小鼠腹腔巨噬细胞趋化和吞噬功能中SRC-3的作用研究

目的 探讨类固醇受体辅活化子（SRC）-3蛋白在脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞趋化和吞噬功能中的作用.方法 健康SPF级雌性野生型（SRC-3＋/＋）小鼠、SRC-3基因敲除（SRC-3-/-）小鼠各5只,分别分离和原代培养腹腔巨噬细胞,并相应分为SRC-3＋/＋组和SRC-3-/-组.收集并调整细胞浓度为1×106/ml,接种于6孔板,1 ml/孔,给予10 μg/ml LPS刺激,分别在刺激前（0 h）、刺激后4 h和12 h收集腹腔巨噬细胞.通过Western blot测定腹腔巨噬细胞Toll样受体4（TLR4）的表达,并通过transwell趋化实验和中性红吞噬实验,分别测定腹腔巨噬细胞的趋化指数（CI）和吞噬功能.结果 LPS诱导前两组腹腔巨噬细胞TLR4的蛋白表达和CI差别无统计学意义,但SRC-3-/-组的吞噬功能显著低于SRC-3＋/＋组（P＜0.01）;无论是SRC-3＋/＋组,还是SRC-3-/-组,LPS诱导4 h和12 h后,两组腹腔巨噬细胞TLR4的表达和CI均显著增高（P＜0.01）,但在相应时间点,SRC-3-/-组与SRC-3＋/＋组相比差别无统计学意义.LPS刺激4 h后,两组吞噬功能均显著增加（P＜0.01）,但SRC-3-/-组增加的程度显著低于SRC-3＋/＋组（P＜0.01）;相反,LPS刺激12 h后,两组吞噬功能均受到不同程度的抑制（P＜0.05或P＜0.01）,且SRC-3-/-组较SRC-3＋/＋组抑制的程度更低（P＜0.01）.结论 SRC-3调节腹腔巨噬细胞的先天性免疫功能可能与吞噬功能有关,而与其趋化功能无关.     

树突状细胞经EB病毒膜抗原gp340刺激后诱导抗肿瘤免疫应答

目的：探索利用树突状细胞（dendritic cells，DC）制备针对EB病毒感染相关性肿瘤的疫苗，以解决EB病毒相关性肿瘤在机体内的免疫逃逸。方法：来源于正常人骨髓的CD34+造血干/祖细胞，体外以重组hGMCSF，hTNFα，hIL4，hIL3诱导培养2周，扩增出功能成熟的DC，经EB病毒表面膜糖蛋白gp340刺激，探讨DC诱导T淋巴细胞介导免疫应答的能力，观察负载抗原gp340 DC诱导出的抗原特异性CTL对EB病毒相关性肿瘤细胞的杀伤作用。结果：从人骨髓细胞中诱导扩增出的DC具有良好的免疫刺激活性；EB病毒表面膜糖蛋白gp340可有效负载DC，DC加工处理抗原后激发T淋巴细胞增殖反应的能力进一步增强；在EB病毒相关性肿瘤细胞的杀伤实验中，只有负载了抗原gp340的DC，才能刺激特异性CTL杀伤EB病毒相关性肿瘤细胞。结论：以控制EB病毒感染的疫苗致敏DC，能促进抗原提呈并启动抗肿瘤免疫，体外可有效杀伤EB病毒相关性肿瘤细胞。DC疫苗作为一种针对EB病毒相关性肿瘤的新型治疗性疫苗，会有着良好的研究价值和开发前景。     

启发式教学法在防原医学课程中的应用与探讨

伴随着核、化、生武器与公共卫生突发事件发生态势的新变化和新军事变革的推进,从事军事医学的教师更加注重育人方案的调整和发展叭。近年来,作者尝试将启发式教学法应用于防原医学教学中,以期培养基础理论扎实、创新能力强的优秀军事医学人才。现将启发式教学法的心理学基础与应用实践探讨如下,供同行参考。     

Egr-1启动子调控的造血因子基因疗法对SCID小鼠辐射防护的初步探讨

目的 探讨辐射诱导启动子调控的造血因子基因表达对照射后造血保护的作用。方法 将构建的携带有Egr-1启动子的Flt3配基（FL）cDNA和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）cDNA双顺反子表达载体导入基质细胞后，联合人CD34^ 细胞输入经亚致死剂量照射的重症联合免疫缺陷（SCID）小鼠体内，观察外周血象动态改变和人造血细胞及其基质细胞植入的变化。结果 实验组与对照组相比外周血白细胞下降幅度明显减轻，恢复加快，骨髓可见绿色荧光阳性的基质细胞，而各组间骨髓中CD45^ 细胞、CD34^ 细胞、CFU－GM及骨髓有核细胞计数差异无显著性。结论 Egr-1启动子调控的造血因子基因疗法具有一定的辐射造血保护作用。     

烧伤对小鼠巨噬细胞白介素12和T细胞干扰素γ、白介素4表达的影响

目的 探讨深Ⅱ度烧伤对小鼠巨噬细胞和T细胞的增殖分化及其白细胞介素12（IL－12）、干扰素γ（IFN-γ）和白细胞介素4（IL－4）基因表达的影响。方法 小鼠背部12％TBSA深Ⅱ度烧伤。分离并计数腹腔巨噬细胞,RT－PCR检测其IL－12 p35和p40亚基的基因表达水平;测定脾体比,脾脏组织学观察,分离脾脏T细胞,RT－PCR检测其IFN－γ和IL－4的基因表达水平。结果 （1）伤后3d时腹腔巨噬细胞数量显减少,此后迅速恢复;（2）伤后腹腔巨噬细胞IL－12 p35和p40的基因表达增强;（3）伤后脾脏指数增加,脾脏淋巴细胞核分裂相增多;（4）伤后脾脏T细胞的IFN－γ和IL－4表达量增加。结论 12％ TBSA深Ⅱ度烧伤能够刺激小鼠巨噬细胞的IL－2表达和T细胞的增殖分化以及其IFN－γ与IL－4的基因表达。     

严重创伤后应激反应的调控机理

Traumatic stress in the normal individual results in activation of the sympatho - adrenal system caus-ing a rise in noradrenaline and adrenaline, acute phase response in liver , and activation of the hypothalamic - pituitary -adrenocortical(HPA)system resulting in elevated levels of cortisol. Studies in animals and in humans with posttraumatic stress disorder indicate that successful adaptation to stress is a prerequisite for the survival of all organisms living in an enviroment in which noxious stimuli are constantly present.     

CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响

目的:观察CXCR4基因转染对大鼠真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,dMSCs)分化、增殖、迁移等生物学性状的影响。方法:分别采用荧光激活细胞分类法、绘制细胞生长曲线法、细胞培养分化诱导法和Transwell小室培养体系中化学趋化法,观察CXCR4基因转染后,CXCR4阳性细胞数目以及dMSCs增殖、分化和迁移能力的变化情况。结果:CXCR4基因转染后,CXCR4阳性dMSCs数目明显高于对照组(P<0.05),dMSCs增殖能力略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);从Transwell小室上层迁移到下层的dMSCs明显高于对照组(P<0.05)。同时,转染CXCR4基因的dMSCs可向成脂、成骨、成肌细胞方向分化。结论:CXCR4基因转染后,dMSCs中CXCR4表达增加,并有效地增强其迁移能力,且未影响dMSCs的增殖和分化能力。     

贫铀弹伤害及其医学防护

贫铀在军事上主要用于加固装甲和制造贫铀弹。贫铀武器多次在实战中被使用,造成人员死伤,装备破坏,环境污染,产生了严重后果。本从贫铀弹的4种杀伤因素、贫铀弹伤害的主要临床病理特点、医学防护和救治几个方面阐述了贫铀弹所致的伤害及其医学防护,同时也对防护中几个基本问题提出了自己的看法。     

微小RNA分子miR-21和miR-22对C2C12细胞成肌分化影响的研究

目的探讨微小RNA（microRNAs）分子miR-21和miR-22对于C2C12细胞体外成肌分化进程的影响。方法以C2C12细胞体外成肌分化为模型,Northern blot检测miR-21和miR-22两个分子在分化过程中的表达变化及组织表达谱,转染DNA／LNA杂合体反义链进行loss-of-fuction功能研究,RT-PCR分析其对分化相关分子的影响。结果成功建立C2C12细胞体外成肌分化模型,2个分子在分化过程中均表达上调,且它们具有各自的组织分布特点;建立了以DNA／LNA杂合体反义链为手段的microRNAs研究的loss-of-fuction平台;与对照组比较,抑制这2个microRNAs对于成肌分化相关的骨骼肌α-肌动蛋白、成肌素和MEF-2D等分子的表达没有影响。结论抑制miR-21和miR-22在C2C12细胞成肌分化过程中的上调不影响其分化,说明这2个分子对于分化的进程影响不大。