低更为显著;(2)AngⅡ与AIR3-10、AUCⅠ及峰值浓度、AUCⅡ、脂联素、HOMA-β呈显著负相关(P＜0.01),与空腹血糖、糖负荷后2 h血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR呈正相关(P＜0.05);(3)多元逐步回归分析,AngⅡ与AUCⅠ、AUCⅡ独立相关.结论 AngⅡ为胰岛β细胞分泌功能的独立影响因素.排除血压、体位、药物等因素的影响,高AngⅡ水平可预测2型糖尿病患者胰岛β细胞功能受损及胰岛素抵抗.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between angiotensin Ⅱ and pancreatic islet β cell secretion function under different glucose tolerance statuses. Method Forty-two patients with newly diagnosed type 2diabetes mellitus ( DM group), 38 subjects with impaired fasting glucose/impaired glucose tolerance ( IFG/IGTgroup) ,and 40 normal control subjects (NGT group) underwent intravenous glucose tolerance test. Fasting plasma angiotensin Ⅱ ( Ang Ⅱ ) and adiponectin were assayed by ELISA. Acute insulin response from 3 to 10 min( AIR3-10 ),the area under the curve( AUCⅠ ) and the peak concentration of the first-phase ( 0-10 min) insulin secretion, the area under the curve of the second-phase( 10-120 min) insulin secretion( AUCⅡ), homeostasis model assessment for β cell function index(HOMA-β) and homeostasis model assessment for insulin resistance index(HOMA-IR) were calculated to explore the relationship with Ang Ⅱ. Result ( 1 ) The levels of Ang Ⅱ in DM group and IFG/IGT group were significantly higher than that in NGT group( P＜0.05 ). The AIR3-10, AUCⅠ and peak concentration, AUCⅡ ,adiponectin in DM group and IFG/IGT group were significantly lower than those in the NGT group ( P＜0. 05), and these results were more significantly reduced in DM group compared with those in IFG/IGT group. (2) Ang Ⅱ was negatively correlated with AIR3-10, AUCⅠ and the peak concentration, AUCⅡ, adiponectin, HOMA-β ( P＜0. 01 ), and positively correlated with fasting blood glucose,2 h blood glucose after glucose loading, fasting insulin, HOMA-IR (P＜0. 05 ). (3)Multiple stepwise regression analysis showed that Ang Ⅱ was independently associated with AUCⅠ and AUCⅡ.Conclusion Ang Ⅱ was an independent factor that affected the insulin secretion function of pancreatic islet βcells. Ruling out the effect of blood pressure, body position, drugs, and other factors, high levels of Ang Ⅱ could predict the dysfunction of pancreatic islet β cell as well as insulin resistance in patients with type 2 diabetes.     

维甲酸诱导HL-60细胞分化中对细胞周期素依赖性激酶活性的影响

目的探讨维甲酸（ＲＡ）对ＨＬ６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用与细胞周期素依赖性激酶（ＣＤＫ）活性变化的相关性。方法用５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）或芳维甲（ＡＥ）处理ＨＬ６０细胞１～４天,在观察细胞生长、四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原实验以及细胞周期分析的基础上,用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术检测ＣＤＫ２的活性,免疫沉淀法分析结合于ＣＤＫ２和ＣＤＫ４上的相应的细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ和Ｄ的量。结果ＨＬ６０细胞在ＡＴＲＡ或ＡＥ作用下,细胞增殖减慢,对ＮＢＴ的还原能力明显增强,９０％左右的细胞被阻滞在Ｇ１／Ｇ０期;在Ｇ１到Ｓ期转换过程中起关键作用的ｃｙｃｌｉｎＥ／ＣＤＫ２的活性显著下降,结合于ＣＤＫ４上的ｃｙｃｌｉｎＤ１的量减少。结论ＲＡ抑制ＨＬ６０细胞增殖并诱导其分化可能与ＣＤＫ２和ＣＤＫ４的活性下降有密切关系