持久性豆状角化过度症的临床、病理及免疫组化特征研究

目的：提高对持久性豆状角化过度症的认识，探讨其临床、病理、免疫组化特征及治疗方法。方法：分析1例持久性豆状角化过度症患者的临床、病理、免疫组化特征及治疗方法。结果：本例为19岁的男性患者，因四肢多发性红棕色角化性丘疹8年就诊。皮肤组织病理检查示：表皮显著角化过度，棘层萎缩变薄，真皮乳头层有致密的淋巴细胞带状浸润。免疫组化检查示：真皮浸润的淋巴细胞绝大部分是CD3＋T淋巴细胞，CD4＋T淋巴细胞明显多于CD8＋T淋巴细胞。患者经异维A酸VI服及外用治疗1月后，皮损变平，目前该患者还在随访中。结论：持久性豆状角化过度症是一种临床少见的角化性皮肤病，CD4＋T细胞介导的免疫反应在HLP的发病中可能起着重要的作用，异维A酸口服及外用治疗该病有效。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞周期变化的初步研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）细胞周期的变化。方法：采用流式细胞仪检测SLE患者PBMCs植物血凝素（phytohemagglutinin,PHA）刺激前后细胞周期变化,并与正常人比较。结果：PHA刺激前,SLE患者PBMCs细胞周期构成与正常人无明显差异;刺激后SLE患者PBMCs G0／G1期比例降低,S期比例增高,与正常人比较差异有统计学意义。结论：SLE患者PBMCs较正常人易于活化及增殖。     

5-氮杂胞苷对IL-6启动子DNA甲基化的影响

目的：探讨DNA甲基化抑制剂对健康人外周血T淋巴细胞IL-6启动子的DNA甲基化水平以及IL-6表达的影响。方法：用DNA的亚硫酸氢钠修饰、巢式PCR和PCR产物直接测序检测10例甲基化抑制组（5-氮杂胞苷抑制甲基化的健康人T细胞）和对照组（未经5-氮杂胞苷抑制甲基化的健康人T细胞）的外周血T细胞启动子的甲基化水平,IL-6转录水平则用RT—PCR方法。结果：甲基化抑制组的T细胞IL-6启动子DNA甲基化水平较对照组明显降低,而IL-6表达较对照组明显增加。结论：5-氮杂胞件确实可以抑制健康人外周血T淋巴细胞IL-6启动子的DNA甲基化水平并促进IL-6的表达．     

IL-18在系统性红斑狼疮肾损害患者外周血中过度表达

【目的】探讨IL-18在系统性红斑狼（SLE）肾损害发生发展中的作用。【方法】采用RT-PCR及ELISA法测定了20例SLE患者（其中10例伴有肾损、10例无肾损）及10例健康人的外周血单个核细胞（PBMC）表达IL-18 mRNA和血清IL-18蛋白水平。【结果】SLE肾损组和非肾损组、健康对照组PBMC的IL-18 mRNA表达分别为1．35±0．30、0．91±0．27、0．69±0．17。SLE肾损组和非肾损组、健康对照组血清IL-18蛋白水平分别为：（799±237）pg／mL、（163±53）pg／mL、（114±39）pg／mL。SLE肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA平均表达水平较健康人、非肾损SLE患者显著增高；SLE非肾损患者血清IL-18蛋白、PBMC的IL-18 mRNA表达水平也高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】IL-18的过度表达可能在SLE特别是狼疮性肾损害过程中起着一定作用。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞中EB病毒感染与bc1-2表达的相关研究

目的　了解EB病毒、bc1 2、系统性红斑狼疮 (SLE)三者之间的关系 ,探讨EB病毒在SLE发生发展中的作用机制。方法　用流式细胞仪双色解析法检测SLE患者外周血B淋巴细胞EB病毒潜伏膜蛋白 (LMP1)和抗凋亡基因bc1 2的表达。结果　活动期患者B淋巴细胞LMP1和bc1 2的表达率均高于稳定期患者 ,两组患者均高于对照组 (P均 <0 0 1) ;SLE患者LMP1+ 细胞bc1 2表达率高于LMP1 细胞 (P <0 0 1) ,且SLE患者外周血B淋巴细胞bc1 2的表达与LMP1的表达呈正相关 (r=0 32 8,P <0 0 5 ) ,与病情积分成正相关 (r=0 339,P <0 0 1)。结论　EB病毒感染B淋巴细胞后 ,通过上调受染细胞bc1 2的表达 ,抑制B淋巴细胞的凋亡 ,参与SLE的发生和发展     

人角质形成细胞蛋白质双向电泳技术的建立和优化

目的 建立和优化人角质形成细胞蛋白质组研究样品制备方法和双向电泳技术条件.方法 体外无血清培养人角质形成细胞,以裂解液成分、上样量的选择和等电聚焦参数为侧重点,通过比较分析不同条件下电泳图谱,建立最佳双向电泳技术条件.结果 成功建立了人角质形成细胞总蛋白制备方法,优化了人角质形成细胞双相电泳技术,获得了重复性和分辫率都较理想的角质细胞总蛋白质双向电泳图谱.结论 优化后的双相电泳条件为人角质形成细胞蛋白质组学分析奠定基础.     

小鼠真皮间充质干细胞与成纤维细胞共培养对胶原分泌和TGF-β1表达的影响

Objective To explore the role of mouse dermis-derived mesenchymal stem cells (mdMSC) on skin repair. Methods mdMSC and human dermal fibroblasts were isolated and identified. Human dermal fibroblasts were cultured alone or eoeultured with mdMSC in Transwell chambers with the density ratio of human dermal fibroblasts to mdMSC being 2/5, 1/1, and 2/1. On day 4 and 8 of culture, the expression levels of hydroxyproline and transforming growth factor-beta (TGF-beta) 1 were measured in the supematant of monoculture and coculture by alkaline hydrolysis and ELISA respectively. Results The level of hydro-xyproline was significantly higher in the supematants of coculture system with a density ratio of 2/5 and 1/1 than that in monoculture supematants of human dermal fibroblasts on day 8 (both P < 0.05). Elevated level of TGF-betal was observed in all coculture supematants on day 8 (all P < 0.01) and in the supernatants of coculture system with a density ratio of 1/1 on day 4 (P < 0.05). There was no significant correlation between the expression level of TGF-betal and hydroxyproline in the coculture supernatants (r = 0.108, P ＞ 0.05). Conclusion In vitro coculture with mdMSC can increase the production of hydroxyproline and TGF-betal by fibroblasts, which may be a mechanism underlying the facilitation of skin repair by mdMSC.     

人表皮干细胞的体外培养与MSCs对其诱导的初步研究

目的：探讨人表皮干细胞体外分离培养的理想方法，初步研究骨髓间充质干细胞（MSCs）上清对其生长的影响。方法：采用中性蛋白酶-胰蛋白酶两步法收获表皮细胞，Ⅳ型胶原快速粘附分选表皮干细胞，用无血清培养基进行体外培养，采用SABC—FITC进行培养细胞鉴定。结果：胎儿皮肤和人包皮皮肤均可成功分离到表皮干细胞集落，且增殖能力强，细胞表达Bl整合素和角蛋白CK19。MSCs上清形成的条件培养基的诱导下，收集的表皮细胞形成花环样克隆，并形成成纤维样细胞。结论：用酶消化法、胶原快速粘附和无血清培养法是较理想的体外分离培养表皮干细胞的方法，MSCs可以诱导表皮细胞的定向分化。