黄荔合剂对高血压合并高胆固醇血症大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：评价黄荔合剂对高血压合并高胆固醇血症动物模型胰岛素抵抗影响。方法：将体质量300~400 g雄性成年自发性高血压大鼠（SHR）24只随机分为SHR组、模型组、黄荔合剂组,另取8只Wistar大鼠作为对照组,建立动物模型并给予药物干预,8周后进行生化检测、葡萄糖耐量试验及胰岛素钳夹实验。结果：模型、药物干预组大鼠总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇较SHR组、对照组大鼠显著增高。干预后,与模型组比较,黄荔合剂组葡萄糖耐量明显改善,胰岛素抵抗情况显著改善（P＜0.05）。结论：模型大鼠具有高血压及高胆固醇血症,糖耐量异常及胰岛素抵抗等特征。黄荔合剂改善模型大鼠的胰岛素抵抗,空腹血糖受损及糖耐量异常,具有改善代谢异常的作用。     

维生素E增强雷米普利的抗高血压心肌肥厚作用及其可能机制

目的：探讨维生素Ｅ和雷米普利对大鼠高血压心肌肥厚的作用与机制。方法：建立腹主动脉缩窄性大鼠高血压心肌肥厚模型，采和低剂量ｒａｍｉｐｌａｔ，ＶｉｔＥ和一氧化氮合酶抑制剂Ｎ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ喂养大鼠，８周后观察大鼠血压，左室／体重比值，左室心肌组织超氧化物歧化酶活性和离体主动脉内皮依赖性舒张功能。     

SPIO标记骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死大鼠的示踪研究

目的探讨超顺磁性氧化铁微粒（SPIO）体外标记骨髓间充质干细胞（BMSCs）及体内示踪移植入大鼠心肌梗死心脏的BMSCs的能力。方法使用左旋多聚赖氨酸-SPIO共培养方式标记BMSCs。采用普鲁士蓝染色观察细胞内铁颗粒,流式细胞术检测细胞活力,将经过SPIO标记的干细胞移植入心肌梗死大鼠心脏,应用1.5TMRI系统行磁标记干细胞成像。超声心动图检测各组心脏的左室射血分数（EF）,左室舒张末期内径（LVIDd）,左室收缩末期内径（LVIDs）及短轴缩短率（FS）。结果普鲁士蓝染色显示,SPIO标记的BMSCs细胞胞质内出现细小的蓝色铁颗粒,标记效率为（99.81±1.57）%;与正常未标记细胞相比较,细胞的活力差异无统计学意义（P〉0.05）。标记了SPIO的BMSCs体内MRI成像时显示,细胞移植区域信号缺失,对应区域病理切片普鲁士蓝染色可见胞浆内染色阳性的细胞。超声心动图显示,PBS组FS移植前后没有明显变化,BMSC组FS从移植前的（23.1±1.88）%上升到第1周的（31.28±4.15）%。BMSC组EF在移植前是（51.13±5.07）%,第1周时上升到（60.12±8.40）%。结论 SPIO能成功地标记BMSCs,且对BMSCs的活力无明显影响。BMSCs移植后能改善心梗大鼠的心功能。SPIO标记的BMSCs移植后在大鼠体内的分布、迁移过程可用MRI进行检测评价。     

巨噬细胞移动抑制因子诱导血管生成相关基因的表达

【目的】研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）对人血管内皮细胞表达血管生成相关基因的诱导作用。【方法】通过亚克隆，构建原核表达质粒pET22b—MIF，并转化人工程菌BL21（DE3）。用Ni-亲合柱分离纯化BL21（DE3）中经IPTG诱导表达的重组MIF。用巨噬细胞移动抑制试验鉴定复性的重组MIF的活性。分别用0、30、60、120ng／mL的重组MIF处理人血管内皮细胞12h，通过Real—time定量PCR检测人血管内皮细胞中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF—α、PDGF-α的mRNA表达。用体外血管生成试验检测重组MIF诱导人血管内皮细胞的成管腔作用。【结果】正确构建了重组质粒pET22b—MIF。经IPTG诱导，在大肠杆菌中以包涵体形式表达出重组MIF。复性的重组MIF对巨噬细胞移动的抑制水平达30％（P〈0．05）。重组MIF能特异地诱导HVECs中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF—α、PDGF-α表达，并能特异地诱导人血管内皮细胞形成管腔结构。【结论】在大肠杆菌中成功表达出MIF，MIF能特异地诱导人血管内皮细胞中血管生成相关基因的表达。     

MicroRNAs participate in the cardioprotective activity of dexrazoxane against doxorubicin-induced cardiotoxicity

Background The co-administration of dexrazoxane(DEX)with each dose of doxorubicin(Dox)is an efficient strategy to relieve Dox-induced cardiotoxicity,however,the mechanisms underlying the cardioprotective effect of DEX have not been well elucidated.MicroRNAs(miRNAs)are endogenous,small non-coding RNAs that negatively regulate gene expression in diverse biological and pathological processes.The aim of the present study was to investigate whether the certain cardiac miRNAs were involved in DOX-induced cardiotoxicity.Methods Male SD rats were randomized into five groups,including the 4-week(cumulative dose16 mg / kg)and the 8-week(cumulative dose32 mg / kg)Dox-treated groups,and the corresponding 4-week and 8-week Dox plus DEX-treated groups and the normal control group.Heart functions of the animals were detected by echocardiography.Quantitative real-time PCR was used to determine the expression of cardiac remodeling,apoptosis-related genes and mature micoRNAs of interest.Results The echocardiography detection showed that cardiac remodeling and impaired heart function were observed after 4-week and 8-week Dox treatment,and the cardiac remodeling and decreased ejection fraction(EF%)and fractional shortening(FS%)were efficiently rescued in the corresponding 4-week and 8-week Dox plus DEX-treated groups.The myocardial expression of Anp and CTGF mRNA was significantly upregulated by Dox treatment,but the upregulation of Anp and CTGF mRNA was blocked in the Dox plus DEX-treated groups.IGF-1 mRNA was significantly up-regulated in rat myocardium in Dox plus DEX-treated groups,with no significant changes of Bcl-2 and BAX mRNA expression.Mature miRNAs determination demonstrated that the myocardial miR-1 and -30e were significantly downregulated and miR-21 and -208b were significantly up-regulated in Dox treatment groups,but the above miRNA dysregulation could be efficiently reversed after DEX treatment.Conclusions DEX could tune the microRNAs dysregulation in Dox-treated rat myocardium,miRNAs participated in the cardioprotective activity of DEX against Dox-induced cardiotoxicity.     

circRNA_000203对小鼠心肌成纤维细胞纤维化表型的影响

目的:检测糖尿病小鼠心肌中环形RNAs(circ RNAs)的表达谱,探讨circ RNA_000203对心肌成纤维细胞纤维化表型的影响。方法:采用Masson染色对糖尿病db/db小鼠和db/m对照小鼠心肌组织进行胶原纤维的染色观察;用circ RNAs表达谱芯片检测糖尿病心肌中circ RNAs的表达谱;实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR)验证小鼠心肌中circ RNA_000203的表达水平;构建重组circ RNA_000203腺病毒载体,并感染小鼠心肌成纤维细胞;利用RT-q PCR和Western blot检测过表达circ RNA_000203后,小鼠心肌成纤维细胞中纤维化相关基因Col1a2、Col3a1、α-SMA的m RNA和蛋白表达变化。结果:Masson染色结果显示,与对照db/m小鼠相比,糖尿病db/db小鼠心肌组织出现明显纤维化。circ RNAs芯片检测结果表明circ RNAs在糖尿病心肌中异常表达,其中circ RNA_000203表达显著上调。RT-q PCR结果证明重组circ RNA_000203腺病毒载体构建成功,RT-q PCR和Western blot结果均显示过表达circ RNA_000203后,心肌成纤维细胞中Col1a2、Col3a1、α-SMA的表达均显著增强。结论:circ RNA_000203在糖尿病心肌中显著上调,其可特异地促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达和成纤维细胞向肌成纤维细胞表型的转化。     

一种方便酶切鉴定的shRNA表达载体改建方法

目的 建立一种用单限制性内切酶酶切来快速筛选重组小发夹RNA(shRNA)表达载体的方法.方法 制备包含单一限制性内切酶Cta Ⅰ识别序列的双链DNA插入片段(Cla Ⅰ位点两侧碱基序列不互补).与BamH Ⅰ和Hind Ⅲ线性化的shRNA表达载体pSilencer-4.1(不含Cla Ⅰ识别序列)构建载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ.用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,将酶切产物与表达绿色荧光蛋白(GFP)shRNA的DNA模板(不含Cla Ⅰ识别序列)做连接反应.构建GFP shRNA表达质粒.提取阳性克隆质粒DNA,行Cla Ⅰ单酶切鉴定,对未被Cla Ⅰ线性化的质粒行DNA测序鉴定.结果 DNA测序表明正确构建了shRNA表达载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,以pSilencer-4.1-Cla Ⅰ为载体构建的GFPshRNA候选重组子中,不能被Cla Ⅰ线性化的均为GFP shRNA表达质粒.结论 构建了可用于制备shRNA表达质粒的通用载体pSilencer-4.1-Cla Ⅰ,所引入的单一的Cla Ⅰ识别位点可以用来快速地筛选重组shRNA表达质粒.     

我国儿童青少年群体性风湿热一级预防方法的建立

风温热/风心病(RF/RHD)至今仍是一个全球性重大社会保健问题,目前仍无妥善的解决办法。我国每年学龄儿童初发RF(ARF)有8万例,新发RHD近6万例。据世界卫生组织估计,发展中国家患RF/RHD1200万例,年死亡40万例,成千上万人致残,主要是儿童和青年。造成上述严重情况的原因很多,但最根本的是至今尚无有效简易可行的群体性风湿性一级预防方     

三七总皂苷对急性心梗后左室重构大鼠心功能的改善作用

目的 研究三七总皂苷(PNS)对急性心肌梗塞(AMI)后左室重构(LVRM)大鼠心功能的作用,并与比索洛尔的疗效作比较.方法除假手术组外采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立AMI模型,术后24h后随机分为正常对照组和实验组,连续4周分别灌胃给予生理盐水2 mg· kg-1、比索洛尔25 mg·kg-1和PNS40、80、120 mg·kg-1,观察PNS和比索洛尔对病鼠室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左室舒张末期内径(宽度)(LVIDd)、室间隔收缩末期厚度(IVSs)、左室收缩末期内径(宽度)(LVIDs)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、左室后壁收缩末期厚度(LVPWs)、左室射血分数(EF)、左室收缩百分率(FS)、二尖瓣口舒张早期血流速度(MV)、心率(HR)等反映心功能变化指标的影响.结果PNS高、中剂量组与比索洛尔组的MV、EF均明显上升(P＜0.01),中剂量PNS组及比索洛尔组的FS明显上升、LVIDd和LVIDs则减小(P＜0.01～0.05).结论PNS及比索洛尔均具有改善AMI后LVRM病鼠心功能的作用,可用于治疗心梗后的左室重构.     

同种心肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死面积的影响

[目的]探讨乳鼠心肌细胞移植到心肌梗死后大鼠心肌组织内生长发育情况及其对实验性大鼠急性心肌梗死面积的影响.[方法]30只雄性SD大鼠经左冠状动脉前降支永久性结扎建立前壁心肌梗死模型并随机分为对照组和实验组.大鼠心肌梗死手术后第4周进行细胞移植.[结果]光镜显示移植的乳鼠心肌细胞存活在梗死的心肌中、生存良好,实验组与对照组比较,能显著减少实验性大鼠急性心肌梗死面积(P＜0.05).[结论]乳鼠心肌细胞可以被移植并在大鼠梗死心肌中存活.乳鼠心肌细胞移植到大鼠心肌梗死区域可明显减轻心肌梗死面积.