β2受体阻断药降低梗死后心肌细胞环磷腺苷的含量

目的研究心肌梗死后2-8周心肌细胞β2受体对环磷腺苷(adenosine cyclophosphate,cAMP)含量影响的动态变化,探讨心肌梗死后β2受体在交感神经激动作用中所占地位。方法Wistar大鼠20只随机分为:正常对照组、心肌梗死后2周组、4周组、8周组。分离心肌细胞,每组制备35份样品,按给药不同随机分为7小组,用酶联免疫方法测定心肌细胞环磷腺苷含量。结果在正常和梗死后2、4、8周心肌细胞,β2受体激动可使心肌细胞环磷腺苷含量(pmol／105 cells)分别升高98％、134％、148％和151％(P<0．05)。心肌梗死后,选择性β2受体阻断药对β受体激动引发的心肌细胞环磷腺苷含量的抑制程度增高,选择性β1受体阻断药对其的抑制程度下降,非选择性β受体阻断药对β受体激动引发的正常和心肌梗死后心肌细胞环磷腺苷含量升高均能抑制。结论心肌梗死后β2受体在β受体激动引发的心肌细胞环磷腺苷含量升高作用中所占比例升高。心肌梗死后β2受体在交感神经激动产生的正性肌力和正性变时作用中地位可能提高。     

代谢综合征大鼠左心室外膜收缩功能不全与心外膜脂肪小窝蛋白-1表达降低平行出现

目的:探讨代谢综合征大鼠心脏收缩功能及心外膜脂肪小窝蛋白-1表达的改变。方法:16只6周龄雄性SD大鼠随机分为代谢综合征模型组及对照组。模型大鼠给予小剂量链脲佐菌素、N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐联合高脂、高盐、高糖饲养6周。实验开始及结束时测定大鼠的体重、空腹血糖、胰岛素、血脂、口服糖耐量及血压水平,超声检测大鼠左心室射血分数及应变指数。实验结束时分离心外膜脂肪检测小窝蛋白-1的表达。结果:6周后,模型大鼠体重[(462±31.6)g比(406±49.4)g]、空腹胰岛素[(5.47±2.26)ng/mL比(2.69±0.61)ng/mL]、口服糖耐量曲线下面积[(1544.6±502.2)mg/(L.min)比(911.0±69.8)mg/(L.min)]、甘油三酯[(0.66±0.44)mmol/L比(0.28±0.07)mmol/L]、总胆固醇[(1.71±0.43)mmol/L比(1.01±0.29)mmol/L]及低密度脂蛋白水平[(0.66±0.25)mmol/L比(0.22±0.08)mmol/L]、收缩压[(163.0±26.0)mmHg比(117.5±11.5)mmHg]及舒张压[(121.8±15.5)mmHg比(90.5±16.6)mmHg]均高于对照组(P<0.05),而空腹血糖及高密度脂蛋白水平与对照组比较无明显差异(P>0.05)。左心室外膜收缩期周向应变及应变率均低于对照组[(-7.20±1.46)%比(-9.87±1.93)%],[(-1.56±0.35)1/s比(-2.19±0.49)1/s;均P<0.05]。模型大鼠心外膜脂肪小窝蛋白-1的表达明显低于对照组。结论:代谢综合征大鼠左心室外膜收缩功能不全与心外膜脂肪小窝蛋白-1表达降低平行出现。     

miRNA-21 regulates proatherosclerotic gene expression in macrophages

Background MicroRNAs(miRNANAs) are endogenous, small non-coding RNAs that negatively regulate gene expression in diverse cardiovascular diseases. However, the roles of miRNANAs in atherosclerogenesis needs to be elucidated. In the present study, the effect of miRNA-21 on pro-atherosclerotic genes expression was examined. Methods The pro-atherosclerotic genes including COX2, VCAM1, ICAM1, MCP1 and miRNA-21 were detected in ox-LDL-treated mouse macrophage RAW264.7 cells. ApoE knock-out(ApoEKO) mice were fed with high-fat diet for 16 weeks, and the abdominal aorta were fixed and used for miRNA-21 hybridization. Lentivirus-based vectors for enforced expression of miRNA-21 and antisense miRNA-21were prepared. The expression of proatherosclerotic genes was determined in the RAW264.7 cells with lentivirusmediated up-regulation of miRNA-21. Results COX2, VCAM1, ICAM1 and MCP1 could be up-regulated by ox-LDL treatment, and 50 μg / mL ox-LDL could significantly increase the expression of above four genes in ox-LDL EAW264.7 cells. miRNA-21 could also be markedly up-regulated in ox-LDL-induced RAW264.7cells. The result of miRNANA hybridization showed that miRNA-21 was strongly expressed in atherosclerotic plaques but not in normal aorta. Lentivirus-mediated over-expression of miRNA-21 could significantly enhance expressions of COX2, VCAM1, ICAM1 and MCP1 in RAW264.7 cells, which could be reversed by antisense miRNA-21 mediated by lentivirus vector. Conclusions miRNA-21 could be modulated by ox-LDL in macrophage RAW264.7 cells, and miRNA-21 could enhance COX2, VCAM1, ICAM1 and MCP1expressions in macrophages.     

血管紧张素转换酶2基因型与厄贝沙坦改善高血压患者左室重构及功能的关系

背景一些研究结果提示血管紧张素转换酶2(ACE2)具有调节心脏结构和功能的作用,ACE2基因多态性与左室结构和功能相关,但 ACE2基因型对降压药物改善高血压患者的左室重构和功能是否有影响,目前尚不清楚。目的观察 ACE2基因 G9570A 多态性与厄贝沙坦影响高血压患者左室结构及功能的相关性。方法选择坐位收缩压<180 mmHg 和(或)舒张压90～109 mmHg 无血缘关系的汉族原发性高血压患者395例(男性205例,女性190例),均服用厄贝沙坦治疗,起始剂量150 mg/d,治疗4周后血压未达到有效标准者药量加倍,共观察48周。应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测 ACE2基因 G9570A 多态性,并随机抽取20份标本进行基因测序以核实基因分型。按性别分组分析降压幅度及左室结构和功能各参数的改变值与基因型的关系。结果经过48周厄贝沙坦治疗,所有患者血压明显下降(P<0.01)。不同亚组间血压下降幅度无统计学意义(P>0.05)。携带 A 等位基因患者左室质量和左室质量指数下降幅度及心脏功能改善程度显著高于其他亚组(P<0.05)。结论 ACE2基因型与左室质量指数下...     

以重组CD74胞外片段抑制巨噬细胞移动抑制因子（MIF）功能域活性

目的：巨噬细胞移动抑制因子（MIF）第50-65位氨基酸残基（MIF50-65）是其生物活性功能域。MIF需与Ⅱ型穿膜蛋白CD74的胞外片段结合后引发信号传导反应。本文拟筛选能特异结合MIF50-65的CD74胞外截短体片段，并研究重组该CD74截短体对MIF50-65活性的抑制作用。方法：利用酵母双杂交实验筛选MIF50-65与CD7473-149、CD74109-149、CD74109-232、CD7473-232中特异结合的CD74截短体。利用原核表达系统，在大肠杆菌中诱导表达重组CD74截短体多肽。用GSTrap亲合柱纯化重组蛋白，通过体外血管生成实验鉴定重组CD74截短体对MIF的阻断作用。结果：只有MIF50-65与CD7473-232共转化的酵母可以在SD／-Leu-His-Trp-Ade培养基上生长，且α-x-gal底物反应为蓝色。构建了重组质粒pGEX-4T-CD7473-232，经IPTG诱导后特异表达出可溶性的重组蛋白。重组CD7473-232能特异地阻断MIF的促血管生成作用。结论：CD7473-232能与MIF50-65特异结合，并对MIF生物活性有抑制作用。     

广州地区中年人群血脂流行趋势的探讨

目的了解广州地区中年人群血清血脂水平的流行趋势。方法研究对象包括工人和农民。血脂测定由美国疾病控制中心标准化的实验室完成。结果1983～1994年，十年广州地区中年人群血脂水平具有上升的趋势，尤其1987～1988年农民组男性的甘油三酯升幅最大，上升达59．3％，而工人组总胆固醇的均值亦已接近200mg／dl工人组血脂水平均明显高于农民组。结论由于这些危险因素的升高而导致冠心病、脑卒中等心血管疾病的发病增多，将成为这些人群健康的潜在威胁。     

微环境中人骨髓间充质干细胞向心肌细胞表型分化的实验研究

目的 探讨人骨髓间充质干细胞(hBMSC)在非接触共培养的微环境中向心肌细胞分化的能力.方法 密度梯度离心法分离培养hBMSC,用流式细胞仪鉴别其表面标记特征.采用transwell按1:10的比例共同培养hBMSC和SD乳鼠心室肌细胞.用聚合酶链反应检测心肌转录因子GATA4的基因表达水平.免疫细胞化学、免疫荧光检测横纹肌α-辅肌动蛋白、结蛋白、肌钙蛋白(cTn)T和cTnI等心肌细胞标志蛋白的表达.结果 hBMSC的标志物主要为CD29(98.64%±0.80%)和CD44(96.70%±1.50%),而极少表达CD105(2.21%±0.60%)、CD11b(0.80%±0.05%)、CD45(1.39%±0.13%)和CD34(1.73%±0.08%).与心肌细胞共培养后第7天可在hBMSC细胞中观察到少量搏动的细胞,随着诱导时间的增加,细胞的搏动更规则、有力.与心肌发育有关的转录因子GATA4基因在诱导后1、2、3周均有表达.共培养后2周,检测的心肌标志蛋白均有阳性表达,分别是结蛋白,α-辅肌动蛋白,cTnI和cTnT.荧光标记也检测到cTnT和cTnI的阳性表达.结论 hBMSC具有向心肌细胞分化的潜能,在共培养的微环境中,可以分化成心肌细胞表型,其机制是通过心肌细胞的旁分泌作用,而不需要hBMSC与心肌细胞的直接接触.     

微小RNA可在人骨髓间充质干细胞分化来源的心肌样细胞中表达

目的研究人骨髓间充质干细胞（hMSCs）分化来源的心肌样细胞中代表性微小RNA（miRNAs）的表达。方法利用FITC-偶联的CD29、CD34和CDllb抗体在流式细胞仪上检测分离的hMSCs的抗原表型。分别用5-氮胞苷（5-aza）和乳鼠心肌非接触共培养法诱导传至3代的hMSCs分化为心肌样细胞。用免疫化学法检测hMSCs分化来源的心肌样细胞中心肌特异的α-肌节辅肌动蛋白和心肌肌钙蛋白（cTnI）的表达：利用逆转录PCR和DNA测序鉴定5个代表性的心脏特异的初级微小RNA（pri-miRNAs）的表达。结果hMSC标志分子CD29表达率为98．87％．而造血细胞标志分子CD34和CDllb的表达率只是5％和0．4％。免疫化学分析显示．分别经5-aza和乳鼠心肌非接触共培养诱导的hMSC均可表达α-肌节辅肌动蛋白和cTnI,而在未分化的hMSCs中无表达。miRNA-143,-181可在5-aza诱导的hMSCs中表达,miRNA．143,-181,-206,-208可在乳鼠心肌非接触共培养的hMSCs中表达．而两种诱导方法均未能诱导miRNA-1-2在hMSCs中表达。结论利用5-aza和乳鼠心肌非接触共培养法诱导hMSCs分化的心肌样细胞中可以表达不同的心脏特异的pri-miRNAs。     

缺氧—复氧对培养的大鼠心肌细胞损伤与细胞凋亡的影响

目的探讨培养的大鼠心肌细胞在缺氧（缺血）和缺氧－复氧（再灌注）状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况。方法采用１～３天新生ＳＤ大鼠,常规方式的培养心肌细胞,给予模拟缺氧（缺血）液、模拟复氧（再灌注）液以及干预因素（终浓度为２００Ｕ／ｍＬ的ＳＯＤ）处理,分为缺氧－复氧损伤组（Ｈ／Ｒ组）、缺氧－复氧损伤组＋ＳＯＤ（Ｈ／Ｒ＋ＳＯＤ组）、缺氧预处理组（ＨＰ组）和正常对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ组）,进行以下指标观察：